组合物以及试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及体外诊断技术领域，特别涉及组合物以及试剂盒。本发明专利技术提供了检测柯萨奇病毒A10型IgM检测的磁微粒化学发光试剂盒，还提供了重组抗原EV71、CA16和CA6联用用于封闭交叉感染，提高CA10特异性检出率。其包括包被鼠抗人

【技术实现步骤摘要】
组合物以及试剂盒


[0001]本专利技术涉及体外诊断
，特别涉及组合物以及试剂盒。

技术介绍

[0002]手足口病是由多种病毒引起的丙类传染病，柯萨奇病毒A组10(Coxsackievirus A10，CVA10)是引起的手足口病的病原体之一，主要感染5岁以下的儿童，在幼儿园等儿童密集的地方常爆发。引起手足口病的病原体还包括肠道病毒71(Enterovirus 71，EV71)和柯萨奇A16(Coxsackievirus A16，CoxA16)。
[0003]CVA10属于小核糖核酸病毒科肠道病毒属的家族成员，病毒形状为正二十面立体结构的球形或者卵圆形对称结构，其病毒无包膜，直径为28nm～32nm。CVA10的基因组为单股正链的RNA病毒，全长约7.4kb，在病毒RNA编码区的两端为5
’
和3
’
的非编码区(untranslation region，UTRs)。
[0004]CVA10的临床表现与EV71和CVA16大部分相似，但是CVA10能够引起疱疹性咽峡炎(herpangina，HA)，脱甲症及致死性并发症，包括婴幼儿的神经脊髓炎伴随高碳酸血症和败血症。CVA10病毒可以引起重症的手足口病，主要临床表现为发热、斑丘疹和水疱性渗出液体，肢体抖动或中枢神经系统受累。少数患者表现为神经系统的症状甚至出现惊厥或心肺功能的并发症。
[0005]目前CVA10病毒检测主要是通过病毒的分离、血清学中和实验以及分子生物学的方法。病毒分离鉴定方法繁杂费时，血清学检测方法特异性差。PCR法灵敏度高、特异性好，但临床标本中可能含有抑制PCR扩增的物质，导致假阴性结果或定量值偏低；且PCR法需要昂贵的仪器设备，成本高。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术提供组合物以及试剂盒，本专利技术开发的重组抗原检测柯萨奇病毒A10型IgM的磁微粒化学发光试剂盒可以特异性检出CVA10病毒，对于疾病的诊断及防控具有重大意义。
[0007]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了组合物，包括柯萨奇病毒A10型重组抗原、肠道病毒71型重组抗原、柯萨奇病毒A16型重组抗原和柯萨奇病毒A6型重组抗原；
[0009]所述柯萨奇病毒A10型重组抗原包括酶标记的柯萨奇病毒A10型重组抗原；和/或
[0010]所述酶标记的柯萨奇病毒A10型重组抗原包括辣根过氧化物酶标记的柯萨奇病毒A10型重组抗原；和/或
[0011]所述柯萨奇病毒A10型重组抗原包括柯萨奇病毒A10型3CD蛋白和/或柯萨奇病毒A10型P1蛋白；和/或
[0012]所述肠道病毒71型重组抗原包括肠道病毒71型3CD蛋白和/或肠道病毒71型P1蛋白；和/或
[0013]所述柯萨奇病毒A16型重组抗原包括肠柯萨奇病毒A16型3CD蛋白和/或柯萨奇病毒A16型P1蛋白；和/或
[0014]所述柯萨奇病毒A6型重组抗原包括柯萨奇病毒A6型3CD蛋白和/或柯萨奇病毒A6型P1蛋白；
[0015]其中：
[0016]所述柯萨奇病毒A10型3CD蛋白具有：
[0017](1)、如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；或
[0018](2)、如(1)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(1)的相同或相似；或
[0019](3)、与如(1)或(2)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；
[0020]和/或
[0021]所述柯萨奇病毒A10型P1蛋白具有：
[0022](4)、如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；或
[0023](5)、如(4)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(4)的相同或相似；或
[0024](6)、与如(4)或(5)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；
[0025]和/或
[0026]所述肠道病毒71型3CD蛋白具有：
[0027](7)、如SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列；或
[0028](8)、如(7)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(7)的相同或相似；或
[0029](9)、与如(7)或(8)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；
[0030]和/或
[0031]所述肠道病毒71型P1蛋白具有：
[0032](10)、如SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列；或
[0033](11)、如(10)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(10)的相同或相似；或
[0034](12)、与如(10)或(11)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；
[0035]和/或
[0036]所述柯萨奇病毒A16型3CD蛋白具有：
[0037](13)、如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；或
[0038](14)、如(13)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(13)的相同或相似；或
[0039](15)、与如(13)或(14)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；
[0040]和/或
[0041]所述柯萨奇病毒A16型P1蛋白具有：
[0042](16)、如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列；或
[0043](17)、如(16)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(16)的相同或相似；或
[0044](18)、与如(16)或(17)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；
[0045]所述柯萨奇病毒A6型3CD蛋白具有：
[0046](19)、如SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列；或
[0047](20)、如(19)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(19)的相同或相似；或
[0048](21)、与如(19)或(20)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；
[0049]和/或
[0050]所述柯萨奇病毒A6型P1蛋白具有：
[0051](22)、如SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列；或
[0052](23)、如(22)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(22)的相同或相似；或
[0053](24)、与如(22)或(23)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；
[0054]所述多个为2个至200个。
[0055]在本专利技术的一些具体实施方案中，上述组合物中：
[0056]所述柯萨奇病毒A10型包括柯萨奇病毒A10型16...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.组合物，其特征在于，包括柯萨奇病毒A10型重组抗原、肠道病毒71型重组抗原、柯萨奇病毒A16型重组抗原和柯萨奇病毒A6型重组抗原；所述柯萨奇病毒A10型重组抗原包括酶标记的柯萨奇病毒A10型重组抗原；和/或所述酶标记的柯萨奇病毒A10型重组抗原包括辣根过氧化物酶标记的柯萨奇病毒A10型重组抗原；和/或所述柯萨奇病毒A10型重组抗原包括柯萨奇病毒A10型3CD蛋白和/或柯萨奇病毒A10型P1蛋白；和/或所述肠道病毒71型重组抗原包括肠道病毒71型3CD蛋白和/或肠道病毒71型P1蛋白；和/或所述柯萨奇病毒A16型重组抗原包括肠柯萨奇病毒A16型3CD蛋白和/或柯萨奇病毒A16型P1蛋白；和/或所述柯萨奇病毒A6型重组抗原包括柯萨奇病毒A6型3CD蛋白和/或柯萨奇病毒A6型P1蛋白；其中：所述柯萨奇病毒A10型3CD蛋白具有：(1)、如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；或(2)、如(1)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(1)的相同或相似；或(3)、与如(1)或(2)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；和/或所述柯萨奇病毒A10型P1蛋白具有：(4)、如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；或(5)、如(4)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(4)的相同或相似；或(6)、与如(4)或(5)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；和/或所述肠道病毒71型3CD蛋白具有：(7)、如SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列；或(8)、如(7)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(7)的相同或相似；或(9)、与如(7)或(8)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；和/或所述肠道病毒71型P1蛋白具有：(10)、如SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列；或(11)、如(10)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(10)的相同或相似；或(12)、与如(10)或(11)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；和/或所述柯萨奇病毒A16型3CD蛋白具有：
(13)、如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；或(14)、如(13)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(13)的相同或相似；或(15)、与如(13)或(14)所示的氨基酸序列至少有70％同源性的氨基酸序列；和/或所述柯萨奇病毒A16型P1蛋白具有：(16)、如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列；或(17)、如(16)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与(16)的相同或相似；...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓姣，李婷，刘效毅，刘光辉，苏测洋，赵巧辉，李桂林，付光字，杨增利，吴学炜，
申请(专利权)人：郑州伊美诺生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：