一种筛选抑制Stx2噬菌体激活的化合物的方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及一种筛选抑制Stx2噬菌体激活的化合物的方法。包括：将双荧光素酶报告质粒转入微生物中，在培养的过程中加入待测样品；检测荧光信号，并根据结果判断所述待测样品抑制Stx2噬菌体激活的能力；所述双荧光素酶报告质粒包括recA基因的启动子。本发明专利技术将recA基因的启动子整合至双荧光素酶报告质粒中，导入微生物中得到一种双荧光素酶报告系统，该报告系统的荧光信号变化和Stx2噬菌体产量有着一致的变化趋势，可以准确指示化合物对于Stx2噬菌体激活的抑制能力。指示化合物对于Stx2噬菌体激活的抑制能力。指示化合物对于Stx2噬菌体激活的抑制能力。

【技术实现步骤摘要】
一种筛选抑制Stx2噬菌体激活的化合物的方法


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种筛选抑制Stx2噬菌体激活的化合物的方法。

技术介绍

[0002]随着畜禽养殖业的快速、规模化发展，病原菌感染给养殖业发展造成的经济损失也日益上升。大肠杆菌是造成仔猪腹泻和死亡的重要病原菌之一，其致病能力与其毒力因子密切相关，如志贺毒素等。目前抗生素是常用于解决问题的手段之一，但是养猪生产中大量使用抗生素促进了细菌耐药性的增强以及毒力因子的传播，严重威胁仔猪肠道健康。
[0003]近年来，开发利用抗生素替代品成为行业研究的热点、焦点和难点。噬菌体是一种能够侵染细菌的微生物，对畜禽感染的致病菌具有杀灭作用，具有靶向性强、安全性高、无药残、杀菌更彻底和绿色环保的特点，可作为有效的抗生素替代品之一。但是噬菌体作为抗生素替代品的研究仍处于研究阶段，部分噬菌体本身可能会生产不利于动物养殖的毒素。
[0004]产志贺毒素大肠杆菌的致病性主要与其产生的2型志贺毒素(Stx2)有关。编码Stx2的基因位于大肠杆菌Stx2原噬菌体基因组中。Stx2原本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种筛选抑制Stx2噬菌体激活的化合物的方法，其特征在于，包括：将双荧光素酶报告质粒转入微生物中，在培养的过程中加入待测样品；检测荧光信号，并根据结果判断所述待测样品抑制Stx2噬菌体激活的能力；所述双荧光素酶报告质粒包括recA基因的启动子。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述recA基因包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述recA基因的启动子包括如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述双荧光素酶报告质粒通过如下方法制备得到：将所述recA基因的启动子构建至pMCS
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Fluc
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SV40
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hRluc
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Neo质粒第5095bp的位置。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微生...

【专利技术属性】
技术研发人员：王军军，胡杰，武祎凡，韩丹丹，康露渊，刘一思，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：