【技术实现步骤摘要】
一种用于多种蛋白酶残留量及活性检测的多肽及其应用
[0001]本专利技术涉及色谱法检测
,尤其涉及一种用于多种蛋白酶残留量及活性检测的多肽及其应用。
技术介绍
[0002]肽(peptide)是α
‑
氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,它也是蛋白质水解的中间产物。多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质。伴随着分子生物学、生物化学技术的飞速发展,多肽的研究取得了惊人的、划时代的进展。人们发现存在于生物体的多肽已有数万种,并且发现所有的细胞都能合成多肽。目前,多肽的应用主要集中在多肽药物、多肽药物载体、多肽营养食品等方面。
[0003]蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。按其降解多肽的方式分成内肽酶和外肽酶两类。前者可把大分子量的多肽链从中间切断,形成分子量较小的朊和胨;后者又可分为羧肽酶和氨肽酶,它们分别从多肽的游离羧基末端或游离氨基末端逐一将肽链水解生成氨基酸。按属性又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶。按其反应的最适pH值,分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。蛋白酶广泛存在于动物、植物和微生物中。可以通过直接提取获得天然蛋白酶,也可通过基因工程技术获得重组蛋白酶。蛋白酶已广泛应用在工业、农业、食品,特别的制药行业中。
[0004]目前在重组蛋白质药物制造中,如胰岛素及其类似物的工艺过程中,根据工艺和设计的不同,分别采用羧肽酶B(CPB)、双碱基氨基酸内肽酶(Kex2,Kexin)、赖氨酰内肽酶(Lys
‑
C)、胰 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于多种蛋白酶残留量及活性检测的多肽,其特征在于:所述多肽包括至少一个酶切位点,所述多肽含有的氨基酸数目为a,3<a<20;所述氨基酸至少一个为芳香族氨基酸及其衍生物、杂环族氨基酸及其衍生物中的一种且位于酶切位点的N端或C端;所述酶切位点包括内肽酶酶切位点、外肽酶酶切位点中的一种或几种;优选地,所述芳香族氨基酸包括酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸;所述杂环族氨基酸包括组氨酸;所述内肽酶包括赖氨酰内肽酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、肠激酶、双碱基氨基酸内肽酶、糜蛋白酶;所述外肽酶包括羧基肽酶、氨基肽酶。2.根据权利要求1所述的一种用于多种蛋白酶残留量及活性检测的多肽,其特征在于:所述多肽的氨基酸序列为X1‑
X2‑
K1‑
R
‑
X3‑
X4‑
K2,X1、X2、X3、X4为氨基酸,K1、K2分别各自为赖氨酸,R为精氨酸;其中,X2‑
K1为赖氨酰内肽酶、胰蛋白酶酶切位点,K1‑
R为双碱基氨基酸内肽酶、胰蛋白酶酶切位点,X4‑
K2为羧肽酶B酶切位点;优选地,所述多肽的氨基酸序列为YGKRLWK。3.根据权利要求1所述的一种用于多种蛋白酶残留量及活性检测的多肽,其特征在于:所述多肽的氨基酸序列为X1‑
D
‑
D
‑
D
‑
D
‑
K1‑
R
‑
X2‑
X3‑
K2,X1、X2、X3为氨基酸,D为门冬氨酸,K1、K2分别各自为赖氨酸,R为精氨酸;其中,K1‑
R为肠激酶、赖氨酰内肽酶、胰蛋白酶、双碱基氨基酸内肽酶酶切位点,X3‑
K2为羧肽酶B酶切位点;优选地,所述多肽的氨基酸序列为YDDDDKRGWK。4.一种试剂盒,其特征在于,包括权利要求1
‑
3任一项所述的用于多种蛋白酶残留量及活性检测的多肽。5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,还包括Tris
‑
HCl缓冲液、Na
+
盐、Ca
2+
盐、碳酸...
【专利技术属性】
技术研发人员:文海燕,付志成,谭长成,向菊,刘日勇,范开,
申请(专利权)人:重庆艾美迪生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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