龙胆中龙胆碱制备工艺制造技术

本发明专利技术涉及龙胆科植物龙胆源龙胆碱的提取工艺，是将龙胆原药材的根茎粉成粗粉，用２－２０倍亲水性有机溶剂在６０－１００℃碱性水浴环境下回流提取２－４小时，趁热抽滤，滤液减压回收，所得溶剂经处理后再利用，浸膏再经减压干燥得到龙胆碱粗品３；龙胆碱粗品亲水性溶剂溶解，亲脂性有机溶剂２－４∶１萃取，取亲脂性有机溶剂层减压回收干燥得龙胆碱粗品２；龙胆碱粗品２以酸性水溶液溶解，过滤得溶液，此溶液经树脂柱富集，再经层析柱层析，得龙胆碱精制产品。本发明专利技术具有工艺简洁，成本低兼，污染小，产品产量及纯度较高等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属药物的制备工艺领域，具体是龙胆中龙胆碱的制备工艺。
技术介绍
龙胆是龙胆科龙胆属龙胆、三花龙胆、条叶龙胆或坚龙胆等植物的干燥根及根茎， 主要分布于东北及华北地区。其药理活性成分为龙胆苦苷和龙胆碱，以及秦艽丙素等。目 前认为，龙胆碱是龙胆中以龙胆苦苷为代表的裂环烯醚萜苷类成分在碱性环境下经结构修 饰转化而来.有研究表明，龙胆苦苷在体内经肠道菌群作用转化成龙胆碱，龙胆的药理作 用是龙胆苦苷与龙胆碱的协同作用。药理研究表明，龙胆碱具有抗炎、降血压、升血糖、抗过 敏性休克和抗组织胺等作用，特别是在抗高热惊厥方面表现出较好的疗效，具有广泛的应 用前景。基于以上原因，本专利技术对龙胆碱的制备工艺进行了详细研究。关于龙胆碱的制备方法，国内有文献报道，采用龙胆苦苷经碱性处理转化成龙胆 碱，再经硅胶柱反复柱层析分离得到产物，如西北大学硕士学位论文《单萜吲哚并吡定生物 碱的仿生合成龙胆汤的复方研究》中提及以秦艽碱提及龙胆苦苷通过氨水转化，通过反复 硅胶柱层析而得的较少的龙胆碱(log龙胆苦苷仅得0.07g).此外，亦有通过碱化的秦艽 粗提，再经硅胶柱层析而得，如四川大学硕士论文《粗茎秦艽及其生物碱类成分研究》即通 过此方法得到秦艽甲素，但其工艺较为复杂(在提取过程中需先得到龙胆苦苷)，且产量不 高，并大量使用有机溶剂(层析过程中多以三氯甲烷及甲醇为溶剂，反复层析过程中损失 及污染较大).同时，层析用硅胶为有可再生材料，不利于工业生产)，限制了工艺的应用领 域。本工艺在前人的基础之上进行改进，首次以龙胆药材为原材料，碱性处理后直接 转化生成目标成分，省去了以龙胆苦苷的提取过程，且提取溶剂回收后经调试可反复利 用.以树脂及相应的亲水性有机溶剂进行粗分，具有可再生的特点，以上过程所用材料均 可再利用，降低成本的同时，也具有一定的环保效果.尽管后期纯化过程用到部分有机溶 溶剂，但用量明显减少(每kg药材仅使用有机溶剂共约800ml)，龙胆碱产量有所提高(平 均为0. 94mg/kg)，纯度较高，利于实验研究的开展。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种工艺简洁，成本低廉，环保低污染的且能得到较多的龙 胆碱的提取工艺。在提取过程中，直接以龙胆药材为原材料，省去了以龙胆苦苷的提取过 程，以树脂及相应的亲水性有机溶剂进行粗分，省去不可再生材料硅胶及污染较重的有机 溶剂的分离方法，具有环保及可再生的特点.后期虽用到层析，但已到纯化后期，所用的材 料少，具有低污染的特点。本专利技术的提取工艺包括如下方法龙胆根茎粉碎，过20-40目筛，得粗粉。用亲水性有机溶剂在碱性环境下20-120°C 回流提取2-4次，每次2-12h，抽滤，合并滤液。减压回收溶剂，溶剂再处理反复用于药物的提取，浸膏加适量酸性水溶液溶解。以亲脂性有机溶剂2-8 1进行萃取，亲脂层减压回收 得浸膏，浸膏加适量水溶液溶解，放置后过滤，得红棕色液体。红棕色液体经树脂柱富集，以 蒸馏水、20-90 %亲水性有机溶剂梯度洗脱，薄层根踪，取目标流分。将上述所得溶液浓缩近 干，过层析柱，有机溶剂系统梯度洗脱，洗脱比例为了 500-100 1，薄层跟踪，所得流分减 压回收得龙胆碱纯品。上述方案中，亲水性有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、丙二醇、丙三 醇、乙酸乙酯、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺。上述方案中，碱性环境的条件为4%，5%， 6%，8%，10% 的氢氧化钠、5%、10%。15%、20%，及 25%氨水。 上述方案中，酸性水溶液为硫酸、盐酸，硝酸、乙酸。上述方案中，亲脂性有机溶剂 为石油醚、乙醚、环己烷、四苯甲烷、苯、甲苯、二甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳。上述方案中，树脂柱为大孔吸附树脂、阳离子交换树脂、阴离子交换树脂。上述方案中，层析柱为硅胶、聚酰胺、氧化铝，葡萄糖聚酰胺。具体实施例方式实例1称取500g龙胆药材，粉碎过20目筛，用亲水性碱性有机溶剂按8 1浸泡过液，ph 值=8-10，次日回流提取2次，每次2小时提取温度为50°C，合并提取液，减压回收溶剂，回 收后的溶剂用密度剂及Ph试剂监测，调节回收液使之与原提取液相同，如此可反复利用。 浸膏加倍量水溶解，二氯甲烷2 1萃取4次，二氯甲烷层减压回收后，加1倍量酸水溶解， 放置24h，过滤去沉淀，滤液过强酸型阳离子交换树脂，柱子内径为2. 5cm，高度为22cm，以 蒸馏水洗至无色，再以40%乙醇洗至无色，然后用90%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，回收 近干，过300-400目硅胶柱层析，上样量与硅胶的比例为30-50 1，样品干法装柱，干法上 样，先以二氯甲烷洗脱3-4个柱体积，然后以二氯甲甲醇=300 1洗脱，IOOml每流分， 薄层跟踪，合并相同组成分。减压回收后在瓶壁处析出结晶，最后得0.52g晶体龙胆碱，经 HPLC法测定含量为99%。实例2称取IOOOg龙胆药材，粉碎过20目筛，用亲水性碱性有机溶剂按10 1浸泡过 液，Ph值=8-10，次日回流提取3次，每次3小时提取温度为55°C，合并提取液，减压回收 溶剂，回收后的溶剂用密度剂及Ph试剂监测，调节回收液使之与原提取液相同，如此可反 复利用。浸膏加倍量水溶解，三氯甲烷2 1萃取5次，二氯甲烷层减压回收后，加2倍量 酸水溶解，放置24h，过滤去沉淀，滤液过强酸型阳离子交换树脂，柱子内径为5. 5cm,高度 为45cm，以蒸馏水洗至无色，再以50%乙醇洗至无色，然后用90%的乙醇溶液洗脱，收集洗 脱液，回收近干，过100-200目氧化铝层析，上样量与硅胶的比例为40 1，样品干法装柱， 干法上样，先以二氯甲烷洗脱3-4个柱体积，然后以二氯甲甲醇=200 1洗脱，IOOml每 流分，薄层跟踪，合并相同组成分。减压回收后在瓶壁处析出结晶，最后得0. 90g晶体龙胆 碱，经HPLC法测定含量为98. 6 %。实例3称取1500g龙胆药材，粉碎过20目筛，用亲水性碱性有机溶剂按12 1浸泡过 液，Ph值=8-10，次日回流提取4次，每次2小时提取温度为60°C，合并提取液，减压回收溶齐IJ，回收后的溶剂用密度剂及ph试剂监测，调节回收液使之与原提取液相同，如此可反复 利用。浸膏加倍量水溶解，三氯甲烷4 1萃取3次，三氯甲烷层减压回收后，加5倍量酸 水溶解，放置24h，过滤去沉淀，滤液过强酸型阳离子交换树脂，柱子内径为6. 5cm，高度为 60cm,以蒸馏水洗至无色，再以40%乙醇洗至无色，然后用90%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱 液，回收近干，过200-300目硅胶柱层析，上样量与硅胶的比例为30-50 1，样品干法装柱， 干法上样，先以二氯甲烷洗脱3-4个柱体积，然后以二氯甲甲醇=150 1洗脱，IOOml每 流分，薄层跟踪，合并相同组成分。减压回收后在瓶壁处析出结晶，最后得1. 42g晶体龙胆 碱，经HPLC法测定含量为98. 7%·实例 4 称取2000g龙胆药材，粉碎过20目筛，用亲水性碱性有机溶剂按14 1浸泡过 液，Ph值=8-10，次日回流提取2次，每次2小时提取温度为65°C，合并提取液，减压回收 溶剂，回收后的溶剂用密度剂及Ph试剂监测，调节回收液使之与原提取液相同，如此可反 复利用。浸膏加倍量水溶解，二本文档来自技高网...

【技术保护点】
龙胆碱的提取工艺，其特征在于将龙胆原药材的根茎粉成粗粉，药材粗粉∶亲水性有机溶剂的重量比＝１∶８～２０，提取温度为４０－１００℃，提取环境为碱性（ｐｈ值控制在８～１２）趁热抽滤，滤液减压回收，所得溶剂经处理后反复利用，滤液再经减压干燥得到含龙胆碱粗品２；龙胆碱粗品２以亲水性溶剂溶解，亲脂性有机溶剂１－６∶１萃取，亲脂性有机溶剂层减压回收干燥得龙胆碱粗品１；龙胆碱粗品１以酸性水溶液溶解，过滤得溶液，此溶液经树脂柱富集，再经层析柱层析，得龙胆碱得龙胆碱精制产品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘树民，刘学伟，
申请(专利权)人：刘树民，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]