单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法技术

本发明专利技术提供了单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法，涉及化合物测定方法技术领域，所述检测方法包括以下步骤：高效液相色谱测定不同浓度的标准品工作液，绘制标准品质量浓度和峰面积的标准曲线；进一步换算标准品摩尔浓度与峰面积的标准曲线；根据当标准品与待测化合物具有相同生色团时，摩尔浓度相同时，吸光度相同，得到待测化合物质量浓度与峰面积的标准曲线；将测得的待测化合物峰面积代入，计算得到待测化合物质量浓度。本发明专利技术所述检测方法使用标准品少，测定结果准确，同时也节省了对每个成分的标曲制定等一系列方法学考察的时间和成本，提升了方法开发效率。提升了方法开发效率。提升了方法开发效率。

【技术实现步骤摘要】
单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法


[0001]本专利技术涉及化合物测定方法
，尤其涉及单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法。

技术介绍

[0002]复杂体系是经常出现在化学分析研究中的一种研究对象，广泛存在于食品、药品等各个领域。复杂样本往往含有很多结构类似物(包括同分异构体、同系物等)，具有相似的物理化学性质。在对复杂体系样本进行成分分析尤其定量评价时，需要对多成分进行定量分析来全面地表征复杂样本的质量。
[0003]多组分定量方法有两种，分别是传统的多标准品定量(多标曲法)和一个标准品定量多组分。实际应用中，多标曲法定量存在工作量大和标准品难以获得的难题，与部分标准品制备困难、结构不稳定、价格昂贵等有关，因此采用一个标准品定量多组分逐步成为研究热点，目前常见的方法是一测多评法。一测多评法于2006年首次被提出，即通过建立不同成分间的内在函数关系实现用一个标准品同时定量多个成分的目的，又称为一标多测法(single standardto determine multi
‑
components，SSDMC)。目前基于液相色谱分析的一测多评法是多成分分析方法中的主要方法。
[0004]但是，应用过程中发现一测多评法仍存在着很多问题。比如：1)误差递增：一测多评法多组分定量分析中计算步骤较多，而每一步计算都会产生误差，因此，误差会逐级放大。2)样品中各组分成分之间需要相对校正因子来进行计算，而相对校正因子的影响因素较多，且计算所得值偏差较大，难以避免误差。3)内参物质选择：当内标物为样品中的痕量组分时，不同实验室所得相对校正因子差异较大，即相对校正因子的值波动较大，造成多组分含量测定的误差。因此，怎样简化复杂体系的多成分定量，同时提升方法开发的效率、提升方法准确性，这一问题仍待解决。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法，使用标准品少，测定结果准确，同时也节省了对每个成分的标曲制定等一系列方法学考察的时间和成本，提升了方法开发效率。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法，包括以下步骤：
[0008]1)高效液相色谱测定不同浓度的标准品工作液，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制得到标准品质量浓度和峰面积的标准曲线；
[0009]2)根据标准品质量浓度与摩尔浓度的关系，得到标准品摩尔浓度与峰面积的标准曲线；
[0010]3)根据当标准品与待测化合物具有相同生色团时，在标准品摩尔浓度C
r
与待测化
合物摩尔浓度C
测
相同时，标准品吸光度y
r
与待测化合物吸光度y
测
相同，以及待测化合物质量浓度与摩尔浓度的关系，得到待测化合物质量浓度与峰面积的标准曲线：
[0011][0012]y
测
为待测化合物峰面积，x
测
为待测化合物质量浓度，M
r
为标准品摩尔质量，M
测
为待测化合物摩尔浓度，a和b为参数；
[0013]将测得的待测化合物峰面积y
测
代入式(5)，计算得到待测化合物质量浓度x
测
。
[0014]优选的，步骤1)所述标准品质量浓度和峰面积的标准曲线为：
[0015]y
r
＝ax
r
(mg/mL)+b
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
(1)，
[0016]y
r
为标准品峰面积，x
r
为标准品质量浓度，a和b为参数。
[0017]优选的，步骤2)所述标准品质量浓度与摩尔浓度的关系为：
[0018]x
r
(mg/mL)＝1000*M
r
*C
r
(mmol/L)
ꢀꢀꢀꢀ
(2)，
[0019]x
r
为标准品质量浓度，M
r
为标准品摩尔质量，C
r
为标准品摩尔浓度。
[0020]优选的，步骤2)所述标准品摩尔浓度与峰面积的标准曲线为：
[0021]y
r
＝a*1000*M
r
*C
r
(mmol/L)+b
ꢀꢀꢀꢀ
(3)，
[0022]y
r
为标准品峰面积，C
r
为标准品摩尔浓度，M
r
为标准品摩尔质量，a和b为参数。
[0023]优选的，步骤3)所述待测化合物质量浓度与摩尔浓度的关系为：
[0024][0025]C
测
为待测化合物摩尔浓度，x
测
为待测化合物质量浓度，M
测
为待测化合物摩尔质量。
[0026]本专利技术提供了单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法，首先，本专利技术所述检测方法使用标准品少，标准品大多昂贵，与采用多个标准品的多成分定量法相比，节省了费用，同时也节省了对每个成分的标曲制定等一系列方法学考察的时间和成本，提升了方法开发效率；本专利技术所述测定方法仅仅需要通过已有标准品的成分的标准曲线推算其余待定量成分的标准曲线，而已有的一测多评法需要测定有标准品的成分与其余各个待定量成分之间的相对校正因子，而相对校正因子受到成分浓度、实验条件等的影响较大，造成含量测定结果误差较大，同时，本专利技术所建立方法不需要测定不同成分之间的关系，不需要繁琐的校正因子对其他组分进行校正，避免了仪器、实验室等外部因素以及标准物质纯度等的内部因素的影响，节约了测定时间和成分，提升了定量方法开发的效率和准确性；此外，因本专利技术所述定量的标准曲线换算完全依赖于化合物的物理特征的摩尔质量，待测化合物一旦确定，摩尔质量则不变，因此，减少了不必要的误差，内参物选择自由，不需要考虑该化合物在样品中的含量。
附图说明
[0027]图1为供试品人参药材饮片高效液相色谱仪色谱分析图(图1中1为人参皂苷Rg1；2为人参皂苷Re；3为人参皂苷Rf；4为人参皂苷Rb1；5为人参皂苷Rb2；6为人参皂苷RD)；
[0028]图2为人参皂苷结构图；
[0029]图3为实施例1与对比例2测定结果比较；
[0030]图4为供试品黄芩药材饮片高效液相色谱仪色谱分析图(图4中1为黄芩苷；2为汉黄芩苷；3为黄芩素)；
[0031]图5为黄芩苷、汉黄芩苷和黄芩素的结构图；
[0032]图6为实施例2与对比例4测定结果比较。
具体实施方式
[0033]本专利技术提供了单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0034]1)高效液相色谱测定不同浓度的标准品工作液，以质量浓度为横坐标，峰本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)高效液相色谱测定不同浓度的标准品工作液，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制得到标准品质量浓度和峰面积的标准曲线；2)根据标准品质量浓度与摩尔浓度的关系，得到标准品摩尔浓度与峰面积的标准曲线；3)根据当标准品与待测化合物具有相同生色团时，在标准品摩尔浓度C
r
与待测化合物摩尔浓度C
测
相同时，标准品吸光度y
r
与待测化合物吸光度y
测
相同，以及待测化合物质量浓度与摩尔浓度的关系，得到待测化合物质量浓度与峰面积的标准曲线：y
测
为待测化合物峰面积，x
测
为待测化合物质量浓度，M
r
为标准品摩尔质量，M
测
为待测化合物摩尔浓度，a和b为参数；将测得的待测化合物峰面积y
测
代入式(5)，计算得到待测化合物质量浓度x
测
。2.如权利要求1所述单一标准品定量具有相同生色团的多种化合物的方法，其特征在于，步骤1)所述标准品质量浓度和峰面积的标准曲线为：y
r
＝a x
r
(mg/mL)+b
ꢀꢀꢀꢀꢀ
(1)，y
r
为标准品峰面积，x
...

【专利技术属性】
技术研发人员：代云桃，陈茜，陈士林，李鹏跃，靳如娜，
申请(专利权)人：中国中医科学院中药研究所，
类型：发明
国别省市：