靶向胞质蛋白的工程化去泛素化酶及其使用方法技术

本文提供了一种融合蛋白，其包含：包含去泛素化酶的催化结构域或其功能片段或功能变体的效应结构域；和包含特异性结合胞质蛋白的部分的靶向结构域。本文还提供了使用融合蛋白治疗疾病包括遗传病的方法。治疗疾病包括遗传病的方法。治疗疾病包括遗传病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】靶向胞质蛋白的工程化去泛素化酶及其使用方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据35U.S.C.
§
119(e)要求2020年11月6日提交的美国临时专利申请号63/110,622的权益，其全部公开内容通过引用并入本文。
[0003]1.领域
[0004]本公开内容涉及一种融合蛋白，其包含效应结构域，所述效应结构域包含去泛素化酶的催化结构域或其功能片段或功能变体；和靶向结构域，其包含特异性结合靶胞质蛋白的部分。本公开内容进一步涉及使用其的治疗方法。
[0005]2.背景
[0006]一部分遗传病与功能性胞质蛋白的表达水平的降低或胞质蛋白的稳定性的降低相关。例如，单倍剂量不足遗传病是由与功能丧失变异等位基因的杂合组合的单拷贝的野生型等位基因的存在引起的，其中表达的功能蛋白的水平不足以产生标准表型。单倍剂量不足可能由变异等位基因中的从头或遗传性功能丧失突变引起，使得它产生很少或不产生功能性蛋白质。尽管基因治疗最近取得了进展，但这些疾病仍然没有治愈性治疗，并且治疗通常集中在症状的管理上。因此，需要新的治疗来治疗与降低的功能性胞质蛋白表达或稳定性相关的疾病，例如遗传病。
[0007]3.概述
[0008]本文尤其提供了工程化的去泛素化酶(enDub)，其包含特异性结合胞质靶蛋白的靶向部分和去泛素化酶的催化结构域。靶向部分将该去泛素化酶催化结构域引导至特定靶胞质蛋白以用于去泛素化。本文所述的融合蛋白特别可用于治疗遗传病(特别是与特定胞质蛋白的降低的表达或稳定性相关或由其引起的那些疾病)的方法。
[0009]在一个方面，本文提供了融合蛋白，其包含：包含去泛素化酶的催化结构域或其功能片段或功能变体的效应结构域；和包含特异性结合胞质蛋白的靶向部分的靶向结构域。
[0010]在一些实施方案中，去泛素化酶是半胱氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。
[0011]在一些实施方案中，去泛素化酶是半胱氨酸蛋白酶。在一些实施方案中，半胱氨酸蛋白酶是泛素特异性蛋白酶(USP)、泛素C末端水解酶(UCH)、Machado
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Josephin结构域蛋白酶(MJD)、卵巢肿瘤蛋白酶(OTU)、MINDY蛋白酶或ZUFSP蛋白酶。在一些实施方案中，半胱氨酸蛋白酶是USP。在一些实施方案中，USP是USP1、USP2、USP3、USP4、USP5、USP6、USP7、USP8、USP9X、USP9Y、USP10、USP11、USP12、USP13、USP14、USP15、USP16、USP17、USP17L2、USP17L3、USP17L4、USP17L5、USP17L7、USP17L8、USP18、USP19、USP20、USP21、USP22、USP23、USP24、USP25、USP26、USP27X、USP28、USP29、USP30、USP31、USP32、USP33、USP34、USP35、USP36、USP37、USP38、USP39、USP40、USP41、USP42、USP43、USP44、USP45或USP46。
[0012]在一些实施方案中，半胱氨酸蛋白酶是UCH。在一些实施方案中，UCH是BAP1、UCHL1、UCHL3或UCHL5。
[0013]在一些实施方案中，半胱氨酸蛋白酶是MJD。在一些实施方案中，MJD是ATXN3或ATXN3L。
[0014]在一些实施方案中，半胱氨酸蛋白酶是OTU。在一些实施方案中，OTU是OTUB1或
OTUB2。
[0015]在一些实施方案中，半胱氨酸蛋白酶是MINDY。在一些实施方案中，MINDY是MINDY1、MINDY2、MINDY3或MINDY4。
[0016]在一些实施方案中，半胱氨酸蛋白酶是ZUFSP。在一些实施方案中，ZUFSP是ZUP1。
[0017]在一些实施方案中，去泛素化酶是金属蛋白酶。在一些实施方案中，金属蛋白酶是Jab1/Mov34/Mpr1 Pad1 N
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末端+(MPN+)(JAMM)结构域蛋白酶。
[0018]在一些实施方案中，去泛素化酶包含与SEQ ID NO：1
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112中任一个的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。
[0019]在一些实施方案中，催化结构域包含衍生自去泛素化酶的催化结构域，所述去泛素化酶包含与SEQ ID NO：1
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112中任一个的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。
[0020]在一些实施方案中，催化结构域包含与SEQ ID NO：113
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220或286中任一个的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。
[0021]在一些实施方案中，催化结构域包含与SEQ ID NO：286的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。
[0022]在一些实施方案中，催化结构域包含氨基酸序列，其是SEQ ID NO：1
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112中任一个的氨基酸序列的功能片段。
[0023]在一些实施方案中，催化结构域包含氨基酸序列，其是SEQ ID NO：113
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220或286中任一个的氨基酸序列的功能片段。
[0024]在一些实施方案中，特异性结合胞质蛋白的部分包含抗体或其功能片段或功能变体。在一些实施方案中，抗体或其功能片段或功能变体包括全长抗体、单链可变片段(scFv)、scFv2、scFv
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Fc、Fab、Fab'、F(ab')2、F(v)、VHH或(VHH)2。在一些实施方案中，抗体或其功能片段或功能变体包括VHH或(VHH)2。
[0025]在一些实施方案中，胞质蛋白是细胞周期蛋白依赖性激酶样5(CDKL5)、铜转运ATP酶2(ATP7B)、突触融合蛋白结合蛋白1(STXBP1)、Ras/Rap GTP酶激活蛋白(SYNGAP1)、颗粒蛋白前体(GRN)、锯齿状蛋白1(JAG1)、GATOR复合蛋白DEPDC5(DEPDC5)、结节蛋白(TSC2)、错构瘤蛋白(TSC1)、驱动蛋白样蛋白KIF1A(KIF1A)、发动蛋白
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1(DNM1)、SH3和多个锚蛋白重复结构域蛋白3(SHANK3)、抗肌萎缩蛋白(DMD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种融合蛋白，其包含：a.包含去泛素化酶的催化结构域或其功能片段或功能变体的效应结构域；和b.包含特异性结合胞质蛋白的靶向部分的靶向结构域。2.权利要求1的融合蛋白，其中所述去泛素化酶是半胱氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。3.权利要求2的融合蛋白，其中所述去泛素化酶是半胱氨酸蛋白酶。4.权利要求3的融合蛋白，其中所述半胱氨酸蛋白酶是泛素特异性蛋白酶(USP)、泛素C末端水解酶(UCH)、Machado
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Josephin结构域蛋白酶(MJD)、卵巢肿瘤蛋白酶(OTU)、MINDY蛋白酶或ZUFSP蛋白酶。5.权利要求4的融合蛋白，其中所述半胱氨酸蛋白酶是USP。6.权利要求5的融合蛋白，其中所述USP是USP1、USP2、USP3、USP4、USP5、USP6、USP7、USP8、USP9X、USP9Y、USP10、USP11、USP12、USP13、USP14、USP15、USP16、USP17、USP17L2、USP17L3、USP17L4、USP17L5、USP17L7、USP17L8、USP18、USP19、USP20、USP21、USP22、USP23、USP24、USP25、USP26、USP27X、USP28、USP29、USP30、USP31、USP32、USP33、USP34、USP35、USP36、USP37、USP38、USP39、USP40、USP41、USP42、USP43、USP44、USP45或USP46。7.权利要求4的融合蛋白，其中所述半胱氨酸蛋白酶是UCH。8.权利要求7的融合蛋白，其中所述UCH是BAP1、UCHL1、UCHL3或UCHL5。9.权利要求4的融合蛋白，其中所述半胱氨酸蛋白酶是MJD。10.权利要求9的融合蛋白，其中所述MJD是ATXN3或ATXN3L。11.权利要求4的融合蛋白，其中所述半胱氨酸蛋白酶是OTU。12.权利要求11的融合蛋白，其中所述OTU是OTUB1或OTUB2。13.权利要求4的融合蛋白，其中所述半胱氨酸蛋白酶是MINDY。14.权利要求13的融合蛋白，其中所述MINDY是MINDY1、MINDY2、MINDY3或MINDY4。15.权利要求4的融合蛋白，其中所述半胱氨酸蛋白酶是ZUFSP。16.权利要求15的融合蛋白，其中所述ZUFSP是ZUP1。17.权利要求2的融合蛋白，其中所述去泛素化酶是金属蛋白酶。18.权利要求17的融合蛋白，其中所述金属蛋白酶是Jab1/Mov34/Mpr1Pad1 N
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末端+(MPN+)(JAMM)结构域蛋白酶。19.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述去泛素化酶包含与SEQ ID NO：1
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112中任一个的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。20.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述催化结构域包含衍生自去泛素化酶的催化结构域，所述去泛素化酶包含与SEQ ID NO：1
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112中任一个的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。21.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述催化结构域包含与SEQ ID NO：113
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220或286中任一个的氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。22.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述催化结构域包含与SEQ ID NO：286的
氨基酸序列至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。23.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述催化结构域包含氨基酸序列，其是SEQ ID NO：1
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112中任一个的氨基酸序列的功能片段。24.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述催化结构域包含氨基酸序列，其是SEQ ID NO：113
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220或286中任一个的氨基酸序列的功能片段。25.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中特异性结合胞质蛋白的所述部分包含抗体或其功能片段或功能变体。26.权利要求25的融合蛋白，其中所述抗体或其功能片段或功能变体包括全长抗体、单链可变片段(scFv)、scFv2、scFv
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Fc、Fab、Fab'、F(ab')2、F(v)、VHH或(VHH)2。27.权利要求26的融合蛋白，其中所述抗体或其功能片段或功能变体包括VHH或(VHH)2。28.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述胞质蛋白是细胞周期蛋白依赖性激酶样5(CDKL5)、铜转运ATP酶2(ATP7B)、突触融合蛋白结合蛋白1(STXBP1)、Ras/Rap GTP酶激活蛋白(SYNGAP1)、颗粒蛋白前体(GRN)、锯齿状蛋白1(JAG1)、GATOR复合蛋白DEPDC5(DEPDC5)、结节蛋白(TSC2)、错构瘤蛋白(TSC1)、驱动蛋白样蛋白KIF1A(KIF1A)、发动蛋白
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1(DNM1)、SH3和多个锚蛋白重复结构域蛋白3(SHANK3)、抗肌萎缩蛋白(DMD)、氧调节蛋白1(RP1)、肌连蛋白(TTN)、细胞质动力蛋白1重链1(DYNC1H1)、TRIO和F
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肌动蛋白结合蛋白(TRIO)、可能的泛素羧基末端水解酶FAF
‑
X(USP9X)、胱抑素B(CSTB)或蝶呤
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α
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甲醇胺脱水酶(PCBD1)。29.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述胞质蛋白包含与SEQ ID NO：221
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328或287
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289中的任一个至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。30.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述效应结构域直接可操作地连接至所述靶向结构域。31.权利要求1
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29中任一项的融合蛋白，其中所述效应结构域间接可操作地连接至所述靶向结构域。32.权利要求31的融合蛋白，其中所述效应结构域通过肽接头间接可操作地连接至所述靶向结构域。33.权利要求32的融合蛋白，其中所述效应结构域通过足够长度的肽接头间接融合至所述靶向结构域，使得所述效应结构域和所述靶向结构域能够同时结合各自的靶蛋白。34.权利要求32或33的融合蛋白，其中所述肽接头包含SEQ ID NO：375
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384或402
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519中任一个的氨基酸序列，或SEQ ID NO：375
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384或402
‑
519中任一个的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列。35.权利要求34的融合蛋白，其中所述肽接头包含SEQ ID NO：375
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384中任一个的氨基酸序列，或SEQ ID NO：375
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384中任一个的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列。36.前述权利要求中任一项的融合蛋白，其中所述效应结构域直接或间接可操作地连接至所述靶向结构域的C末端。37.权利要求1
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35中任一项的融合蛋白，其中所述效应部分直接或间接可操作地连接至所述靶向结构域的N末端。
38.一种编码权利要求1
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37中任一项的融合蛋白的核酸分子。39.权利要求38的核酸分子，其中所述核酸分子是DNA分子。40.权利要求38的核酸分子，其中所述核酸分子是RNA分子。41.一种载体，其包含权利要求38
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40中任一项的核酸分子。42.权利要求41的载体，其中所述载体是质粒或病毒载体。43.一种病毒颗粒，其包含权利要求38
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40中任一项的核酸分子。44.一种体外细胞或细胞群，其包含权利要求1
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37中任一项的融合蛋白、权利要求38
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40中任一项的核酸分子或权利要求41
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42中任一项的载体。45.一种药物组合物，其包含权利要求1
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37中任一项的融合蛋白、权利要求38
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40中任一项的核酸分子、权利要求41
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42中任一项的载体或权利要求43的病毒颗粒，和赋形剂。46.一种制备权利要求1
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37中任一项的融合蛋白的方法，其包括：a.将权利要求38
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40中任一项的核酸分子、权利要求41
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42中任一项的载体、权利要求43的病毒颗粒引入体外细胞或细胞群；b.在适于表达融合蛋白的条件下在培养基中培养细胞或细胞群，c.从培养基分离融合蛋白，和d.任选地纯化融合蛋白。47.一种治疗或预防受试者的疾病的方法，其包括向有需要的受试者施用权利要求1
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37中任一项的融合蛋白、权利要求38
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40中任一项的核酸分子、权利要求41
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42中任一项的载体、权利要求43的病毒颗粒或权利要求45的药物组合物。48.权利要求47的方法，其中所述受试者是人。49.权利要求47或48的方法，其中所述疾病与相对于未患病对照的胞质蛋白的功能形式的降低的表达相关。50.权利要求47
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49中任一项的方法，其中所述疾病与相对于未患病对照的胞质蛋白的功能形式的降低的稳定性相关。51.权利要求47
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50中任一项的方法，其中所述疾病与相对于未患病对照的胞质蛋白的增加的泛素化相关。52.权利要求47
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51中任一项的方法，其中所述疾病与相对于未患病对照的胞质蛋白的增加的泛素化和降解相关。53.权利要求47
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52中任一项的方法，其中所述疾病是遗传病。54.权利要求47
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53中任一项的方法，其中所述疾病是SYNGAP1脑病、CDKL5缺乏症、STXBP1脑病、早期婴儿癫痫性脑病2型、Wilson病、早期婴儿癫痫性脑病4型、精神发育迟缓常染色体显性遗传5、失语症、alagille综合征1、癫痫、结节性硬化症2、结节性硬化症1、KIF1A相关神经障碍、脑病、Phelan
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McDermid综合征、贝克肌营养不良、RP1、色素性视网膜炎1、扩张型心肌病1G、DYNC1H1综合征、TRIO相关智力障碍(ID)、USP9X发育障碍、进行性肌阵挛性癫痫1(EPM1)或高苯丙氨酸血症BH4缺陷型D(HPABH4D)。55.权利要求47
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54中任一项的方法，其中a.所述靶胞质蛋白是SYNGAP1，并且所述疾病为SYNGAP1脑病；b.所述靶胞质蛋白是SYNGAP1，并且所述疾病为精神发育迟缓常染色体显性遗传5，c.所述靶胞质蛋白是CDKL5，并且所述疾病为CDKL5缺乏症；
d.所述靶胞质蛋白是CDKL5，并且所述疾病为早期婴儿癫痫性脑病e.所述靶胞质蛋白是CDKL5，并且所述疾病为早期婴儿癫痫性脑病2型；f.所述靶胞质蛋白是ATP7B，并且所述疾病为Wilson病；g.所述靶胞质蛋白是STXBP1，并且所述疾病为STXBP1脑病；h.所述靶胞质蛋白是STXBP1，并且所述疾病为早期婴儿癫痫性脑病；i.所述靶胞质蛋白是STXBP1，并且所述疾病为早期婴儿癫痫性脑病4型；j.所述靶胞质蛋白是GRN，并且所述疾病为原发性进行性失语症&FTD(额颞叶变性)；k.所述靶胞质蛋白是JAG1，并且所述疾病为alagille综合征1；l.所述靶胞质蛋白是DEPDC5，并且所述疾病是癫痫(例如，家族性局灶性，具有可变病灶1)；m.所述靶胞质蛋白是TSC2，并且所述疾病为结节性硬化症；n.所述靶胞质蛋白是TSC2，并且所述疾病为结节性硬化症2型；o.所述靶胞质蛋白是TSC2，并且所述疾病为结节性硬化症1型；p.所述靶胞质蛋白是TSC1，并且所述疾病为结节性硬化症；q.所述靶胞质蛋白是TSC1，并且所述疾病为结节性硬化症1型；r.所述靶胞质蛋白是TSC1，并且所述疾病为结节性硬化症2型；s.所述靶胞质蛋白是KIF1A，并且所述疾病为KIF1A相关神经障碍；t.所述靶胞质蛋白是DNM1，并且所述疾病为DNM1脑病；u.所述靶胞质蛋白是DNM1，并且所述疾病为脑病；v.所述靶胞质蛋白是SHANK3，并且所述疾病为Phelan
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McDermid综合征；w.所述靶胞质蛋白是DMD，并且所述疾病为贝克肌营养不良；x.所述靶胞质蛋白是RP1，并且所述疾病为色素性视网膜炎1；y.所述靶胞质蛋白是TTN，并且所述疾病为扩张型心肌病1G；z.所述靶胞质蛋白是DYNC1H1，并且所述疾病为DYNC1H1综合征；aa.所述靶胞质蛋白是TRIO，并且所述疾病为TRIO相关智力障碍(ID)；bb.所述靶胞质蛋白是USP9X，并且所述疾病为USP9X发育障碍；cc.所述靶胞质蛋白是CSTB，并且疾病为进行性肌阵挛性癫痫1(EPM1)；或者dd.所述靶胞质蛋白是PCBD1，疾病是高苯丙氨酸血症BH4缺陷型D(HPABH4D)。56.权利要求47
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55中任一项的方法，其中所述疾病是单倍剂量不足疾病。57.权利要求47
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56中任一项的方法，其中以治疗有效剂量施用所述融合蛋白、核酸分子、载体、病毒颗粒或药物组合物。58.权利要求47
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57中任一项的方法，其中系统地或局部地施用所述融合蛋白、核酸分子、载体、病毒颗粒或药物组合物。59.权利要求47
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58中任一项的方法，其中静脉内、皮下或肌肉内施用所述融合蛋白、核酸分子、载体、病毒颗粒或药物组合物。60.权利要求1
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37中任一项的融合蛋白、权利要求38的多核苷酸、权利要求39的DNA、权利要求40的RNA、权利要求41
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42中任一项的载体、权利要求43的病毒颗粒或权利要求45的药物组合物用作药物。61.权利要求1
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37中任一项的融合蛋白、权利要求38的多核苷酸、权利要求39的DNA、权
利要求40的RNA、权利要求41
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42中任一项的载体、权利要求43的病毒颗粒或权利要求45的药物组合物，用于治疗或抑制遗传病。62.一种特异性结合SYNGAP1的单可变结构域抗体(VHH)，其包含三个互补决定区：CDR1、CDR2和CDR3，其中a.CDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：290、294、298、302、306或310的氨基酸序列或SEQ ID NO：290、294、298、302、306或310的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；b.CDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：291、295、299、303、307或311的氨基酸序列或SEQ ID NO：291、295、299、303、307或311的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；和/或c.CDR3的氨基酸序列包含SEQ ID NO：292、296、300、304、308或312的氨基酸序列或SEQ ID NO：292、296、300、304、308或312的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列。63.权利要求62的VHH，其中a.CDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：290的氨基酸序列或SEQ ID NO：290的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；b.CDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：291的氨基酸序列或SEQ ID NO：291的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；和/或c.CDR3的氨基酸序列包含SEQ ID NO：292的氨基酸序列或SEQ ID NO：292的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列。64.权利要求62的VHH，其中a.CDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：294的氨基酸序列或SEQ ID NO：294的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；b.CDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：295的氨基酸序列或SEQ ID NO：295的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；和/或c.CDR3的氨基酸序列包含SEQ ID NO：296的氨基酸序列或SEQ ID NO：296的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列。65.权利要求62的VHH，其中a.CDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：298的氨基酸序列或SEQ ID NO：298的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；b.CDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：299的氨基酸序列或SEQ ID NO：299的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；和/或c.CDR3的氨基酸序列包含SEQ ID NO：300的氨基酸序列或SEQ ID NO：300的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列。66.权利要求62的VHH，其中a.CDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：302的氨基酸序列或SEQ ID NO：302的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；b.CDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：303的氨基酸序列或SEQ ID NO：303的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；和/或c.CDR3的氨基酸序列包含SEQ ID NO：304的氨基酸序列或SEQ ID NO：304的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列。67.权利要求62的VHH，其中
a.CDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：306的氨基酸序列或SEQ ID NO：306的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；b.CDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：307的氨基酸序列或SEQ ID NO：307的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；和/或c.CDR3的氨基酸序列包含SEQ ID NO：308的氨基酸序列或SEQ ID NO：308的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列。68.权利要求62的VHH，其中a.CDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：310的氨基酸序列或SEQ ID NO：310的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；b.CDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：311的氨基酸序列或SEQ ID NO：311的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；和/或c.CDR3的氨基酸序列包含SEQ ID NO：312的氨基酸序列或SEQ ID NO：312的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列。69.权利要求62
‑
68中任一项的VHH，其中所述VHH包含与SEQ ID NO：293、297、301、305、309或313中任一个的氨基酸序列至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。70.一种(VHH)2，其包含特异性结合SYNGAP1的第一VHH，所述第一VHH包含三个互补决定区：CDR1、CDR2和CDR3，其中a.CDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：290、294、298、302、306或310的氨基酸序列或SEQ ID NO：290、294、298、302、306或310的包含1、2或3个氨基酸修饰的氨基酸序列；b.CDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：291、295、299、303、307或311的氨基酸序列或SEQ ID NO：291、295、299、303、307或311...

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：弗勒克斯治疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：