【技术实现步骤摘要】
一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条及其制备方法
[0001]本专利技术涉及生物检测
，尤其涉及一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条及其制备方法。
技术介绍
[0002]猫瘟也称为猫泛白细胞减少症病毒，这是一种对猫咪伤害极大的传染病，未成年幼猫群体抵抗能力比较差更容易感染上猫瘟。患上猫瘟的猫咪可能会伴随着发高烧，精神萎靡，不吃东西，呕吐等症状，同时还可能出现口腔溃疡、黄疸等。
[0003]猫疱疹病毒感染也称为病毒性鼻支气管炎，广泛存在于全世界，并且只有一种血清型被确认，但其毒力在各病毒株之间各有不同。猫的疱疹病毒会在结膜及上呼道上皮细胞内复制增殖，也会在神经元细胞内复制增殖，神经原的感染会导致终身潜伏感染。
[0004]慢性潜伏感染是猫疱疹病毒急性感染后的典型结果，并且间歇性地再活化，使得排放病毒于口鼻分泌物及结膜分泌物。除非是猫舍饲养的状况下，否则环境的污染并非是传染的主要来源，传染的主要来源是急性感染期的猫咪及慢性潜伏感染并且再活化排毒的猫咪。经胎盘感染的可能性尚未确认，但慢性潜伏感染的母猫在分娩及泌乳时候都算是一种紧迫状态，所以会导致病毒再活化且开始排放病毒，因此幼猫可能在非常早期就接触到病毒。但其感染的结果需视母亲移行抗体的量而定，当有足够的移行抗体时，幼猫会被移行抗体所保护，因此会形成无症状感染而形成潜伏感染状态，如果移行抗体不足时，就可能会产生临床症状。
[0005]猫杯状病毒感染也称为猫传染性鼻
‑>结膜炎，是由猫杯状病毒引起猫的一种多发性口腔和呼吸道传染病。猫杯病毒是一种高度传染性的病毒，会导致猫的轻度至重度呼吸道感染和口腔疾病。它在收容所和繁殖地特别常见，经常感染小猫。大多数猫在感染了杯状病毒后能完全康复，但罕见的病毒株尤其致命，这种病毒对人类没有威胁。
技术实现思路
[0006]本专利技术的目的在于提供一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条及其制备方法。
[0007]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条，所述试纸条包括PVC底板，所述PVC底板上从左到右依次搭接样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述结合垫上包被有微球标记的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体1、猫疱疹病毒单克隆抗体1、猫杯状病毒单克隆抗体1、鸡IgY的复合物，所述硝酸纤维素膜上按层析方向依次包括检测线T1、检测线T2、检测线T3和质控线C线，所述检测线T1包被有猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体2，所述检测线T2包被有猫疱疹病毒单克隆抗体2，所述检测线T3包被有猫杯状病毒单克隆抗体2，所述质控线C线包被有羊抗鸡IgY。
[0009]优选的，所述复合物中微球标记的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体1、猫疱疹病毒单克隆抗体1、猫杯状病毒单克隆抗体1和鸡IgY的质量比为2～4:2～4:2～4:1～2。
[0010]优选的，所述猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体1、猫疱疹病毒单克隆抗体1、猫杯状病毒单克隆抗体1的浓度独立为160～210μg/mL，所述鸡IgY的浓度为50～70μg/mL。
[0011]优选的，所述检测线T1包被的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体2的浓度为0.8～1.2mg/mL，包被量为0.8～1.2μL/cm；
[0012]所述检测线T2包被的猫疱疹病毒单克隆抗体2的浓度为0.8～1.2mg/mL，包被量为0.8～1.2μL/cm；
[0013]所述检测线T3包被的猫杯状病毒单克隆抗体2的浓度为0.8～1.2mg/mL，包被量为0.8～1.2μL/cm；
[0014]所述质控线C线包被的羊抗鸡IgY的浓度为0.9～1.3mg/mL，包被量为0.8～1.2μL/cm。
[0015]优选的，所述结合垫上微球的标记浓度为0.3～0.6mg/mL，所述微球包括荧光微球或彩色乳胶微球，所述荧光微球包括无机/有机荧光微球、无机/无机荧光微球或有机/有机荧光微球，所述彩色乳胶微球包括聚苯乙烯或共聚苯乙烯。
[0016]优选的，所述样品垫一端压住结合垫一端的覆盖长度为1～1.2mm，结合垫另一端压住硝酸纤维素膜一端的覆盖长度为0.8～1mm，吸水纸的一端压住硝酸纤维素膜另一端的覆盖长度为1～1.5mm。
[0017]本专利技术还提供了上述一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条的制备方法，包括如下步骤：
[0018]S1、结合垫的制备：配置处理液：含0.1～0.3％BSA、0.05～0.1％Tween
‑
20、0.01～0.05％防腐剂、2～5％蔗糖、pH为8的Tris
‑
HCl缓冲液，将所述处理液涂布于结合垫上，处理后在结合垫上包被微球标记的猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒、猫杯状病毒单克隆抗体1及鸡IgY，随后在37～40℃、＜30％RH的环境下烘干12～24h即得所述结合垫；
[0019]S2、硝酸纤维素膜的制备：在硝酸纤维素膜上分别包被有猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体2作为T1检测线、猫疱疹病毒单克隆抗体2作为T2检测线、猫杯状病毒单克隆抗体2作为T3检测线以及羊抗鸡IgY作为质控线C线，随后在37～40℃、＜30％RH的环境下烘干12～24h即得所述硝酸纤维素膜；
[0020]S3、样品垫的制备：配制处理液：含0.8～1％PVP、0.05～0.1％Tween
‑
20、0.01～0.05％防腐剂、2～5％蔗糖、pH为8的Tris
‑
HCl缓冲液，将所述处理液涂布于玻璃纤维上，随后在37～40℃、＜30％RH的环境下烘干12～24h即得所述样品垫；
[0021]S4、试纸条的制备：在PVC底板上从左到右依次搭接步骤S3中的样品垫、步骤S1中的结合垫、步骤S2中的硝酸纤维素膜和吸水纸，裁切成所需宽度即得猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条。
[0022]本专利技术还提供了上述猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条在猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原检测中的应用。
[0023]本专利技术还提供了一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试剂盒，所述试剂盒包括上述猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条。
[0024]优选的，所述试剂盒还包括取样拭子和样品稀释液。
[0025]与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：
[0026]1、本专利技术可同时检测猫泛白细胞减少症病毒抗原、猫疱疹病毒抗原和猫杯状病毒抗原，操作简单，检测更加全面，可应用在宠物医院、家庭等场所，可有效控制病毒传播。
[0027]2、本专利技术应用荧光微球或彩色乳胶微球作为标记物，可对常见的致猫患病的三种病毒进行定性或者定量分析，从而本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条，其特征在于，所述试纸条包括PVC底板，所述PVC底板上从左到右依次搭接样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述结合垫上包被有微球标记的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体1、猫疱疹病毒单克隆抗体1、猫杯状病毒单克隆抗体1、鸡IgY的复合物，所述硝酸纤维素膜上按层析方向依次包括检测线T1、检测线T2、检测线T3和质控线C线，所述检测线T1包被有猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体2，所述检测线T2包被有猫疱疹病毒单克隆抗体2，所述检测线T3包被有猫杯状病毒单克隆抗体2，所述质控线C线包被有羊抗鸡IgY。2.根据权利要求1所述的一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条，其特征在于，所述复合物中微球标记的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体1、猫疱疹病毒单克隆抗体1、猫杯状病毒单克隆抗体1和鸡IgY的质量比为2～4:2～4:2～4:1～2。3.根据权利要求1所述的一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条，其特征在于，所述猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体1、猫疱疹病毒单克隆抗体1、猫杯状病毒单克隆抗体1的浓度独立为160～210μg/mL，所述鸡IgY的浓度为50～70μg/mL。4.根据权利要求1所述的一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条，其特征在于，所述检测线T1包被的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体2的浓度为0.8～1.2mg/mL，包被量为0.8～1.2μL/cm；所述检测线T2包被的猫疱疹病毒单克隆抗体2的浓度为0.8～1.2mg/mL，包被量为0.8～1.2μL/cm；所述检测线T3包被的猫杯状病毒单克隆抗体2的浓度为0.8～1.2mg/mL，包被量为0.8～1.2μL/cm；所述质控线C线包被的羊抗鸡IgY的浓度为0.9～1.3mg/mL，包被量为0.8～1.2μL/cm。5.根据权利要求1所述的一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条，其特征在于，所述结合垫上微球的标记浓度为0.3～0.6mg/mL，所述微球包括荧光微球或彩色乳胶微球，所述荧光微球包括无机/有机荧光微球、无机/无机荧光微球或有机/有机荧光微球，所述彩色乳胶微球包括聚苯乙烯或共聚苯乙烯。6.根据权利要求1所述的一种猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒和猫杯状病毒抗原三联检测试纸条，其特征在于，所述样品垫一端压住结合垫一端的覆盖长度为1～1.2mm，结合垫另一端压住硝酸纤维素膜一端的覆盖长度为0...
【专利技术属性】
技术研发人员：翟文康，张影，李智椋，
申请(专利权)人：深圳粒影生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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