一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法技术

本发明专利技术提供了一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法；包括：步骤1，组织分离；步骤2，菌丝培养；步骤3，转管纯化。本发明专利技术方法将待分离的食用菌组织块先在PDA平板培养基上培养至菌丝萌发后，再挑取尖端菌丝，接种于断开培养面的PDA斜面培养基中间断开处，经该步骤处理后，可以降低再萌发菌丝的杂菌污染度，减少后续纯化次数。本发明专利技术方法将试管斜面前端培养基与后端培养基断开，间隔为0.8

【技术实现步骤摘要】
一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法


[0001]本专利技术涉及生物
；尤其涉及一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法。

技术介绍

[0002]菌种相当于农作物的种子，是食用菌生产的源头，它的优劣直接影响食用菌产品的质量和产量。实际生产中，食用菌菌种主要以新鲜子实体作为分离材料，通常采用组织分离法和孢子分离法。由于子实体取自自然界，本身会携带大量杂菌，加之受分离环境和分离过程的影响，导致分离菌种时存在被杂菌污染的可能。所以，菌种纯化是食用菌菌种生产中必不可少的环节，是食用菌生产成败的关键。现有的技术，如中国专利CN201811391102公开了一种金针菇菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法，其记载的方法包括以下步骤：(1)组织分离：选择优良健壮的食用菌子实体，在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄交界处切0.5～1厘米长的肉块组织。(2)试管培菌：将肉块组织放置于空白PDA斜面试管的离斜面培养基有2～5毫米侧上方的无基与有基临界点。(3)菌丝培养：将接好种的试管放置在温度20～25℃、相对湿度75～80％环境下培养菌丝。(4)转管提纯：菌丝生长至接触斜面培养基后，在无菌环境下挑取生长迅猛、旺盛的菌丝转接至空白PDA斜面试管，进行菌种提纯。该方法在通过试管培菌的过程中，直接将0.5～1厘米长的肉块组织放置在PDA斜面试管的离斜面培养基有2～5毫米侧上方的无基与有基临界点；该方法存在以下不足：(1)直接用子实体组织块不能杜绝其他真菌的污染；(2)该位置组织块容易掉落至培养基上，不能达到阻断细菌污染的目的。所以，针对现有技术的不足，本申请提供一种解决上述技术问题的方法。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法。
[0004]本专利技术是通过以下技术方案实现的：
[0005]本专利技术涉及一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法，包括以下步骤：
[0006]步骤1，组织分离：选择新鲜的、无病虫害的食用菌子实体，在无菌环境下，表面消毒后，取其内部组织按正常程序进行组织分离；
[0007]步骤2，菌丝培养：将组织块接种于含有链霉素的PDA平板培养基上，恒温培养，待菌丝萌发之后，挑取尖端菌丝用于转管纯化；
[0008]步骤3，转管纯化：在无菌条件下，用接种针将试管斜面前端培养基与后端培养基断开，将取自平板的待接种母种接于间隔处，待菌丝萌发至接触后端培养基后，去除接种块，用酒精灯火焰轻烤；后端菌丝继续生长后即可取尖端菌丝用于后续研究工作。
[0009]优选地，步骤3中，所述用接种针将试管斜面前端培养基与后端培养基断开的间隔为0.8
‑
1.2cm；待菌丝萌发至接触后端培养基后，去除接种块，用酒精灯火焰轻烤间隔处3秒。
[0010]本专利技术具有以下优点：
[0011](1)本专利技术所涉及的方法通过断斜面二次接种的方式，最终达到降低杂菌污染度，
减少纯化次数的目的。
[0012](2)本专利技术方法将组织块先在PDA平板培养基上培养至菌丝萌发后，再挑取尖端菌丝，挑取尖端菌丝接种于断开斜面的PDA斜面培养基中间断开处进行转管纯化，经该步骤处理后，可以降低杂菌污染度，减少后续纯化次数。
[0013](3)本专利技术方法将试管斜面前端培养基与后端培养基断开，间隔为0.8
‑
1.2cm，将取自平板的待接种的母种接于间隔处并于菌丝萌发至接触后端培养基后去除接种块，用酒精灯火焰轻烤间隔处3秒，有效降低了杂菌污染，减少了后续纯化次数。
具体实施方式
[0014]下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。应当指出的是，以下的实施实例只是对本专利技术的进一步说明，但本专利技术的保护范围并不限于以下实施例。
[0015]实施例1
[0016]本实施例涉及一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法，包括以下步骤：
[0017]一、组织分离
[0018]选取形态正常、大小适中、健壮、无病虫害的食用菌子实体，在无菌环境下表面消毒后取其内部组织按正常程序进行组织分离。
[0019]二、菌丝培养
[0020]将组织块接种于含有链霉素的PDA平板培养基上，恒温培养2
‑
3d，待菌丝萌发之后挑取尖端菌丝用于转管纯化。
[0021]三、转管纯化
[0022]在无菌条件下用接种针将试管斜面前端培养基与后端培养基断开，间隔约0.8cm，将取自平板的待接种母种接于间隔处，待菌丝萌发至接触后端培养基后，去除接种块，间隔处置于酒精灯火焰上方来回快速烘烤3秒。后端菌丝继续生长后取尖端菌丝用于后续研究工作。
[0023]实施例2
[0024]本实施例涉及一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法，包括以下步骤：
[0025]一、组织分离
[0026]选取形态正常、大小适中、健壮、无病虫害的食用菌子实体，在无菌环境下表面消毒后取其内部组织按正常程序进行组织分离。
[0027]二、菌丝培养将组织块接种于含有链霉素的PDA平板培养基上，恒温培养2
‑
3d，待菌丝萌发之后挑取尖端菌丝用于转管纯化。
[0028]三、转管纯化
[0029]在无菌条件下用接种针将试管斜面前端培养基与后端培养基断开，间隔约1.0cm，将取自平板的待接种母种接于间隔处，待菌丝萌发至接触后端培养基后，去除接种块，间隔处置于酒精灯火焰上方来回快速烘烤3秒。后端菌丝继续生长后取尖端菌丝用于后续研究工作。
[0030]实施例3
[0031]本实施例涉及一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法，包括以下步骤：
[0032]一、组织分离
[0033]选取形态正常、大小适中、健壮、无病虫害的食用菌子实体，在无菌环境下表面消毒后取其内部组织按正常程序进行组织分离。
[0034]二、菌丝培养将组织块接种于含有链霉素的PDA平板培养基上，恒温培养2
‑
3d，待菌丝萌发之后挑取尖端菌丝用于转管纯化。
[0035]三、转管纯化在无菌条件下用接种针将试管斜面前端培养基与后端培养基断开，间隔约1.2cm，将取自平板的待接种母种接于间隔处，待菌丝萌发至接触后端培养基后，去除接种块，间隔处置于酒精灯火焰上方来回快速烘烤3秒。后端菌丝继续生长后取尖端菌丝用于后续研究工作。
[0036]本专利技术方法将组织块先在PDA平板培养基上培养至菌丝萌发后，再进行挑取尖端菌丝，经该步骤处理后，可以降低杂菌污染度，减少后续纯化次数。本专利技术方法将试管斜面前端培养基与后端培养基断开，间隔为0.8
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1.2cm，将取自平板的待接种的母种接于间隔处并于菌丝萌发至接触后端培养基后去除接种块，用酒精灯火焰轻烤间隔处3秒，有效阻断了细菌污染，减少了后续纯化次数。本专利技术所涉及的方法通过断斜面二次接种的方式，最终达到降低杂菌污染度，减少后续纯化次数的目的。
[0037]以上对本专利技术的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本专利技术并不本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种通过断斜面法纯化食用菌菌种的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，组织分离：选择新鲜的、无病虫害的食用菌子实体，在无菌环境下，表面消毒后，取其内部组织按正常程序进行组织分离；步骤2，菌丝培养：将组织块接种于含有链霉素的PDA平板培养基上，恒温培养；步骤3，转管纯化：在无菌条件下，用接种针将试管斜面前端培养基与后端培养基断开，待步骤2菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：武冬梅，高能，崔宝凯，孙一翡，朱宗财，张国丽，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：