测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其甲盒包含甲盒体、甲内衬及三种容器；且三种容器均竖直放置在甲内衬的容置槽内；第一容器装有校准品；第二容器装有质控品；第三容器装有样本释放剂D；其乙盒包含乙盒体、乙内衬及五种容器；且五种容器竖直放置在乙内衬的容置槽内；第四容器装有稳定同位素内标工作液；第五容器装有样本释放剂A；第六容器装有样本释放剂B；第七容器装有样本释放剂C；第八容器装有样本释放剂E。本实用新型专利技术的试剂盒能同时测定贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗等五种药物浓度，不受药物抗抗体干扰，前处理耗时少，有效提高检测通量、时效性及结果准确性。果准确性。果准确性。

【技术实现步骤摘要】
测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒


[0001]本技术涉及体外诊断(Invitro diagnostic，IVD)领域，特别涉及一种测定人血清中抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒。

技术介绍

[0002]治疗性单克隆抗体(Therapeutic Monoclonal Antibodies，mAb)是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，具有特异性高、疗效确切等优点，已广泛应用于肿瘤的靶向治疗，大大延长了恶性肿瘤患者的生存期，改善了生活质量；其中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗是目前临床最常用的五种抗肿瘤单抗药物，因具有广谱(数十种不同类型恶性肿瘤)的抗肿瘤疗效，越来越多的被用于临床肿瘤治疗。
[0003]随着抗肿瘤单克隆抗体药物的深入研发和临床使用，临床问题也逐渐显现，不同个体对于单克隆抗体药物的响应程度有显著差异，数据表明，曲妥珠单抗体内药时曲线下面积(AUC)的个体间差异达10％～35％，谷浓度的个体间差异高达10倍；利妥昔单抗体内AUC的个体间差异达6.2倍，谷浓度的个体间差异高达23倍；贝伐珠单抗体内AUC的个体间差异达24倍。因此有必要通过对单抗药物开展治疗药物监测(therapeutic drug monitoring，TDM)，实施个体化治疗策略。2020年5月由中国药理学会和中日友好医院发起的《抗肿瘤生物类似药治疗药物监测药学专家共识》推荐对单克隆抗体药物进行浓度监测，保证患者最大的程度的获益。
[0004]目前，单克隆抗体药物浓度检测主要有液相色谱串联质谱法(Liquid Chromatography
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Tandem Mass Spectrometry，LC
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MS/MS)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)两种方法。ELISA法是目前临床常用的方法，但其在单抗药的治疗药物监测中存在很多缺点，定量范围较窄(约2个数量级)、高特异性抗体的开发时间长和难以获得、存在交叉免疫、非特异性结合、专属性差、仅可测定抗体的游离形式等缺点。近年来，LC
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MS/MS法凭借其高分离性、高专属性和准确定量的优势，已逐渐成为单抗药物研究必不可少的手段之一，并且《抗肿瘤生物类似药治疗药物监测药学专家共识》中强烈推荐用LC
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MS/MS法用于治疗药物监测。
[0005]已发表或公开的采用LC
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MS/MS法检测抗肿瘤单克隆抗体药物的专利较少。中国专利申请CN 202111052312.3提供了一种基于液相色谱串联质谱快速测定血浆中3种单克隆抗体药物的监测方法，该方法通过富集，去除杂质，洗脱，洗脱液冷冻浓缩干燥、酶解等步骤实现利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗三种单克隆抗体药物的检测，该前处理过程需要耗时约1天，步骤繁琐，耗时较长，且仅可检测三种单克隆抗体药物。中国专利申请CN 202111076075.4提供了一种基于液相色谱串联质谱快速测定血清中2种单克隆抗体药物的监测方法，该方法通过富集，去除杂质，蛋白变性、还原、烷基化、酶解及检测等步骤实现贝伐珠单抗和曲妥珠单抗的同时检测，该前处理过程需要耗时约半天，步骤繁琐，耗时较长，且仅可检测两种单克隆抗体药物。

技术实现思路

[0006]本技术要解决的技术问题是提供一种测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其能基于LC
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MS/MS法同时测定人血清中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗药物浓度，不受药物抗抗体干扰，前处理耗时少，有效提高检测通量、时效性及结果准确。
[0007]为解决上述技术问题，本技术提供的测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其包括甲盒和乙盒；
[0008]所述甲盒包含甲盒体11及设置在甲盒体11内的甲内衬12和第一容器1、第二容器2及第三容器3；
[0009]所述乙盒包含乙盒体21及设置在乙盒体21内的乙内衬22和第四容器4、第五容器5、第六容器6、第七容器7及第八容器8；
[0010]第一容器1、第二容器2及第三容器3分别竖直放置在所述甲内衬12形成的相应独立的竖直容置槽内，被容置槽紧密包裹固定；
[0011]第四容器4、第五容器5、第六容器6、第七容器7及第八容器8分别竖直放置在所述乙内衬22形成的相应独立的竖直容置槽内，被容置槽包裹固定；
[0012]第一容器1内装有校准品，所述校准品为用于建立贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的校准曲线；
[0013]第二容器2内装有质控品，所述质控品仅用于对贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的浓度检测结果进行质量控制；
[0014]第三容器3内装有样本释放剂D，所述样本释放剂D仅用于血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的富集后酶切；
[0015]第四容器4内装有稳定同位素内标工作液；
[0016]第五容器5内装有样本释放剂A，所述样本释放剂A仅用于血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的富集；
[0017]第六容器6内装有样本释放剂B，所述样本释放剂B仅用于给血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的富集过程提供缓冲体系；
[0018]第七容器7内装有样本释放剂C，所述样本释放剂C仅用于给血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的酶切过程提供缓冲体系；
[0019]第八容器8内装有样本释放剂E，所述样本释放剂E仅用于血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的酶切反应的终止。
[0020]较佳的，校准品和质控品均包含贝伐珠单抗标准品、帕妥珠单抗标准品、利妥昔单抗标准品、曲妥珠单抗标准品、西妥昔单抗标准品及血清。
[0021]所述乙盒包含乙盒体21及设置在乙盒体21内的乙内衬22和第四容器4、第五容器5、第六容器6、第七容器7、第八容器8；
[0022]第四容器4、第五容器5、第六容器6、第七容器7及第八容器8分别竖直放置在所述乙内衬22形成的相应独立的竖直容置槽内，被容置槽紧密包裹固定；
[0023]第四容器4内装有稳定同位素内标工作液；
[0024]第五容器5内装有样本释放剂A，所述样本释放剂A仅用于血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的富集；
[0025]第六容器内装有样本释放剂B，所述样本释放剂B仅用于给血清样本中阿达木单抗和英夫利昔单抗的富集过程提供缓冲体系；
[0026]第七容器内装有样本释放剂C，所述样本释放剂C仅用于给血清样本中阿达木单抗和英夫利昔单抗的酶切过程提供缓冲体系；
[0027]第八容器内装有样本释放剂E，所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其特征在于，其包括甲盒和乙盒；所述甲盒包含甲盒体(11)及设置在甲盒体(11)内的甲内衬(12)和第一容器(1)、第二容器(2)及第三容器(3)；所述乙盒包含乙盒体(21)及设置在乙盒体(21)内的乙内衬(22)和第四容器(4)、第五容器(5)、第六容器(6)、第七容器(7)及第八容器(8)；第一容器(1)、第二容器(2)及第三容器(3)分别竖直放置在所述甲内衬(12)形成的相应独立的竖直容置槽内，被容置槽紧密包裹固定；第四容器(4)、第五容器(5)、第六容器(6)、第七容器(7)及第八容器(8)分别竖直放置在所述乙内衬(22)形成的相应独立的竖直容置槽内，被容置槽包裹固定；第一容器(1)内装有校准品，所述校准品为用于建立贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的校准曲线；第二容器(2)内装有质控品，所述质控品仅用于对贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的浓度检测结果进行质量控制；第三容器(3)内装有样本释放剂D，所述样本释放剂D仅用于血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的富集后酶切；第四容器(4)内装有稳定同位素内标工作液；第五容器(5)内装有样本释放剂A，所述样本释放剂A仅用于血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的富集；第六容器(6)内装有样本释放剂B，所述样本释放剂B仅用于给血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的富集过程提供缓冲体系；第七容器(7)内装有样本释放剂C，所述样本释放剂C仅用于给血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的酶切过程提供缓冲体系；第八容器(8)内装有样本释放剂E，所述样本释放剂E仅用于血清样本中贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的酶切反应的终止。2.根据权利要求1所述的测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其特征在于，校准品和质控品均包含贝伐珠单抗标准品、帕妥珠单抗标准品、利妥昔单抗标准品、曲妥珠单抗标准品、西妥昔单抗标准品及血清。3.根据权利要求2所述的测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其特征在于，所述血清为鸡血清、兔血清、马血清及牛血清中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其特征在于，所述甲内衬(12)可拆卸的安装在所述甲盒体(11)的内部；所述乙内衬(22)可拆卸的安装在所述乙盒体(21)的内部。5.根据权利要求1所述的测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其特征在于，所述甲内衬(12)、乙内衬(22)均为海绵材质。
6.根据权利要求1所述的测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其特征在于，所述甲盒体(11)设置可开启/关闭的盒盖，所述盒盖用于完全封闭甲盒体(11)的顶部；所述乙盒体(21)设置可开启/关闭的盒盖，所述盒盖用于完全封闭乙盒体(21)的顶部。7.根据权利要求1所述的测定人血清中五种抗肿瘤单克隆抗体药物浓度的试剂盒，其特征在于，所述第一容器(1)的数量为至少7个，所述校准品至少有7种，每个第一容器(1)分别独立地装有浓度互不相同的贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗和西妥昔单抗的校准品，各第...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢永明，刘喜艳，王芳，王俊霞，丁赤武，
申请(专利权)人：杭州海基生物技术有限公司，
类型：新型
国别省市：