一株可可豆醋杆菌及其在生产高品质苹果醋中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一株可可豆醋杆菌及其在生产高品质苹果醋中的应用。本发明专利技术首先自腐烂苹果中分离筛选到具有高产醋酸特性的可可豆醋杆菌(Acetobacter fabarum)PTC

【技术实现步骤摘要】
一株可可豆醋杆菌及其在生产高品质苹果醋中的应用


[0001]本专利技术涉及一株可可豆醋杆菌及其在生产高品质苹果醋中的应用，属于微生物


技术介绍

[0002]目前，市场常见苹果醋饮料种类繁多，但多数为非发酵苹果醋。苹果醋酿造过程中，醋酸发酵是关键技术环节，往往受发酵菌株、工艺等的影响。发酵菌株稳定性差、效率低，以及可选择的优良发酵菌株较少，是制约生产高品质苹果醋的关键因素。
[0003]现有的发酵型苹果醋一般采用酿酒酵母先将苹果汁发酵成苹果酒，再经过醋酸菌发酵将苹果酒转化成苹果醋。采用这种单菌种发酵法生产的苹果原醋，成分较为单一，酸味刺激性较突出，涩味明显，口感不爽。CN112048423A公开了一种新型巴氏醋酸菌和嗜酸乳杆菌混合发酵生产高品质苹果醋的方法，在苹果汁发酵前先加入嗜酸乳杆菌CTCT
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RS
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LGP
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0046，然后再加入酿酒酵母共同发酵成苹果酒；再接入巴氏醋酸菌CTCT
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CS
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LGP
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0003经过醋酸发酵将苹果酒转化成苹果醋。上述专利所获得的苹果原醋非挥发性有机酸含量更高，口感更加柔和绵润，但是仍然存在苹果醋优良发酵菌株较少以及发酵风味单一的问题。
[0004]基于此，本专利技术从腐烂苹果中分离筛选到具有高产醋酸特性的可可豆醋杆菌，该菌株能够高效发酵苹果原酒和浓缩苹果汁生产高品质苹果醋，可作为高品质苹果醋发酵的功能菌株，可可豆醋杆菌发酵生产苹果醋目前未见报道。/>
技术实现思路

[0005]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一株可可豆醋杆菌及其应用，该菌株为可可豆醋杆菌(Acetobacter fabarum)PTC
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02，该菌株能够高效发酵苹果原酒和浓缩苹果汁生产高品质苹果醋，可作为高品质苹果醋发酵的功能菌株，而且发酵方法简单、菌株适应性强、发酵速度快、发酵风味独特且工艺可操作性强，适合工厂大规模生产苹果醋。
[0006]本专利技术的上述目的是通过以下技术方案实现的：一株自腐烂苹果分离筛选到的具有高产醋酸特性的可可豆醋杆菌(Acetobacter fabarum)PTC
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02，该菌株已于2023年01月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.26464。该菌株在含溴甲酚紫显色平板上培养，明显使平板变色；培养72h后，形态为圆形，表面湿润光滑，粘稠，呈乳白色，中间微凸。该菌株具有高产醋酸的特性。
[0007]本专利技术的第二个目的是提供了可可豆醋杆菌(Acetobacter fabarum)PTC
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02在生产高品质苹果醋中的应用。
[0008]本专利技术第三个目的是提供一种高品质苹果醋的制备方法，具体包括以下步骤；
[0009]原料配比：按重量份，苹果原酒50～60份、浓缩苹果汁13～17份，水补足100份；
[0010](1)将苹果原酒、浓缩苹果汁和水充分混合后杀菌，得到无菌液；
[0011](2)将可可豆醋杆菌PTC
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02苹果醋发酵菌剂按照体积比0.05～0.15％接种于步骤(1)的无菌液，在25～30℃条件下发酵4～6d，得苹果醋发酵液；
[0012](3)发酵液离心，过滤，灭菌，包装，即可得高品质苹果醋。
[0013]上述可可豆醋杆菌PTC
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02苹果醋发酵菌剂的制备方法为：可可豆醋杆菌PTC
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02在种子液培养基中，25～30℃下恒温振荡培养18～30h，得到种子液；然后按体积比0.1～0.4％接入装有发酵培养基的发酵罐中25～30℃下发酵培养24～28h，得到活菌数大于100亿/mL的PTC
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02液体制剂，然后离心，取菌泥加入保护剂真空冷冻干燥，获得可可豆醋杆菌PTC
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02苹果醋发酵菌剂。
[0014]上述种子液培养基配方(质量比)：酵母膏1％，葡萄糖1％，其余为水，调整pH5.5。
[0015]上述发酵培养基配方(质量比)：可溶性淀粉2～2.5％，蛋白胨3～3.5％，硫酸镁0.1～0.2％，氯化钠0.5～0.7％，其余为水，调整pH6.0
±
0.1。
[0016]进一步的，原料配比：按重量份，苹果原酒55份、浓缩苹果汁15份，水30份。
[0017]本专利技术的技术效果是：
[0018]1.本专利技术提供了一株具有高产醋酸特性的发酵菌株可可豆醋杆菌(Acetobacter fabarum)PTC
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02，该菌株能够高效发酵苹果原酒和浓缩苹果汁生产高品质苹果醋，可作为高品质苹果醋发酵的功能菌株。
[0019]2.该菌株发酵方法简单、菌种适应性强、发酵速度快、发酵风味独特且工艺可操作性强，适合工厂大规模发酵生产苹果醋。
附图说明
[0020]图1为可可豆醋杆菌(Acetobacter fabarum)PTC
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02菌落形态。
具体实施方式
[0021]为能清楚说明本专利技术方案的技术特点，下面结合具体实施例，对本专利技术进行阐述。但是本专利技术的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本专利技术构思的改变或等同替代均包括在本专利技术的保护范围之内。
[0022]实施例1：可可豆醋杆菌(Acetobacter fabarum)PTC
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02初步分离与纯化
[0023](1)分离源：本专利技术所涉及的可可豆醋杆菌PTC
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02分离自山东上善若水科技创新发展有限公司苹果种植基地所采集的腐烂苹果；
[0024](2)分离时间及地点：2022年10月19日在山东上善若水科技创新发展有限公司实验室分离得到；
[0025](3)分离与纯化方法：采用稀释涂布法分离获得的，具体方法如下：
[0026]①
醋酸菌的富集培养：将腐烂的苹果捣碎，取10g放入装有90mL增殖培养基的250mL三角瓶中，28～30℃、120～140r/min条件下培养3～5d，即得富集培养液。
②
钙平板分离：取增殖培养液1mL，以无菌生理盐水做梯度稀释，选取合适的稀释度(10
‑4、10
‑5、10
‑6)于分离培养基上涂布，在28℃的恒温箱中培养3d左右，观察挑取钙溶解圈大的，菌落形状规则的单个纯菌落编号并移入斜面保藏试管。依照上述方法，分离到具有溶钙作用菌株6株，编号为PTC
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01～PTC
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06。
[0027]增殖培养基(质量比)：酵母膏1％，葡萄糖1％，浓度为0.02％的结晶紫0.5％，pH5.5，0.1MPa灭菌15～20min，冷却至70℃后加入3％的无水乙醇。
[0028]分离培养基(质量比)：酵母膏1％，葡萄糖1％，CaCO
3 2％，琼脂2％，pH5.5，0.1MPa
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株具有高产醋酸特性的可可豆醋杆菌(Acetobacter fabarum)PTC
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02，所述菌株的保藏编号为CGMCC No.26464。2.权利要求1所述的可可豆醋杆菌PTC
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02在生产高品质苹果醋中的应用。3.一种以权利要求1所述的可可豆醋杆菌PTC
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02为活性成分的苹果醋发酵菌剂。4.权利要求3所述的苹果醋发酵菌剂的制备方法，其特征是，可可豆醋杆菌PTC
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02在种子液培养基中，25～30℃下恒温振荡培养18～30h，得到种子液；然后按体积比0.1～0.4％接入装有发酵培养基的发酵罐中25～30℃下发酵培养24～28h，得到活菌数大于100亿/mL的PTC
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02液体制剂，然后离心，取菌泥加入保护剂真空冷冻干燥，获得苹果醋发酵菌剂。5.如权利要求4所述的苹果醋发酵菌剂的制备方法，其特征是，所述种子液培养基配方，按质量比为：酵母膏1％，葡萄糖1％，其余为水，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晨玮，赵林，慕宝强，牛赡光，张淑静，
申请(专利权)人：山东上善若水科技创新发展有限公司，
类型：发明
国别省市：