一种发酵法生产L-高丝氨酸的分离提取方法技术

本发明专利技术公开了一种发酵法生产L

【技术实现步骤摘要】
一种发酵法生产L
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高丝氨酸的分离提取方法


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，特别是一种发酵法生产L
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高丝氨酸的分离提取方法。

技术介绍

[0002]L
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高丝氨酸是一种非蛋白质氨基酸，是生物合成L
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蛋氨酸代谢途径中的重要前体，同时也是合成多种C4化合物(异丁醇、γ
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丁内酯、1,4
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丁二醇、2,4
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二羟基丁酸)和L
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草铵膦等的重要平台化合物。发酵液中L
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高丝氨酸的分离纯化是发酵液生产L
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高丝氨酸过程中的重要环节。
[0003]在已报道的L
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高丝氨酸及其衍生物的合成技术路线中，化学法因反应过程中所使用的试剂价格昂贵，反应时间长或者提纯步骤繁琐等因素限制了其应用范围。典型的化学合成法，如蛋氨酸法首先将L
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蛋氨酸与碘甲烷反应形成鎓盐，然后通过加水溶解回流，在碱性条件下得到L
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高丝氨酸，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种发酵法生产L
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高丝氨酸的分离提取方法，其特征在于所述方法为：(1)发酵液的预处理：含有L
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高丝氨酸的大肠杆菌发酵液离心，所得上清液超滤，所得含L
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高丝氨酸的滤液调节pH至1.5
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3.0，得预处理液；(2)离子交换法：将步骤(1)获得的预处理液采用经预处理的强酸型阳离子交换树脂进行柱层析，用去离子水或纯化水洗去杂质后，以0.5
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5.0mol/L氨水为洗脱剂进行洗脱，收集含L
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高丝氨酸的洗脱液；(3)脱色：将步骤(2)获得的含L
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高丝氨酸的洗脱液用活性炭粉末在30℃
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60℃下进行脱色0.5h到2h，过滤，所得滤液即为含L
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高丝氨酸的脱色液；所述含L
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高丝氨酸的洗脱液以所述活性炭粉末的质量计为50
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200mL/g；(4)结晶：将步骤(3)获得的含L
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高丝氨酸的脱色液浓缩至原体积的5
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10％，向所得浓缩液中加入甲醇，在0℃
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20℃下搅拌结晶，取上清液旋蒸除去甲醇，干燥，得到L
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高丝氨酸；所述甲醇与所述浓缩液的体积比为5
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15：1。2.如权利要求1所述的发酵法生产L
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高丝氨酸的分离提取方法，其特征在于：步骤(1)中所述含有L
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高丝氨酸的大肠杆菌发酵液中L
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高丝氨酸含量为40.0
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160.0g/L。3.如权利要求1所述的发酵法生产L
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高丝氨酸的分离提取方法，其特征在于：步骤(1)中所述含有L
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高丝氨酸的大肠杆菌发酵液是由大肠杆菌W3110ΔmetIΔmetJΔmetBΔthrBΔmetAΔtdcC
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metL
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thrA
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rhtA(trc)发酵获得，所述大肠杆菌W3110ΔmetIΔmetJΔmetBΔthrBΔmetAΔtdcC
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metL
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thrA
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rhtA(trc)按如下方法构建：依次敲除大肠杆菌W3110中编码L
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蛋氨酸运输蛋白的metI基因、编码负调控阻遏因子的metJ基因、编码胱硫醚γ合成酶的metB基因、编码高丝氨酸激酶的thrB基因、编码高丝氨酸
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O
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琥珀酰基转移酶的metA基因和编码L
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高丝氨酸内运蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳志强，张炜，熊能，郑裕国，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：