一株源自酸马奶的益生副干酪乳酪杆菌PC646及其人工智能筛选方法技术

本发明专利技术提供一株副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)PC646，其保藏编号为CGMCC No.23515。本发明专利技术还涉及所述副干酪乳酪杆菌PC646在食品添加剂中的应用，特别地，所述食品添加剂是乳品发酵剂。本发明专利技术还提供一种益生菌快速筛选方法，可实现益生菌的快速初步筛选。本发明专利技术的副干酪乳酪杆菌PC646通过胃肠液耐受性和胆盐耐受性测试确认该菌株具有良好的益生菌特性，能够抵御消化道环境的抑制并在肠道内定植。本发明专利技术的副干酪乳酪杆菌PC646经过感官评鉴确认具有优秀的风味和口感，可应用于商业化发酵乳制品中。可应用于商业化发酵乳制品中。

【技术实现步骤摘要】
一株源自酸马奶的益生副干酪乳酪杆菌PC646及其人工智能筛选方法


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及一株分离自酸马奶的具有益生特性的副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)PC646，还涉及其在益生菌发酵乳制品中的应用，以及分离该益生菌时使用的筛选方法。

技术介绍

[0002]酸马奶是我国北方少数民族地区的一种传统乳制品，以新鲜马奶为原料、利用天然发酵剂和传统发酵技术发酵而成，其醇香浓郁，营养价值很高，具有驱寒、活血、舒筋、消食、健胃等功能。
[0003]乳酸菌(Lactic acidbacteria，LAB)是一类革兰氏阳性、能发酵糖类产生乳酸的有益微生物的总称。乳酸菌是人类胃肠道共生微生物菌群的主要部分，是公认的食品安全级(General RegardAs Safety，GRAS)微生物，具有增强免疫反应、平衡肠道菌群、降低血清胆固醇等生理功效，经常作为益生菌单独或混合用于食品发酵。其中，益生菌以乳杆菌属和双歧杆菌属最为常见，而乳杆菌属中最常见的有嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus casei)、鼠李糖乳酪杆菌(Lacticaseibacillus rhamnosus)和副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)等。
[0004]副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)常被作为发酵剂及辅助发酵剂用于乳制品的生产制作，属于兼性厌氧型革兰氏阳性菌，它具有多种益生特性，还具有良好的碳源代谢能力及环境胁迫的耐受能力，因此被广泛应用于医疗、食品及发酵工业等领域。
[0005]然而，现有的副干酪乳酪杆菌普遍存在胃肠液耐受性较差或胆盐耐受性较差的特点。例如天原等人在《副干酪乳酪杆菌L1的安全性和益生性评价机器在杂交鸡上的应用》中公开了一株副干酪乳酪杆菌L1，该菌株在0.3g/100mL浓度胆盐下的细菌存活数在0
‑
4h内表现为缓慢下降，表明该菌株活性同样在一定程度上受胆盐抑制；又例如曾维友等人在《泡菜中乳酸菌的分离鉴定及抗性筛选》中公开了一株具有良好的人工胃液耐受性和胆盐耐受性的植物乳杆菌，但没有公开其在模拟肠液中的耐受性，也没有验证该菌株是否适用于制备发酵乳。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是通过筛选以期获得一株新的副干酪乳酪杆菌，该如干酪乳杆菌需具备良好的胃肠液耐受性和优秀的胆盐耐受性，并验证该菌株能够适用于制备发酵乳制品，能产生良好的风味而可用于制备发酵剂。
[0007]基于此，本专利技术提供一株分离自酸马奶的副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)PC646，所述副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)PC646于2021年9月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为
CGMCC No.23515。
[0008]本专利技术还涉及所述副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)PC646在食品添加剂中的应用。
[0009]在本专利技术中，所述食品添加剂是乳品发酵剂。
[0010]进一步地，所述发酵酸奶或发酵豆乳。
[0011]本专利技术还提供一种益生菌快速筛选方法，所述方法包括对确认为乳杆菌属的菌株进行测序以获得其基因组序列，在人工智能筛选平台iProbiotics进行预测，以所得基因组序列作为输出序列，根据所述平台输出的分数进行判断，当输出分数高于0.5时，判断该菌株为潜在的益生菌。
[0012]本专利技术提供一株分离自中国内蒙古锡林浩特市西乌旗地区的酸马奶样品的副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)PC646，通过胃肠液耐受性和胆盐耐受性测试确认该菌株具有良好的益生菌特性，特别是在胆盐浓度0.3％环境下培养，OD
620nm
值增加0.3个单位所需的时间与在不含胆盐的培养基中培养的时间差为0小时，表明0.3％胆盐不会抑制该菌株的活性。因此，该菌株能够抵御消化道环境的抑制并在肠道内定植。
[0013]另一方面，本专利技术的副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)PC646经过感官评鉴确认具有优秀的风味和口感，且制备成褐色乳饮料后，所得产品在4℃条件下保存21天，每间隔7天测定其酸度和益生菌活菌数，确认其性质变化较小，在贮藏期间始终保持高活菌数，证明本专利技术的PC646具有良好的益生特性，可应用于商业化发酵乳制品中。
[0014]本专利技术涉及以下微生物：
[0015]副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)PC646，2021年9月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏号为CGMCC No.23515。
【附图说明】
[0016]图1：副干酪乳酪杆菌PC646电镜图(3000倍)；
[0017]图2：副干酪乳酪杆菌PC646在培养基上的菌落形态；
[0018]图3：副干酪乳酪杆菌PC646在模拟人工消化道中的存活率变化情况。
【具体实施方式】
[0019]下面将结合实施例对本专利技术作进一步说明，以下实施例仅为说明性的，本专利技术并不受这些实例的限制。
[0020]在本专利技术中，如无特殊说明，用于解释浓度的“％”均为重量百分比。
[0021]本专利技术涉及以下培养基：
[0022]MRS液体培养基：蛋白胨(动物源)10g、牛肉浸粉8g、酵母浸粉4g、葡萄糖20g、Tween
‑
801ml、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸三胺2g、硫酸锰0.05g、硫酸镁0.2g，蒸馏水1L，调节pH至6.5
±
0.2，121℃，15min灭菌。
[0023]MRS固体培养基：蛋白胨(动物源)10g、牛肉浸粉8g、酵母浸粉4g、葡萄糖20g、Tween
‑
801ml、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸三胺2g、硫酸锰0.05g、硫酸镁0.2g，蒸馏水1L，调节pH至6.5
±
0.2，琼脂15g，121℃、15min灭菌。
[0024]实施例1副干酪乳酪杆菌PC646的获取
[0025]将从内蒙古锡林浩特市西乌旗地区的酸马奶样品中采集到的样品倍比稀释，得到10
‑5、10
‑6、10
‑7稀释梯度，吸取各梯度酸粥样品200μL均匀涂布于MRS固体培养基平皿内，在37℃厌氧条件下培养48
‑
72h。挑取形态、大小、颜色不同的单克隆接种于MRS液体培养基中，于37℃恒温培养箱培养24h。待菌株生长良好后，进行革兰氏染色、镜检，保存分离株。
[0026]本专利技术筛选得到的副干酪乳酪杆菌(Lacticaseiba本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)PC646，所述副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)PC646于2021年9月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC No.23515。2.权利要求1的副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)PC646在食品添加剂中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述食品添加剂是...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文羿，王记成，姚国强，
申请(专利权)人：内蒙古农业大学，
类型：发明
国别省市：