一种新型共价三嗪骨架光催化剂可视化检测氨基酸的方法技术

本发明专利技术提供了一种新型共价三嗪骨架(NBC

【技术实现步骤摘要】
一种新型共价三嗪骨架光催化剂可视化检测氨基酸的方法


[0001]本专利技术涉及化学分析领域，具体涉及一种新型共价三嗪骨架光催化剂可视化检测氨基酸的方法。

技术介绍

[0002]半胱氨酸是一种生物所必需的氨基酸，在许多生物过程中发挥着重要作用。半胱氨酸(Cys)的化学名称为2
‑
氨基
‑3‑
巯基丙酸，是一种含有巯基的极性α
‑
氨基酸，是人体生理条件所必需的氨基酸和生糖氨基酸，可由人体内的蛋氨酸经正常生理代谢转化而来，又可与胱氨酸互相转化。近几年研究发现，患心脑血管疾病的人数逐年增多，且呈上升趋势。大量临床数据表明，心脑血管疾病与半胱氨酸有着很大的关联，患心脑血管疾病的病人其体内半胱氨酸的含量普遍偏高。正常人的血清中半胱氨酸浓度约为5.0
‑
15.0μmol
·
L
‑1，一旦超过这一水平，心脑血管疾病的发生风险就会上升。蛋氨酸经人体代谢转化为半胱氨酸，当人体内半胱氨酸含量偏高时，就有产生心脑血管疾病的风险。因此，通过检测半胱氨酸的含量可达到对疾病的预防作用。
[0003]3,3,5,5
‑
四甲基联苯胺(3,3',5,5'
‑
Tetramethylbenzidine,TMB)作为一种生色底物，常用于比色检测，因此将其应用于半胱氨酸的比色检测同样可行，并且其抗干扰性强，对于其他常见干扰物质共存的情况，基本不会影响半胱氨酸的准确检测，使其检测效果非常理想。常见的测定氨基酸的方法有液相法，氨基酸分析仪法及紫外分光光度法等，紫外分光光度计法一般用于测氨基酸总量，目前常用的液相法，氨基酸分析仪法可以检测单个组分，但分析总量不如紫外法方便。紫外分光光度法因灵敏度高，反应迅速，操作简单等优势而被广泛用于游离氨基酸总量的测定，尽管半胱氨酸的检测技术已经十分成熟，但现有技术中检测半胱氨酸的常用方法需要双氧水存在条件下进行，而双氧水特别不稳定，对检测结果准确度有一定的影响，但本实验基于NBC
‑
CTFs的室温制备和在光催化领域的应用前景，将其创新性地应用于半胱氨酸的比色检测的方法的研究目前还未见报道，配合紫外分光光度计仪器价格便宜，操作简便，时间快。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供一种新型共价三嗪骨架(NBC
‑
CTFs)光催化剂可视化检测氨基酸的方法，通过NBC
‑
CTFs光催化氧化TMB，得到一种ox
‑
TMB蓝色透明溶液，基于ox
‑
TMB独特的光学性能，可用于比色分析，以此来检测半胱氨酸含量，游离半胱氨酸在强酸性条件下与ox
‑
TMB蓝色透明显色剂标准溶液发生显色反应，溶液由蓝色变为无色，通过测定氧化TMB(ox
‑
TMB)的紫外
‑
可见吸光谱可以精确计算出半胱氨酸的浓度。该方法具有操作简单，响应速度快，选择性好，灵敏度高等优点，可快速，准确的用于合成样品中半胱氨酸浓度的定量测定。
[0005]本专利技术提出一种新型共价三嗪骨架光催化剂可视化检测氨基酸的方法，将TMB和新型共价三嗪骨架材料混合，再加入待测半胱氨酸溶液，通过用紫外分光光度计定量测定
ox
‑
TMB紫外吸收强度的变化，依据线性回归方程计算出Cys的含量，所述新型共价三嗪骨架材料包括NBC
‑
CTFs，STB
‑
CTFs，DTB
‑
CTFs，DTT
‑
CTFs，DTN
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CTFs，DDT
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CTFs，TPT
‑
CTFs，DYT
‑
CTFs，DYB
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CTFs，DLT
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CTFs，TPY
‑
CTFs，BTP
‑
CTFs，BTM
‑
CTFs，TPB
‑
CTFs，TPD
‑
CTFs，TPC
‑
CTFs，TTP
‑
CTFs，TYP
‑
CTFs，TPH
‑
CTFs，TPM
‑
CTFs，TTA
‑
CTFs，TTE
‑
CTFs，TTB
‑
CTFs，TTT
‑
CTFs，TPS
‑
CTFs。
[0006]作为优选，所述线性回归方程是吸光度变化量[(A0‑
A)/A0]与Cys浓度的线性曲线y＝0.01368x
‑
0.02332(R2＝0.9991)。
[0007]作为优选，所述检测方法包括以下步骤：
[0008]S1、制备NBC
‑
CTFs：将NBC溶于二氯甲烷，待其溶解后，冰水浴下加入三氟甲磺酸，冷却至0℃，Ar气氛下搅拌后在0℃下搅拌，再置于常温反应；在所得溶液中加入NH3·
H2O溶液，使反应混合物pH＝7.0～9.8，随后将混合物再次搅拌后滤出的固体在布氏漏斗中依次用过量的水、丙酮、四氢呋喃和二氯甲烷洗涤；并真空干燥得到黄色粉末状的NBC
‑
CTFs，结构如式1所示：
[0009][0010]S2、制备ox
‑
TMB检测液：将TMB和NBC
‑
CTFs混合充分，缓慢加入0.1M，pH为1.87的磷酸缓冲液，使其混合充分；将上述溶液进行蓝光光照后，过滤后得到ox
‑
TMB检测液；将所得检测液稀释配制成1mmol/L的ox
‑
TMB检测液；
[0011]S3、吸光度测定待测样品中半胱氨酸浓度：将S2所得ox
‑
TMB检测液稀释为1.0
×
10
‑9mo1/L，质量分数为1
‑
3％，pH＝1.87的ox
‑
TMB蓝色透明显色剂标准溶液，与含有半胱氨酸的待测样品混合，在室温用去离子水作为空白溶液进行基线校正，震荡几次后测定其紫外吸收光谱，记录652nm处的最大吸光度，记录吸光度差值ΔA，依据线性回归方程计算待测半胱氨酸的浓度。
[0012]作为优选，所述S1步骤中NBC为2.7mol，二氯甲烷为30mL，三氟甲磺酸为3mL。
[0013]作为优选，所述S1步骤中Ar气氛下搅拌时间为20min，在0℃下搅拌20min，常温反应时间为2h；混合物再次搅拌时间为30min。
[0014]作为优选，所述S1步骤中真空干燥温度为80℃，干燥时间为1h。
[0015]作为优选，所述S2步骤中TMB与NBC
‑
CTFs的摩尔比为5～20:1～4。
[0016]本专利技术的检测原理如下：
[0017]NBC是一种氰基功能化的三苯胺单本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新型共价三嗪骨架光催化剂可视化检测氨基酸的方法，其特征在于，将TMB和新型共价三嗪骨架材料混合，再加入待测半胱氨酸溶液，通过用紫外分光光度计定量测定ox
‑
TMB紫外吸收强度的变化，依据线性回归方程计算出Cys的含量，所述新型共价三嗪骨架材料包括BC
‑
CTFs，STB
‑
CTFs，DTB
‑
CTFs，DTT
‑
CTFs，DTN
‑
CTFs，DDT
‑
CTFs，TPT
‑
CTFs，DYT
‑
CTFs，DYB
‑
CTFs，DLT
‑
CTFs，TPY
‑
CTFs，BTP
‑
CTFs，BTM
‑
CTFs，TPB
‑
CTFs，TPD
‑
CTFs，TPC
‑
CTFs，TTP
‑
CTFs，TYP
‑
CTFs，TPH
‑
CTFs，TPM
‑
CTFs，TTA
‑
CTFs，TTE
‑
CTFs，TTB
‑
CTFs，TTT
‑
CTFs，TPS
‑
CTFs。2.根据权利要求1所述的一种新型共价三嗪骨架光催化剂可视化检测氨基酸的方法，其特征在于，所述线性回归方程是吸光度变化量[(A0‑
A)/A0]与Cys浓度的线性曲线y＝0.01368x
‑
0.02332(R2＝0.9991)。3.根据权利要求1所述的一种新型共价三嗪骨架光催化剂可视化检测氨基酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备NBC...

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟杰，李舒婷，阳海，杨晨曦，樊思思，
申请(专利权)人：湖南工程学院，
类型：发明
国别省市：