OsEF1A蛋白、编码基因及其在促进水稻分蘖中的应用制造技术

技术编号:38995052 阅读:15 留言:0更新日期:2023-10-07 10:26
本发明专利技术公开了OsEF1A蛋白、编码基因及其在促进水稻分蘖中的应用,属于基因工程技术领域。所述OsEF1A蛋白能够显著提高日本晴水稻植株的分蘖数,进而提高稻谷产量,为高产水稻新品种的育种提供新途径,提供了一种新的基因资源和重组质粒制备方法,有利于水稻的增产增收具有重要意义。具有重要意义。具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
OsEF1A蛋白、编码基因及其在促进水稻分蘖中的应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
,特别是涉及OsEF1A蛋白、编码基因及其在促进水稻分蘖中的应用。

技术介绍

[0002]稻(Oryza sativa L.),通称水稻,是禾本科一年生水生草本(已有多年生稻品种)。秆直立,高0.5

1.5米,随品种而异。叶鞘无毛、松弛;叶舌披针形;叶片线状披针形,宽约1厘米,无毛,粗糙。圆锥花序大型疏展,棱粗糙;小穗含1成熟花;颖极小,仅在小穗柄先端留下半月形的痕迹,锥刺状;两侧孕性花外稃质厚,具5脉,中脉成脊,表面有方格状小乳状突起,厚纸质,遍布细毛端毛较密,有芒或无芒;内稃与外稃同质,具3脉,先端尖而无喙;雄蕊花药长2

3毫米。颖果长约5毫米,宽约2毫米;胚比约为颖果长的1/4。
[0003]分蘖数是水稻最重要的农艺性状之一,因为分蘖数直接决定每株穗数,进而影响水稻产量。水稻分蘖的发生可以分为两步:腋芽的形成和腋芽的伸长。目前,已克隆的控制腋芽形成的基因有MOC1、MOC3/TAB1、TAD1/TE、LAX1、LAX2等。MOC1是第一个被克隆的控制水稻分蘖的基因,编码一个GRAS家族转录因子,通过控制腋芽形成影响分蘖。MOC1突变体只有一个主茎而不产生分蘖。独脚金内酯(Strigolactones,SLs)是一类新型的植物激素,参与调控植物分枝和根发育、与共生丛枝菌根真菌和寄生杂草互作等过程。SLs信号抑制水稻分蘖芽的伸长。催化SLs合成(如D27、D17、D10和OsMAX1)和信号转导(如D3、D14、D53、IPA1)的相关基因参与水稻分蘖的调控。其中,IPA1是一个半显性基因,编码OsSPL14转录因子,其表达受到microRNA OsmiR156的调控。该基因点突变阻碍了OsmiR156的作用,产生了分蘖数减少、抗倒伏性增强、产量增加的“理想株型”。近期研究表明,IPA1能够与D53互作,从而作为SL信号途径的下游转录因子发挥作用。尽管目前有多个控制水稻分蘖的基因被克隆,其调控机理基本阐明,但水稻分蘖调控网络中新的基因仍有待鉴定。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供OsEF1A蛋白、编码基因及其在促进水稻分蘖中的应用。
[0005]为实现上述目的,本专利技术提供了如下方案:
[0006]本专利技术提供一种OsEF1A蛋白,所述OsEF1A蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
[0007]本专利技术还提供编码所述OsEF1A蛋白的DNA分子。
[0008]优选的是,所述DNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
[0009]本专利技术还提供含有所述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
[0010]优选的是,所述重组载体包括pCAMBIA1300S
‑2×
35S::OsEF1A。
[0011]本专利技术还提供扩增所述DNA分子的引物对。
[0012]优选的是,所述引物对包含如SEQ ID NO:3所示的上游引物和如SEQ ID NO:4所示的下游引物。
[0013]本专利技术还提供所述OsEF1A蛋白、所述DNA分子或所述重组载体、表达盒、转基因细
胞系或重组菌在促进水稻分蘖中的应用。
[0014]本专利技术还提供一种培养多分蘖水稻的方法,其特征在于,将所述DNA分子导入受体水稻,即得。
[0015]优选的是,所述DNA分子通过所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌导入目的植物。
[0016]本专利技术公开了以下技术效果:
[0017]本专利技术提供了OsEF1A蛋白、编码基因及其在促进水稻分蘖中的应用,所述OsEF1A蛋白能够显著提高日本晴水稻植株的分蘖数,进而提高稻谷产量,为高产水稻新品种的育种提供新途径,提供了一种新的基因资源和重组质粒制备方法,有利于水稻的增产增收具有重要意义。
附图说明
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0019]图1为阳性转基因植株PCR鉴定;其中,M:DNA质量标准物;CK:阴性对照;
[0020]图2为水稻OsEF1A的组织表达,PBI121 OsEF1Apro::GUS阳性植株的根、茎、根茎结合部、小穗花序的GUS染色;
[0021]图3为OsEF1A亚细胞定位;
[0022]图4为转基因植株的表型图;
[0023]图5为通过荧光定量检测OsEF1A基因的表达量不同。
具体实施方式
[0024]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式,该详细说明不应认为是对本专利技术的限制,而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0025]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式,并非用于限制本专利技术。另外,对于本专利技术中的数值范围,应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0026]除非另有说明,否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料,但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入,用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时,以本说明书的内容为准。
[0027]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下,可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化,这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
[0028]关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等,均为开放性的用语,即意指包含但不限于。
[0029]本专利技术所述技术方案,如未特别说明,均为本领域的常规方案,所用试剂或原料,如未特别说明,均购自商业渠道或是已公开。
[0030]实施例1
[0031]1.水稻RNA提取
[0032](1)取日本晴水稻叶片在液氮中研磨,加入450μL RL(加入1%β

巯基乙醇),涡旋剧烈震荡混匀。
[0033](2)将所有溶液转移至过滤柱CS上,12000rpm离心3min,小心吸取上清至RNase

Free的离心管中。
[0034](3)缓慢加入0.5倍上清体积的无水乙醇,混匀,将所有溶液转移至吸附柱CR3中,12000rpm离心60sec,倒掉收集管中的废液。<本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种OsEF1A蛋白,其特征在于,所述OsEF1A蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。2.编码权利要求1所述OsEF1A蛋白的DNA分子。3.根据权利要求2所述的DNA分子,其特征在于,所述DNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。4.含有权利要求2

3任一项所述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。5.扩增权利要求2

3任一项所述DNA分子的引物对。6.根据权利要求5所述的引物对,其特征在于,所述引物对包含如SEQ ID NO:3所示的上...

【专利技术属性】
技术研发人员:查笑君顾庆康君方高爽赵亚蕊易欢林钰绮
申请(专利权)人:浙江师范大学
类型:发明
国别省市:

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