用于人体液淀粉样蛋白定量检测的单抗组合物及应用制造技术

本发明专利技术提供一种用于人体液淀粉样蛋白定量检测的单抗组合物及应用，属于基因工程技术领域。所述单抗组物合含有捕获抗体AB7G和检测抗体AB11A2，用于制备人体液淀粉样蛋白定量检测的试剂盒，此两种抗体分别是培养的杂交瘤细胞AB7G和AB11A2分泌的单克隆抗体。这两株杂交瘤细胞均保藏在中国典型培养物保藏中心。所述试剂盒特异性识别Aβ42寡聚体，检测的线性范围在3.9～125pg/mL，最低检测限是7.8pg/mL。试剂盒组装方式的核心技术为，单抗AB7G固定在酶标板上做捕获抗体，单抗AB11A2标记后1:2000稀释做检测抗体。同时涉及单克隆抗体AB7G和AB11A2的重链和轻链可变区基因及其编码的多肽。本发明专利技术还涉及所述抗体在制备诊断阿尔茨海默病试剂和药物的用途。默病试剂和药物的用途。默病试剂和药物的用途。

【技术实现步骤摘要】
用于人体液淀粉样蛋白定量检测的单抗组合物及应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，具体涉及一种用于人体液淀粉样蛋白定量检测的单抗组合物及应用，抗人β淀粉样蛋白Aβ42的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其在人体液中β淀粉样蛋白Aβ42寡聚体定量检测中的应用，以及在制备预防、诊断或治疗β淀粉样蛋白病的试剂和药物中的应用。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默病(Alzheimer
’
s disease，AD)是以记忆受损和认知障碍为特征的一类不可逆转的渐进性、神经退行性病变。阿尔茨海默病患者脑内淀粉样蛋白(Aβ)寡聚体是此病的一种早期病理改变。可溶性Aβ42寡聚体是阿尔茨海默病早期的主要毒性物质，能引起患者在疾病初期出现认知障碍。实验表明Aβ42寡聚体的毒性主要源自对神经元的损伤，最终引起神经元死亡。因此针对Aβ42寡聚体结构和对神经元损伤作用的研究，对于深入了解Aβ42寡聚体在阿尔茨海默病发病中的作用具有重要意义。
[0003]在早期阿尔茨海默病患者的脑脊液和血液等体液中，出现病理性可溶性Aβ寡聚体(sOAβ)水平的改变。因此，检测OAβ水平能够用于阿尔茨海默病的早期诊断和药物疗效评价。目前虽然有Aβ42检测试剂盒，但是还不能特异性定量检测体液中Aβ42寡聚体(sOAβ)。已知可溶性Aβ42寡聚体是最主要的阿尔茨海默病早期致病因子，对神经元的毒性最强。目前仍缺少关于早期诊断用途的人体液Aβ42寡聚体定量检测的方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种抗人β淀粉样蛋白Aβ42的单克隆抗体及其在人体液中β淀粉样蛋白Aβ42寡聚体定量检测中的应用，以及在制备预防、诊断或治疗β淀粉样蛋白病的试剂和药物中的应用，以解决上述
技术介绍
中存在的至少一项技术问题。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术采取了如下技术方案：
[0006]一方面，本专利技术提供一种用于人体液淀粉样蛋白定量检测的单抗组合物，包括抗人β淀粉样蛋白Aβ42的单克隆抗体AB7G或其片段，以及配合所述的单克隆抗体AB7G或其片段检测Aβ42单体或其聚合体的单克隆抗体AB11A2或其片段；所述单克隆抗体AB7G或其片段能够特异性地结合β淀粉样蛋白Aβ42单体以及β淀粉样蛋白Aβ42聚合体；所述单克隆抗体AB7G或其片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述单克隆抗体AB7G或其片段的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
[0007]所述单克隆抗体AB11A2或其片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；所述单克隆抗体AB11A2或其片段的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。
[0008]第二方面，本专利技术提供一种编码如上所述的单克隆抗体AB7G或其片段的核酸。编码所述单克隆抗体AB7G或其片段的重链可变区的核酸序列如SEQ ID NO:1所示；编码所述单克隆抗体AB7G或其片段的轻链可变区的核酸序列如SEQ ID NO:3所示。
[0009]第三方面，本专利技术提供一种编码如上所述的单克隆抗体AB11A2或其片段的核酸。
编码所述单克隆抗体AB11A2或其片段的重链可变区的核酸序列如SEQ ID NO:5所示；编码所述单克隆抗体AB11A2或其片段的轻链可变区的核酸序列如SEQ ID NO:7所示。
[0010]第四方面，本专利技术提供一种含有如上所述的编码如上所述的单克隆抗体AB7G或其片段的核酸的生物材料，所述生物材料为表达盒、载体、转座子或宿主细胞。
[0011]第五方面，本专利技术提供含有如上所述的编码如上所述的单克隆抗体AB11A2或其片段的核酸的生物材料，所述生物材料为表达盒、载体、转座子或宿主细胞。
[0012]第六方面，本专利技术提供一种复合物或偶联物，包含单克隆抗体AB7G或其片段或由单克隆抗体AB7G或其片段制备得到。所述复合物为单克隆抗体AB7G或其片段经化学标记或生物标记得到；所述偶联物为单克隆抗体AB7G或其片段或所述复合物与固体或半固体介质偶联得到。
[0013]第七方面，本专利技术提供一种复合物或偶联物，包含所述的单克隆抗体AB11A2或其片段或由所述的单克隆抗体AB11A2或其片段制备得到。所述复合物为单克隆抗体AB11A2或其片段经化学标记或生物标记得到；所述偶联物为单克隆抗体AB11A2或其片段或所述复合物与固体或半固体介质偶联得到。
[0014]第八方面，本专利技术提供如上所述的单克隆抗体AB7G或其片段或编码单克隆抗体AB7G或其片段的核酸或单克隆抗体AB11A2或其片段或编码单克隆抗体AB11A2或其片段的核酸或所述的生物材料或所述的复合物或偶联物的如下任一应用：
[0015](1)在制备用于预防、诊断或治疗Aβ42蛋白病的试剂和药物中的应用；
[0016](2)在制备用于缓解Aβ42蛋白的聚合物毒性或控制Aβ42蛋白病发展的产品中的应用；
[0017](3)在制备用于抑制Aβ42蛋白单体或Aβ42蛋白单体的聚合体、原纤维、纤维体形成的产品中的应用；
[0018](4)在制备用于减少Aβ42蛋白聚合体积累的产品中的应用；
[0019](5)在制备用于Aβ42蛋白单体、Aβ42蛋白聚合体、Aβ42蛋白抗体的检测试剂或试剂盒中的应用。
[0020]第九方面，本专利技术提供一种药物，包含所述的单克隆抗体AB7G或其片段或由所述的单克隆抗体AB7G或其片段制备得到；或者，该药物还包含单克隆抗体AB11A2或其片段；所述药物具有如下任一功能：
[0021](1)用于预防、诊断或治疗Aβ42蛋白病；
[0022](2)用于缓解Aβ42蛋白的聚合物毒性或控制Aβ42蛋白病发展；
[0023](3)用于抑制Aβ42蛋白单体聚合或Aβ42蛋白的聚合体、原纤维、纤维体的形成；
[0024](4)用于减少Aβ42蛋白聚合体、原纤维、纤维体的积累。
[0025]本专利技术中所称Aβ42蛋白病为表现为由于Aβ42代谢异常而导致的疾病，包括如阿尔茨海默病或者合并阿尔茨海默病等。
[0026]第十方面，本专利技术提供一种特异性定量检测人体液中β淀粉样蛋白Aβ42单体或其聚合体的试剂盒，包括：如上所述的单克隆抗体AB7G或其片段，其用于捕获Aβ42单体或其聚合体；以及如上所述的单克隆抗体AB11A2或其片段，其用于检测Aβ42单体或其聚合体。单克隆抗体AB7G或其片段固定于酶标板上，单克隆抗体AB11A2或其片段由生物素标记。
[0027]第十一方面，本专利技术提供一种如上所述的编码单克隆抗体AB7G或其片段的核酸或
所述的生物材料在制备抗人淀粉样蛋白单克隆抗体中的应用。
[0028]第十二方面，本专利技术提供一种如上所述的编码单克隆抗体AB11A2或其片段的核酸或所述的生物材料在制备抗人淀粉样蛋白单克隆抗体中的应用。
[0029]第十三方面，本专利技术提供一种如上所述的编码单克隆抗体AB7G或其片段的核酸在构建本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于人体液淀粉样蛋白定量检测的单抗组合物，其特征在于，包括抗人β淀粉样蛋白Aβ42的单克隆抗体AB7G或其片段，以及配合所述的单克隆抗体AB7G或其片段检测Aβ42单体或其聚合体的单克隆抗体AB11A2或其片段；所述单克隆抗体AB7G或其片段能够特异性地结合β淀粉样蛋白Aβ42单体以及β淀粉样蛋白Aβ42聚合体；所述单克隆抗体AB7G或其片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述单克隆抗体AB7G或其片段的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。2.根据权利要求1所述的用于人体液淀粉样蛋白定量检测的单抗组合物，其特征在于，所述单克隆抗体AB11A2或其片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；所述单克隆抗体AB11A2或其片段的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。3.一种编码如权利要求1中所述的单克隆抗体AB7G或其片段的核酸。4.根据权利要求3所述的核酸，其特征在于，编码所述单克隆抗体AB7G或其片段的重链可变区的核酸序列如SEQ ID NO:1所示；编码所述单克隆抗体AB7G或其片段的轻链可变区的核酸序列如SEQ ID NO:3所示。5.一种编码如权利要求2中所述的单克隆抗体AB11A2或其片段的核酸。6.根据权利要求5所述的核酸，其特征在于，编码所述单克隆抗体AB11A2或其片段的重链可变区的核酸序列如SEQ ID NO:5所示；编码所述单克隆抗体AB11A2或其片段的轻链可变区的核酸序列如SEQ ID NO:7所示。7.含有如权利要求3或4所述的核酸的生物材料，其特征在于，所述生物材料为表达盒、载体、转座子或宿主细胞。8.含有如权利要求5或6所述的核酸的生物材料，其特征在于，所述生物材料为表达盒、载体、转座子或宿主细胞。9.一种复合物或偶联物，其特征在于，包含权利要求1所述的单克隆抗体AB7G或其片段或由权利要求1所述的单克隆抗体AB7G或其片段制备得到。10.根据权利要求9所述的复合物或偶联物，其特征在于，所述复合物为权利要求1所述的单克隆抗体AB7G或其片段经化学标记或生物标记得到；所述偶联物为权利要求1所述的单克隆抗体AB7G或其片段或所述复合物与固体或半固体介质偶联得到。11.一种复合物或偶联物，其特征在于，包含权利要求2所述的单克隆抗体AB11A2或其片段或由权利要求2所述的单克隆抗体AB11A2或其片段制备得到。12.根据权利要求11所述的复合物或偶联物，其特征在于，所述复合物为单克隆抗体AB11A2或其片段经化学标记或生物标记得到；所述偶...

【专利技术属性】
技术研发人员：张莹，何金生，闫子迪，洪涛，
申请(专利权)人：北京交通大学，
类型：发明
国别省市：