【技术实现步骤摘要】
一种基于受体检测胶原蛋白整合素功能域的试剂盒及其制备与应用
[0001]本专利技术属于生物技术检测领域,具体涉及一种基于受体检测胶原蛋白整合素功能域的试剂盒及其制备与应用
。
技术介绍
[0002]近年来,随着人们对胶原蛋白结构和功能等研究的不断深入,基于胶原蛋白产品在世界范围内的需求快速增长
。
胶原蛋白在食品
、
保健食品及化妆品等领域的应用已十分广泛
。
胶原蛋白在医疗领域的应用,如敷料
、
植入材料以及组织工程医疗产品等也日益增长
。
胶原蛋白是结缔组织的主要蛋白成分,是与机体的细胞
、
组织和器官功能息息相关的功能性蛋白,具有良好的生物相容性和生物可降解性,同时具有如高拉伸强度
、
低免疫性
、
止血性能以及促进细胞生长等性能
。
[0003]重组胶原蛋白是指由
DNA
重组技术制备的,含有人胶原蛋白特定类型基因编码的全长或部分基因序列的重组蛋白,或是含有人特定类型或不同类型胶原蛋白基因编码的部分序列,经基因编辑
、
组合
、
拼装
、
剪辑等制备的人胶原蛋白类似物,或是含有人特定或不同类型胶原蛋白部分基因编码及人工设计的基因编码,经基因编辑
、
组合
、
拼装等制备的胶原蛋白类似物,具有胶原蛋白或与胶原蛋白相似的理化性质和生物学功能
。
胶原蛋白
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种胶原蛋白功能域检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含试纸条,所述试纸条包含标记整合素和整合素抗体
。2.
根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述标记整合素为金标整合素或彩色微球标记整合素或荧光微球标记整合素;所述整合素抗体为整合素
β1多克隆抗体
。3.
根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试纸条包括底板,所述底板上从左到右依次搭接样品垫
、
金垫
、
硝酸纤维素膜
(NC
膜
)
和吸水纸,所述金垫上固定有标记整合素,所述
NC
膜上按层析方向依次包括检测线
(T
线
)
和质控线
(C
线
)
,所述
T
线包被有含整合素结合域的胶原蛋白,所述
C
线包被有整合素
β1多克隆抗体
。4.
根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述标记整合素为金标整合素,所述试剂盒的制备包括如下步骤:
S1、
胶体金的制备:去离子水和氯金酸溶液混合
、
搅拌煮沸,然后移取柠檬酸钠溶液快速加入烧瓶中,继续搅拌至溶液恢复到室温,然后将胶体金溶液用去离子水定容,备用;
S2、
金标整合素的制备:加入上述胶体金溶液搅拌,移取
K2CO3溶液逐滴加入至胶体金溶液内搅拌,再向溶液中加入整合素,加入
BSA
溶液搅拌封闭,离心,然后吸去上清,用复溶液将沉淀复溶即得,所述的复溶液含蔗糖
、BSA、Tween
‑
20、
防腐剂的
Tris
‑
HCl
缓冲液;
S3、
金垫的制备:用含
BSA、Tween
‑
20、
防腐剂
、
蔗糖的
Tris
‑
HCl
缓冲液涂布于玻璃纤维上烘干,然后将标记整合素喷涂在经处理的玻璃纤维上烘烤;
S4、
硝酸纤维素膜的制备:用含
BSA
的
PBS
缓冲液作为包被缓冲液,将含整合素结合域的重组胶原蛋白包被在
NC
膜上作为
T
线,将整合素
β1多克隆抗体用包被缓冲液稀释包被在
NC
膜上作为
C
线,烘干即得;
S5、
样品垫的制备:用含
PVP、Tween
‑
20、
防腐剂
、
蔗糖的
Tris
‑
HCl
缓冲液涂布于玻璃纤维上,烘干即得所述样品垫;
S6、
试纸条的制备:在
PVC
底板上从左到右依次搭接步骤
S5
中的样品垫
、
步骤
S3
中的金垫
、
步骤
S4
中的硝酸纤维素膜和吸水纸,裁切成所需宽度即得所述试纸条;
S7、
试剂盒的制备:在湿度<
30
%
RH
环境中将所述试纸条装入卡内槽中,配套有瓶装样品稀释液及说明书
。5.
根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,步骤
S1
中所述胶体金为万分之四胶体金
、
粒径大小为
40nm
,所述氯金酸溶液的质量百分比为
10
%
、
柠檬酸钠溶液的质量百分比为
10
%,制备
100mL
所述胶体金所用氯金酸溶液和柠檬酸钠溶液分别为
1.2mL
和
3.84mL。6.
根...
【专利技术属性】
技术研发人员:李智椋,葛建敬,张影,
申请(专利权)人:深圳粒影生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。