一种具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳及其制备方法与应用，属于医药技术领域。本发明专利技术以夏枯草籽油、乳化剂、增溶剂、或调味剂、或等渗调节剂、或香精、或防腐剂、或抗氧剂、或pH值调节剂和水一起制成一种具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳；本发明专利技术还首次公开了一种夏枯草籽油中富含以熊果酸为代表的三萜类及以迷迭香酸为代表的苯丙素类成分，并通过其纳米乳的制备增强其夏枯草籽油的抗肿瘤作用。本发明专利技术所提供的方法工艺流程简单，操作方便，适合于工业生产；产品的质量稳定，质量控制方便，可用于药物和食品。可用于药物和食品。可用于药物和食品。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于医药
，特别涉及一种具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]夏枯草为唇形科(Lamiaceae)植物夏枯草Prunella vulgaris L.的干燥果穗，始载于《神农本草经》，因“此草夏至后即枯”而得名，是一种药食同源的多年生草本植物，至今已有几千年的药用历史，现收载于2015年版之《中国药典》。夏枯草味苦、辛，性寒，归肝、胆经，可清肝散火、明目、散结消肿，对目赤肿痛、畏光流泪、目珠夜痛、头晕目眩、瘰疬、瘿瘤、乳腺癌、高血压、淋巴结核、浸润性肺结核、单纯性甲状腺肿、腮腺炎、急性黄疸型传染性肝炎等多种疾病均有良好的临床治疗效果。现代研究表明，夏枯草中含有多种化学成分：包括三萜、甾醇、黄酮、有机酸、香豆素等类型化合物，具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、免疫调节、降血压、降血糖、降血脂等药理作用。夏枯草籽为唇形科(Lamiaceae)植物夏枯草Prunella vulgaris L.的干燥成熟种子，为夏枯草的生殖种子，应具有夏枯草的遗传活性物质与作用，但其在食用、保健或药物中的应用价值还未受到重视，还未见到其相关报导，特别是夏枯草籽油的研究与应用更是空白。
[0003]熊果酸是一种五环三萜类化合物，以游离体和配糖体的形式存在于许多植物中，熊果酸(Ursolic acid)又名乌索酸、乌苏酸，存在于山茱萸、夏枯草、山楂等植物中，为该中药的有效成份之一。熊果酸具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应。近年来研究人员发现熊果酸具有抗致癌、抗促癌、诱导F9畸胎瘤细胞分化和抗血管生成作用，对肾癌、黑色素瘤、结肠癌、卵巢癌、中枢神经系统癌、非小细胞肺癌、表皮样瘤、肝癌、卵巢癌、急性早幼粒细胞白血病及畸胎瘤等癌细胞有一定的细胞毒效应。迷迭香酸(rosmarinic acid，RA)是一种多酚酸，化学名为:R(+)2
‑
[3
‑
(3，4
‑
二羟基苯基)
‑1‑
氧代
‑2‑
丙烯基]氧基
‑
3，4
‑
二羟基苯丙酸，广泛分布于唇形科、紫草科、葫芦科等植物中，是夏枯草的主要有效成分之一；现代药理研究表明：迷迭香酸具有抗氧化、抗菌抗炎、抗肿瘤、抗抑郁和抗焦虑、改善肾脏疾病、保肝等多方面药理学活性。其作用及作用机理主要为：
⑴
抗氧化作用：迷迭香酸具有较强的抗氧化和清除体内自由基的作用，该作用与其邻二酚羟基的结构有关；
⑵
抗菌抗炎作用：迷迭香酸对金黄色葡萄球菌、藤黄细球菌、大肠杆菌、枯草杆菌等细菌均有明显的抑制作用，对牛皮癣、皮肤炎、呼吸道炎症、急性肺损伤等多种炎症均有一定的抑制作用；
⑶
抗肿瘤作用：迷迭香酸对结直肠癌、乳腺癌、宫颈癌、白血病、肺癌、肝癌等多种肿瘤有明显的抑制作用，其抗肿瘤机制可能与提高机体免疫功能和有效地抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭并诱导凋亡有关；
⑷
抗抑郁和抗焦虑作用：迷迭香酸的抗抑郁作用，体外实验发现迷迭香酸可促进新生大鼠星形胶质细胞的增殖，体内实验发现迷迭香酸可改善慢性不可预见应激抑郁模型大鼠的抑郁样行为，低剂量的迷迭香酸能够发挥抗焦虑作用；
⑸
保肝作用：迷迭香酸能够抑制肝星状细胞HSCs的增殖分化，通过抑制TGF
‑
β1和CTGF的表达对
抗四氯化碳诱导的抗纤维化；
⑹
改善肾脏疾病作用：迷迭香酸有改善肾脏相关疾病的作用，主要表现为减少尿酸生成，抑制肾小球肾炎以及延缓慢性肾功能不全。熊果酸、迷迭香酸都是夏枯草中药中的重要活性成分，但对夏枯草的生殖种子
‑‑
夏枯草籽却未见其成分的相关报道与开发研究。

技术实现思路

[0004]本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳。该纳米乳包括富含以熊果酸为代表的三萜类及以迷迭香酸为代表的苯丙素类成分的夏枯草籽油，且具有生物利用度高，使用安全、方便的能显著增夏枯草籽油抗肿瘤作用的特点。
[0005]本专利技术的另一目的在于提供通过上述具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳的制备方法。
[0006]本专利技术的再一目的在于提供上述具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳的应用。
[0007]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳，包括如下成分：夏枯草籽油、乳化剂、增溶剂和水；调味剂、等渗调节剂、香精、防腐剂、抗氧剂和pH值调节剂中的至少一种为选择性添加；优选由如下按质量百分比计的成分组成：夏枯草籽油5～30％、乳化剂3～25％、增溶剂1～12％、等渗调节剂0～适量、调味剂0～适量、香精0～适量、防腐剂0～适量、抗氧剂0～适量、pH值调节剂0～适量，余量为水；pH为6.5～7.5。
[0008]所述的夏枯草籽油优选通过如下步骤制备得到：
[0009]1)夏枯草籽的收集：采摘完全成熟的干燥的夏枯草果穗，将干燥的夏枯草果穗中的夏枯草种子抖落，收集并获得夏枯草籽粗品；
[0010]2)夏枯草籽的净选：将夏枯草籽粗品中的杂质去除，得到纯净的夏枯草籽；
[0011]3)夏枯草籽的破壁：将步骤2)得到的纯净的夏枯草籽置于粉碎破壁机中进行破壁，得到破壁后的夏枯草籽粉；其中粉碎破壁机筛网的孔径小于或等于40目，粉碎破壁机在15℃以下的环境工作；
[0012]4)与夹带剂混匀：
[0013]①
加夹带剂混合：将破壁后的夏枯草籽粉和极性夹带剂混合均匀；
[0014]②
装填：将步骤
①
得到的混匀的含极性夹带剂的粉末均匀地填充于超临界CO2萃取釜中；
[0015]5)超临界萃取：
[0016]①
静态浸泡萃取：将步骤4)得到的夏枯草籽粉颗粒置于超临界CO2萃取釜升温至30
‑
60℃的温度，通以CO2超临界流体升压至10
‑
25MPa的压力，停泵，静态浸泡提取20
‑
60min；
[0017]②
动态萃取：静态浸泡提取后，当分离器的温度及压力达到设定值时开始动态萃取并计时，萃取时间为100
‑
180min；
[0018]③
分离：采用二级分离，分离的工艺条件是：一级解析器压力为9～13MPa，分离温度37～43℃；二级解析器压力为4～6Mpa，分离温度27～33℃；获得黄绿色的夏枯草籽油；
[0019]6)过滤除杂：取步骤5)得到的夏枯草籽油，置于孔径等于或小350目的过滤装置中
减压抽滤，弃去不能滤过的杂质，得清澈的夏枯草籽油。
[0020]步骤2)中所述的净选的具体步骤优选如下：
[0021]A、将收集的夏枯草籽粗品置于15～20目的筛网中，让粒径小于筛网网孔的夏枯草籽通过，除去粒径大于筛网本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳，其特征在于由如下按质量百分比计的成分组成：夏枯草籽油5～30％、乳化剂3～25％、增溶剂1～12％、等渗调节剂0～适量、调味剂0～适量、香精0～适量、防腐剂0～适量、抗氧剂0～适量、pH值调节剂0～适量，余量为水；pH为6.5～7.5。2.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳，其特征在于：所述的夏枯草籽油通过如下步骤制备得到：1)夏枯草籽的收集：采摘完全成熟的干燥的夏枯草果穗，将干燥的夏枯草果穗中的夏枯草种子抖落，收集并获得夏枯草籽粗品；2)夏枯草籽的净选：将夏枯草籽粗品中的杂质去除，得到纯净的夏枯草籽；3)夏枯草籽的破壁：将步骤2)得到的纯净的夏枯草籽置于粉碎破壁机中进行破壁，得到破壁后的夏枯草籽粉；其中粉碎破壁机筛网的孔径小于或等于40目，粉碎破壁机在15℃以下的环境工作；4)与夹带剂混匀：
①
加夹带剂混合：将破壁后的夏枯草籽粉和极性夹带剂混合均匀；
②
装填：将步骤
①
得到的混匀的含极性夹带剂的粉末均匀地填充于超临界CO2萃取釜中；5)超临界萃取：
①
静态浸泡萃取：将步骤4)得到的夏枯草籽粉颗粒置于超临界CO2萃取釜升温至30
‑
60℃的温度，通以CO2超临界流体升压至10
‑
25MPa的压力，停泵，静态浸泡提取20
‑
60min；
②
动态萃取：静态浸泡提取后，当分离器的温度及压力达到设定值时开始动态萃取并计时，萃取时间为100
‑
180min；
③
分离：采用二级分离，分离的工艺条件是：一级解析器压力为9～13MPa，分离温度37～43℃；二级解析器压力为4～6Mpa，分离温度27～33℃；获得黄绿色的夏枯草籽油；6)过滤除杂：取步骤5)得到的夏枯草籽油，置于孔径等于或小350目的过滤装置中减压抽滤，弃去不能滤过的杂质，得清澈的夏枯草籽油。3.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳，其特征在于：步骤4)中所述的极性夹带剂为甲醇、乙醇、乙醇水溶液和丙酮中的至少一种；步骤4)中所述的极性夹带剂的用量按夏枯草籽粉：极性夹带剂＝1kg：300
‑
1500mL计算；步骤5)中所述的静态浸泡萃取的条件为：温度为43
‑
50℃，压力为18
‑
20MPa，静态浸泡提取的时间为30
‑
50min；步骤5)中所述的动态萃取的萃取时间为120
‑
150min；步骤5)中所述的分离的工艺条件为：一级解析器压力为9～11MPa，分离温度37～42℃；二级解析器压力为4～5Mpa，分离温度27～32℃。4.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳，其特征在于：所述的乳化剂为大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、液态卵磷脂和脑磷脂中的至少一种；所述的增溶剂为甘油和聚乙二醇400中的至少一种；所述的等渗调节剂为注射用甘油；所述的调味剂为甜菊糖苷、阿斯巴甜、葡萄糖和果糖中的至少一种；
所述的香精为薄荷香精、柠檬香精、玫瑰香精、牛奶香精和薄荷香精中的至少一种；所述的防腐剂为山梨酸钾；所述的抗氧剂为维生素E和维生素C中的至少一种；所述的pH值调节剂为NaOH、Na2CO3、NaHCO3中的至少一种；所述的水为蒸馏水、纯化水和注射用水中的至少一种。5.根据权利要求1～4中任一项所述的具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳，其特征在于：所述具有抗肿瘤作用的夏枯草籽油纳米乳为注射用纳米乳剂型，由如下按质量百分比计的成分组成：夏枯草籽油5～15％、乳化剂3～12％、增溶剂1～8％、等渗调节剂0.2～2.8％、抗氧剂0.01～0....

【专利技术属性】
技术研发人员：陈斌，李颖，陈火林，陈娇，程昌奎，
申请(专利权)人：江西鑫康健科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：