一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体及应用，具体涉及检测阿尔茨海默症血液外泌体标志物Aβ1

【技术实现步骤摘要】
一种抗
β
淀粉样蛋白的单链抗体及应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体涉及一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体及应用。

技术介绍

[0002]β淀粉样蛋白(Beta
‑
amyloid protein)是一种在大脑中积累形成斑块的蛋白质，是阿尔茨海默病的主要病理学特征之一。β淀粉样蛋白由蛋白前体APP(Amyloid Precursor Protein)经酶的作用分解而来，其中包括β淀粉样蛋白1
‑
40和1
‑
42两种形式。
[0003]血液外泌体是一种细胞分泌的小囊泡，含有细胞膜蛋白、RNA、蛋白质等生物标志物。近年来，研究者们发现血液外泌体中也存在β淀粉样蛋白1
‑
40和1
‑
42。相比于血液中的游离形式，血液外泌体中的β淀粉样蛋白更具有稳定性和灵敏度，被认为是一种可靠的生物标志物。
[0004]由于血液中β淀粉样蛋白的分子量小且含量及其稀少，传统的检测方法采用单克隆抗体进行检测，由于空间位阻的存在导致灵敏度不够高，检测准确度不够。
[0005]因此，开发一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体及应用迫在眉睫。

技术实现思路

[0006]为解决现有技术存在的缺陷，本专利技术提供一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体及应用，使用单链抗体代替传统抗体作为检测试剂，与经典抗体分子相比，scFv具有分子量小(约占完整抗体分子的1/6)的特征，可以提高检测的灵敏度和特异性。
[0007]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了如下的技术方案：
[0008]本专利技术的第一目的是提供一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体，所述单链抗体为scFv
‑
06，所述单链抗体scFv
‑
06来源于杂交瘤细胞株，所述单链抗体scFv
‑
06能够特异性识别血液外泌体中的β淀粉样蛋白；所述单链抗体scFv
‑
06含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区均由决定簇互补区和框架区组成；所述重链可变区和轻链可变区的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；
[0009]所述重链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
[0010]所述重链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；
[0011]所述重链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；
[0012]所述轻链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示；
[0013]所述轻链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示；
[0014]所述轻链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示。
[0015]优选的，所述单链抗体scFv
‑
06的重链可变区的序列具有与SEQ ID NO.19所示序列至少70％相同的基因序列，所述单链抗体scFv
‑
06的轻链可变区的序列具有与SEQ ID NO.20所示序列至少70％相同的基因序列。
[0016]本专利技术的第二目的是提供一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体，所述单链抗体为scFv
‑
40，所述单链抗体scFv
‑
40来源于杂交瘤细胞株，所述单链抗体scFv
‑
40能够特异性识别血
液外泌体中的Aβ1
‑
40；所述单链抗体scFv
‑
40含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区均由决定簇互补区和框架区组成；所述重链可变区和轻链可变区的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；
[0017]所述重链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示；
[0018]所述重链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.8所示；
[0019]所述重链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示；
[0020]所述轻链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.10所示；
[0021]所述轻链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.11所示；
[0022]所述轻链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.12所示。
[0023]优选的，所述单链抗体scFv
‑
40的重链可变区的序列具有与SEQ ID NO.21所示序列至少70％相同的基因序列，所述单链抗体scFv
‑
40的轻链可变区的序列具有与SEQ ID NO.22所示序列至少70％相同的基因序列。
[0024]本专利技术的第三目的是提供一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体，所述单链抗体为scFv
‑
42，所述单链抗体scFv
‑
42来源于杂交瘤细胞株，所述单链抗体scFv
‑
42能够特异性识别血液外泌体中的Aβ1
‑
42；所述单链抗体scFv
‑
42含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区均由决定簇互补区和框架区组成；所述重链可变区和轻链可变区的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；
[0025]所述重链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.13所示；
[0026]所述重链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.14所示；
[0027]所述重链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.15所示；
[0028]所述轻链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.16所示；
[0029]所述轻链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.17所示；
[0030]所述轻链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.18所示。
[0031]优选的，所述单链抗体scFv
‑
42的重链可变区的序列具有与SEQ ID NO.23所示序列至少70％相同的基因序列，所述单链抗体scFv
‑
42的轻链可变区的序列具有与SEQ ID NO.24所示序列至少70％相同的基因序列。
[0032]本专利技术的第四目的是提供一种抗体偶联物，所述抗体偶联物包括单链抗体scFv
‑
06和偶联磁珠或微球的组合、单链抗体scFv
‑
40和吖啶酯的组合、单链抗体scFv
‑
42和吖啶酯的组合中的至少一种。
[0033]本专利技术的第五目的是提供一种含有所述单链抗体的试剂盒，所述试剂盒中包含有所述抗体偶联物、校准品β淀粉样蛋白、吖啶脂标记的单链抗体。
[0034]本专利技术的第六目的是提供一种所述单链抗体在制备用于检测血液外泌体中Aβ1
‑
40及Aβ1
‑
42含量的试剂中的应用。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体为scFv
‑
06，所述单链抗体scFv
‑
06来源于杂交瘤细胞株，所述单链抗体scFv
‑
06能够特异性识别血液外泌体中的β淀粉样蛋白；所述单链抗体scFv
‑
06含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区均由决定簇互补区和框架区组成；所述重链可变区和轻链可变区的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；所述重链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述重链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；所述重链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；所述轻链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示；所述轻链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示；所述轻链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示。2.根据权利要求1所述的抗β淀粉样蛋白的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体scFv
‑
06的重链可变区的序列具有与SEQ ID NO.19所示序列至少70％相同的基因序列，所述单链抗体scFv
‑
06的轻链可变区的序列具有与SEQ ID NO.20所示序列至少70％相同的基因序列。3.一种抗β淀粉样蛋白的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体为scFv
‑
40，所述单链抗体scFv
‑
40来源于杂交瘤细胞株，所述单链抗体scFv
‑
40能够特异性识别血液外泌体中的Aβ1
‑
40；所述单链抗体scFv
‑
40含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区均由决定簇互补区和框架区组成；所述重链可变区和轻链可变区的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；所述重链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示；所述重链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.8所示；所述重链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示；所述轻链可变区的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.10所示；所述轻链可变区的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.11所示；所述轻链可变区的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.12所示。4.根据权利要求3所述的抗β淀粉样蛋白的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体scFv
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40的重链可变区的序列具有与SEQ ID NO.21所示序列至少70％相同的基因序列，所述单链抗体scFv
‑
40的轻...

【专利技术属性】
技术研发人员：周小进，姜晖，陈卓友，裴兵，
申请(专利权)人：苏州仁端生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：