一种快速检测维生素K2含量的方法技术

本发明专利技术涉及分析化学技术领域，具体涉及一种快速检测维生素K2含量的方法。该方法取维生素K2粉剂适量加入水和有机溶剂混合后涡旋振荡，静置5～10分钟分层后，取上层有机相测定维生素K2的含量，再乘以稀释倍数就是粉剂中维生素K2的含量。本发明专利技术通过对维生素K2的含量测定方法进行线性、精密度、重复性、稳定性、空白、检出限、定量限、回收率试验，均符合GB/T27404～2008《实验室质量控制规范》的要求，证明含量测定方法科学有效，能对维生素K2粉剂中维生素K2含量起到质量控制的目的。本发明专利技术操作简单，而且采用本发明专利技术，每批样品检测时间仅需要50min，大大提高了检测效率。大大提高了检测效率。大大提高了检测效率。

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测维生素K2含量的方法


[0001]本专利技术涉及分析化学
，具体涉及一种快速检测维生素K2含量的方法。

技术介绍

[0002]维生素K2是一种脂溶性维生素，具有叶绿醌生物活性的萘醌基团的衍生物，也被称为甲萘醌，以维生素K2(MK
‑
7，七烯甲萘醌)最为重要。维生素K2是机体必须的、不可替代的且不易获得的微量元素。由于其在自然界食物中含量极少，因此被称为“铂金”维生素。它具有帮助成骨细胞分泌的初级骨钙素羧化，变成活性骨钙素，从而促进血液中的钙离子沉积入骨，增加骨密度，防止骨折；预防肝硬化进展为肝癌；生成胰岛素，维持血糖的稳定，预防糖尿病；有助于与肥胖症相关的预防代谢疾病抑制可能促进癌症的基因，同时强化促进健康细胞的基因等作用。
[0003]维生素K2易溶于有机溶剂，正己烷、乙醚等。维生素K2的产品有油剂和粉剂两种形态。油剂是将维生素K2分散在大豆油或其他油脂中，工业生产中常采用玉米淀粉、乳化剂等将维生素K2油剂包埋进去从而转变为维生素K2粉剂，以改善维生素K2油剂存放时易被氧化变质的问题，添加在婴幼儿和孕产妇奶粉中或制备片剂保健食品时更易操作。生产企业在生产维生素K2粉剂时由于包埋工艺的不同，导致维生素K2粉剂中维生素K2的含量的测量值远低于实际含量。
[0004]维生素K2粉剂在生产时采用不同的包埋工艺，导致有的维生素K2被包材深度包埋，从而不能测出粉剂中全部维生素K2含量。因此，为控制维生素K2相关产品质量，并缩短生产周期，为企业降低成本，需要建立更高效便捷的维生素K2粉剂检测方法。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是针对上述现有技术的不足，提供一种快速检测维生素K2含量的方法，以解决维生素K2粉剂中由于维生素K2被包埋而不能准确测出维生素K2含量的问题，达到维生素K2快速检出，提高检测准确性以及检测效率的目的。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种快速检测维生素K2含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0007]S1、称取待测样品0.1000g并置于10ml带刻度的棕色连盖离心管中，加入超纯水，再加入有机溶剂，盖上盖之后置于多孔涡旋震荡仪震荡萃取完毕后，静置分层后，取上层有机相作为待测样品溶液；
[0008]S2、将S1的待测样品溶液进行高效液相色谱分析，其条件为：色谱柱为C18的反相柱，流动相为三氯甲烷和甲醇的混合有机溶剂，进样量为10μL，使用紫外检测器254nm下进行检测；
[0009]S3、配制标准样品溶液：称取维生素K2标准样品，制成10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、120μg/mL的标准样品溶液；
[0010]S4、建立标准曲线：将S3得到的标准样品溶液在S2的条件下进行高效液相分析，并
且统计其色谱峰的面积，并且以峰面积为纵坐标，已知浓度为横坐标，建立标准曲线；
[0011]S5、将S2中相应位置的峰面积与标准曲线进行对比，得到待测样品溶液中维生素K2的浓度，并且计算待测样品中维生素K2浓度。
[0012]进一步地，所述的S1中超纯水添加量为1ml，有机溶剂添加量为5ml，涡旋震荡萃取时间为15min，静置时间为10min。
[0013]进一步地，所述的S1中有机溶剂为正己烷和异丙醇的混合有机溶剂，其中正己烷：异丙醇＝2：1，正己烷、异丙醇均为色谱纯。
[0014]进一步地，所述的S1中震荡采用的是多孔微量震荡仪，震荡的频率是20Hz，震荡幅度为4mm。
[0015]进一步地，所述的S2中色谱柱直径为4.6mm，长度为250mm，填料粒径为5μm，柱温为35～50℃。
[0016]进一步地，所述的S2中流动相包含0～10体积份的三氯甲烷和90～100体积份的甲醇。
[0017]进一步地，所述的流动相流速为1.0mL/min。
[0018]进一步地，所述的S5中维生素K2含量按照下式来计算：
[0019]维生素K2含量(μg/g)＝c*n/m
[0020]c：由标准曲线计算得到的待测样品浓度，μg/mL；
[0021]n：样品预处理后的有机相体积，ml；
[0022]m：待测样品称样量，g。
[0023]本专利技术的有益效果：
[0024]1、解决了维生素K2粉剂由于维生素K2被包埋而不能准确测出维生素K2含量的问题；
[0025]2、操作简单，每批样品检测时间仅需要50min，大大提高了检测效率；
[0026]3、科学有效，能对维生素K2粉剂中维生素K2含量起到质量控制的目的。
附图说明
[0027]图1是本专利技术实施例1的标准样品溶液的高效液相色谱图；
[0028]图2是本专利技术实施例1的待测样品溶液的高效液相色谱图；
[0029]图3是本专利技术实施例2的标准样品溶液的高效液相色谱图；
[0030]图4是本专利技术实施例2的待测样品溶液的高效液相色谱图；
[0031]图5是本专利技术实施例3的标准样品溶液的高效液相色谱图；
[0032]图6是本专利技术实施例3的待测样品溶液的高效液相色谱图；
[0033]图7是本专利技术实施例4的标准样品溶液的高效液相色谱图；
[0034]图8是本专利技术实施例4的待测样品溶液的高效液相色谱图。
具体实施方式
[0035]下面将结合实施例和附图，对本专利技术技术方案进行清楚、完整地描述。
[0036]本专利技术采用有机相从粉剂的水溶液中萃取出维生素K2的方法快捷，准确的测出粉剂中全部的维生素K2；本专利技术的含量测定方法适用于维生素K2粉剂成品的质量控制，并且
适用于此种粉剂制备的保健食品的过程控制以及成品质量控制。
[0037]实施例1
[0038]除非另外地说明，本专利技术所测定的维生素K2是MK
‑
7，其CAS号为2124
‑
57
‑
4。
[0039]除非另外地说明，在各个实施例的S1中，震荡的频率是20Hz，震荡幅度为4mm，震荡结束后静置10分钟。
[0040]实施例1
[0041]一种维生素K2含量的检测方法，其经过以下步骤：
[0042]S1、从待测样品中提取维生素K2
[0043]在本实施例中，待测样品的产品名称：维生素K2粉剂，批号：2210276351311，生产厂家：新拓洋生物工程有限公司。
[0044]准确称取0.1000g粉剂的待测样品于置于10ml带刻度的棕色连盖离心管中，加入1ml超纯水，再加入5ml有机溶剂(正己烷：异丙醇＝2：1)，盖上盖之后置于多孔涡旋震荡仪震荡萃取完毕后，静置10分钟分层后，使用一次性塑料胶头滴管吸取上层有机相1ml作为待测样品溶液；
[0045]S2、待测样品溶液的高效液相色谱分析
[0046]将S1的样品溶液进行高效液相色谱析，其条件为：色谱柱：Hype本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速检测维生素K2含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、称取待测样品0.1000g并置于10ml带刻度的棕色连盖离心管中，加入超纯水，再加入有机溶剂，盖上盖之后置于多孔涡旋震荡仪震荡萃取完毕后，静置分层后，取上层有机相作为待测样品溶液；S2、将S1的待测样品溶液进行高效液相色谱分析，其条件为：色谱柱为C18的反相柱，流动相为三氯甲烷和甲醇的混合有机溶剂，进样量为10μL，使用紫外检测器254nm下进行检测；S3、配制标准样品溶液：称取维生素K2标准样品，制成10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、120μg/mL的标准样品溶液；S4、建立标准曲线：将S3得到的标准样品溶液在S2的条件下进行高效液相分析，并且统计其色谱峰的面积，并且以峰面积为纵坐标，已知浓度为横坐标，建立标准曲线；S5、将S2中相应位置的峰面积与标准曲线进行对比，得到待测样品溶液中维生素K2的浓度，并且计算待测样品中维生素K2浓度。2.根据权利要求1所述的一种快速检测维生素K2含量的方法，其特征在于：所述的S1中超纯水添加量为1ml，有机溶剂添加量为5ml，涡旋震荡萃取时间为15min，静置时间为10...

【专利技术属性】
技术研发人员：周俊俊，李虎，孙秋月，吴彦红，王欲翠，金亨利，陈黎，崔凤霞，张抗，刘杉，曹晓伟，陈慧霞，张建国，史立军，秦天苍，
申请(专利权)人：新拓洋生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：