大豆转录因子GmBURP272在植物耐盐性调控中的应用制造技术

本发明专利技术公开了大豆转录因子GmBURP272在植物耐盐性调控中的应用。本发明专利技术公开的大豆转录因子GmBURP272为氨基酸序列是序列2的蛋白质。本发明专利技术将转录因子GmBURP272的编码基因转入受体大豆的毛状根中，得到转基因毛状根及转基因嵌合体，该转基因大豆毛状根与转空载体大豆毛状根相比，其耐盐性有显著提高。说明转录因子GmBURP272及其编码基因可以调控植物耐盐性，对培育植物高耐盐性品种具有重要的理论和现实意义。实意义。

【技术实现步骤摘要】
大豆转录因子GmBURP272在植物耐盐性调控中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
中，大豆转录因子GmBURP272在植物耐盐性调控中的应用。

技术介绍

[0002]环境中物理、化学因素的变化，例如干旱、盐碱、冷害、冻害、水涝等胁迫因素是造成农作物严重减产的原因之一。美国在1939年
‑
1978年的40年间，保险业对作物减产的赔付统计数据表明，由于盐害及干旱引起减产的赔付比例约占40.8％，高于涝(16.4％)、低温(13.8％)、冰雹(11.3％)和风(7.0％)，更是远高于虫灾(4.5％)、病害(2.7％)和其他因素。因此，培育耐盐/旱性作物是种植业的主要目标之一。提高作物的耐盐/旱性，除了利用传统的育种方法，目前，分子遗传育种已经成为科技工作者所关注的领域之一。
[0003]植物中含BURP结构域的蛋白家族(BURP domain
‑
containing protein)是植物特有的一类重要蛋白，BURP结构域位于蛋白的C
‑
端，按照结构，可分为4个亚家族。在植物中，此类蛋白参与了许多生物学过程，例如，一些器官的形成，应对病原菌入侵等等。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是如何提高植物的耐盐性。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术首先提供了蛋白质或调控所述蛋白质活性或含量的物质的下述任一应用：
[0006]D1)调控植物耐盐性；
[0007]D2)制备调控植物耐盐性产品；
[0008]D3)培育耐盐性增强植物；
[0009]D4)制备培育耐盐性增强植物产品；
[0010]D5)植物育种；
[0011]所述蛋白质来源于大豆，其名称为GmBURP272，为如下A1)、A2)或A3)：
[0012]A1)氨基酸序列是序列2的蛋白质；
[0013]A2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；
[0014]A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。
[0015]为了使A1)中的蛋白质便于纯化，可在由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如下表所示的标签。
[0016]表：标签的序列
[0017]标签残基序列Poly
‑
Arg5
‑
6(通常为5个)RRRRRPoly
‑
His2
‑
10(通常为6个)HHHHHHFLAG8DYKDDDDK
Strep
‑
tag II8WSHPQFEKc
‑
myc10EQKLISEEDL
[0018]上述A2)中的GmBURP272蛋白质，为与序列2所示蛋白质的氨基酸序列具有75％或75％以上同一性且具有相同功能的蛋白质。所述具有75％或75％以上同一性为具有75％、具有80％、具有85％、具有90％、具有95％、具有96％、具有97％、具有98％或具有99％的同一性。
[0019]上述A2)中的GmBURP272蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。
[0020]上述A2)中的GmBURP272蛋白质的编码基因可通过将序列1所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5
′
端和/或3
′
端连上上表所示的标签的编码序列得到。其中，序列1所示的DNA分子编码序列2所示的GmBURP272蛋白质。
[0021]上述应用中，所述物质可为下述B1)至B9)中的任一种：
[0022]B1)编码GmBURP272的核酸分子；
[0023]B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；
[0024]B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；
[0025]B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；
[0026]B5)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
[0027]B6)含有B1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有B2)所述表达盒的转基因植物组织；
[0028]B7)含有B1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有B2)所述表达盒的转基因植物器官；
[0029]B8)降低GmBURP272表达量的核酸分子；
[0030]B9)含有B8)所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物、转基因植物细胞系、转基因植物组织或转基因植物器官。
[0031]上述应用中，B1)所述核酸分子可为如下b11)或b12)或b13)或b14)：
[0032]b11)编码序列是序列表中序列1的cDNA分子或DNA分子；
[0033]b12)序列表中序列1的cDNA分子或DNA分子；
[0034]b13)与b11)或b12)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码GmBURP272的cDNA分子或DNA分子；
[0035]b14)在严格条件下与b11)或b12)或b13)限定的核苷酸序列杂交，且编码GmBURP272的cDNA分子或DNA分子。
[0036]其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。
[0037]本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方法，对本专利技术的编码GmBURP272蛋白质的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本专利技术分离得到的GmBURP272蛋白质的核苷酸序列75％或者更高同一性的核苷酸，只要
编码GmBURP272蛋白质且具有GmBURP272蛋白质功能，均是衍生于本专利技术的核苷酸序列并且等同于本专利技术的序列。
[0038]这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本专利技术的编码序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有75％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。
[0039]上述应用中，所述严格条件可为如下：50℃，在7％十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M NaPO4和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，2
×
SSC，0.1％SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M NaPO4和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，1
×
SSC，0.1％SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.蛋白质或调控所述蛋白质活性或含量的物质的下述任一应用：D1)调控植物耐盐性；D2)制备调控植物耐盐性产品；D3)培育耐盐性增强植物；D4)制备培育耐盐性增强植物产品；D5)植物育种；所述蛋白质为如下A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是序列2的蛋白质；A2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述物质为下述B1)至B9)中的任一种：B1)编码权利要求1中所述蛋白质的核酸分子；B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；B5)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系；B6)含有B1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有B2)所述表达盒的转基因植物组织；B7)含有B1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有B2)所述表达盒的转基因植物器官；B8)降低权利要求1中所述蛋白质表达量的核酸分子；B9)含有B8)所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物、转基因植物细胞系、转基因植物组织或转基因植物器官。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：B1)所述核酸分子为如下b11)或b12)或b13)或b14)：b11)编码序列是序列表中序列1的cDNA分子或DNA分子；b12)序列表中序列1的cDNA分子或DNA分子；b13)与b11)或b12)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码权利要求1中所述蛋白质的cDNA分子或DNA分子；b14)在严格条...

【专利技术属性】
技术研发人员：张劲松，陶建军，张万科，韦伟，阴翠翠，陈受宜，
申请(专利权)人：中国科学院遗传与发育生物学研究所，
类型：发明
国别省市：