3D打印培养细胞获取的外泌体在制备改善机体免疫力的产品中的应用制造技术

本申请公开了3D打印培养细胞获取的外泌体在制备改善机体免疫力的产品中的应用。本申请的第一方面提供3D打印培养细胞获取的外泌体在制备以下产品中的应用：治疗糖尿病的产品；降低血糖的产品；增强胰岛β细胞分泌功能的产品；增强免疫器官免疫功能的产品；增强体液免疫和/或细胞免疫的产品；外泌体由含细胞的微丝经培养获得，包括内芯，所述内芯的原料包括含有细胞的悬液；壳层，所述壳层包覆于所述内芯，壳层的原料包括高分子材料。申请人在实验过程中发现，相较于现有的2D培养的外泌体，采用特定的3D培养得到的外泌体富含丰富的特异性组分，如多种蛋白质，其具有显著的调节免疫系统，改善机体体质功能。改善机体体质功能。改善机体体质功能。

【技术实现步骤摘要】
3D打印培养细胞获取的外泌体在制备改善机体免疫力的产品中的应用


[0001]本申请涉及外泌体
，尤其是涉及3D打印培养细胞获取的外泌体在制备改善机体免疫力的产品中的应用。

技术介绍

[0002]免疫系统是生物体体内复杂的生物学结构所组成的疾病防御系统，同时也包含这些生物学结构所参与的一系列生物学过程，典型的免疫系统由免疫器官(包括脾脏、骨髓、胸腺、淋巴结、扁桃体等)、免疫细胞(包括淋巴细胞、吞噬细胞等)以及免疫分子(淋巴因子、免疫球蛋白、溶菌酶等)等组分组成。当免疫系统中的一个或多个组分失去活性就会造成免疫力低下或免疫缺陷。人体体质跟自身免疫力有关，免疫力低的人群体内稳态容易受外部环境影响，例如表现为易感冒、易疲劳等等。现有提高抵抗力用的多以化学合成药物为主，治疗效果有限。
[0003]外泌体(Exosome)是细胞分泌的纳米级囊泡，其由胞内内陷形成的多囊泡体与细胞膜结合并释放到胞外形成，其中含有多种不同的生物活性分子，包括蛋白质、脂质、RNA、DNA等。外泌体介导细胞间的信息交流，并在多种疾病的发生发展中起到关键作用。间充质干细胞外泌体(MSCs
‑
Exo)是外泌体中研究最广的一类，其能够通过抑制淋巴细胞的增殖，诱导淋巴细胞向抗炎型分化从而发挥免疫调节作用。此外，也有研究指出，MSCs
‑
EXO能够发挥局部抗炎作用，修复受损组织。然而，现有的外泌体在发挥改善机体免疫力作用方面效果有限，因此，有必要提供一种具有更高增强机体免疫力作用的产品。

技术实现思路
/>[0004]本申请旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本申请提出一种3D打印培养细胞获取的外泌体在制备改善机体免疫力的产品中的应用。
[0005]本申请的第一方面，提供3D打印培养细胞获取的外泌体在制备以下A1)～A5)中任一种产品中的应用：
[0006]A1)治疗糖尿病的产品；
[0007]A2)降低血糖的产品；
[0008]A3)增强胰岛β细胞分泌功能的产品；
[0009]A4)增强免疫器官免疫功能的产品；
[0010]A5)增强体液免疫和/或细胞免疫的产品；
[0011]其中，所述外泌体由3D打印得到的含细胞的微丝经培养获取，所述微丝包括以下B1)和B2)：
[0012]B1)内芯，所述内芯的原料包括含有细胞的悬液；
[0013]B2)壳层，所述壳层包覆于所述内芯，所述壳层的原料包括高分子材料。
[0014]根据本申请实施例的应用，至少具有如下有益效果：
[0015]申请人在实验过程中发现，相较于现有的2D培养的外泌体，采用特定的3D培养得到的外泌体富含丰富的特异性组分，如多种蛋白质，其具有显著的调节免疫系统，改善机体体质功能。
[0016]此外，还发现这类外泌体在改善糖尿病患者的血糖水平、促进胰岛细胞分泌胰岛素等方面具有显著的提升，因而可以应用到糖尿病的治疗中。
[0017]在本申请的一些实施方式中，所述降低血糖为降低糖尿病患者的血糖。
[0018]在本申请的一些实施方式中，所述增强胰岛β细胞分泌功能为增强糖尿病患者的胰岛β细胞分泌功能。
[0019]在本申请的一些实施方式中，所述增强免疫器官免疫功能为增强糖尿病患者的免疫器官免疫功能。
[0020]在本申请的一些实施方式中，所述增强体液免疫和/或细胞免疫为增强糖尿病患者的体液免疫和/或细胞免疫。
[0021]在本申请的一些实施方式中，糖尿病为2型糖尿病。
[0022]在本申请的一些实施方式中，免疫器官包括外周免疫器官和中枢免疫器官。
[0023]在本申请的一些实施方式中，外周免疫器官包括淋巴结、脾和黏膜伴随淋巴组织中的至少一种。
[0024]在本申请的一些实施方式中，中枢免疫器官包括骨髓和胸腺中的至少一种。
[0025]在本申请的一些实施方式中，增强体液免疫包括增强IgA、IgM、IgG中至少一种的表达。
[0026]在本申请的一些实施方式中，悬液的细胞密度为1
×
106个/mL以上，2
×
106个/mL以上，3
×
106个/mL以上，5
×
106个/mL以上，8
×
106个/mL以上，1
×
107个/mL以上，2
×
107个/mL以上，3
×
107个/mL以上。
[0027]在本申请的一些实施方式中，悬液的细胞密度为1
×
106个/mL～1
×
109个/mL，2
×
106个/mL～1
×
109个/mL，3
×
106个/mL～1
×
109个/mL，5
×
106个/mL～1
×
109个/mL，8
×
106个/mL～1
×
109个/mL，1
×
107个/mL～1
×
109个/mL，2
×
107个/mL～1
×
109个/mL，3
×
107个/mL～1
×
109个/mL。
[0028]在本申请的一些实施方式中，悬液包括细胞和缓冲液。
[0029]在本申请的一些实施方式中，缓冲液包括PBS、Tris、Tris
‑
HCl、HEPES、MOPS等其中至少一种。
[0030]在本申请的一些实施方式中，细胞为间充质干细胞。
[0031]在本申请的一些实施方式中，间充质干细胞来源于骨髓、脂肪、脐带、脐带血、子宫内膜、羊膜、胎盘、肌肉、角膜基质、牙髓、滑膜、骨骼、肺、肝、胰腺、外周血等其中至少一种。
[0032]在本申请的一些实施方式中，高分子材料包括水凝胶。
[0033]在本申请的一些实施方式中，高分子材料包括半透性水凝胶。
[0034]在本申请的一些实施方式中，水凝胶包括胞外基质或其提取物、蛋白质(如层粘连蛋白、纤维蛋白)、肽、聚合物、小分子等形成的水凝胶。
[0035]在本申请的一些实施方式中，高分子材料包括可降解的高分子材料。
[0036]在本申请的一些实施方式中，所述高分子材料为天然高分子或合成高分子。
[0037]在本申请的一些实施方式中，所述高分子材料包括聚丙烯腈、聚乙二醇、聚己内
酯、聚乳酸、聚酰亚胺、聚乙烯醇、明胶、海藻酸盐、透明质酸、壳聚糖、丝素蛋白、纤维蛋白、胶原蛋白、普朗尼克酸中的至少一种。
[0038]在本申请的一些实施方式中，高分子材料选择海藻酸盐时，壳层的原料(高分子材料溶液)中可选还包括一定含量的钙离子，用于使海藻酸盐形成凝胶。例如，壳层的原料还含有CaCl2。在其中一些实施方式中，CaCl2的浓度为0.5～5w/v％。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.3D打印培养细胞获取的外泌体在制备以下A1)～A5)中任一种产品中的应用：A1)治疗糖尿病的产品；A2)降低血糖的产品；A3)增强胰岛β细胞分泌功能的产品；A4)增强免疫器官免疫功能的产品；A5)增强体液免疫和/或细胞免疫的产品；其中，所述外泌体由3D打印得到的含细胞的微丝经培养获取，所述微丝包括以下B1)和B2)：B1)内芯，所述内芯的原料包括含有细胞的悬液；B2)壳层，所述壳层包覆于所述内芯，所述壳层的原料包括高分子材料。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降低血糖为降低糖尿病患者的血糖，和/或，所述增强胰岛β细胞分泌功能为增强糖尿病患者的胰岛β细胞分泌功能，和/或，所述增强免疫器官免疫功能为增强糖尿病患者的免疫器官免疫功能，和/或，所述增强体液免疫和/或细胞免疫为增强糖尿病患者的体液免疫和/或细胞免疫；优选的，所述糖尿病为2型糖尿病。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，免疫器官包括外周免疫器官和中枢免疫器官；优选的，外周免疫器官包括淋巴结、脾和黏膜伴随淋巴组织中的至少一种；优选的，中枢免疫器官包括骨髓和胸腺中的至少一种。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，增强体液免疫包括增强IgA、IgM、IgG中至少一种的表达。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述悬液的细胞密度为1
×
106个/mL以上。6.根据权利要求1至5任一项所述的应用，其特征在于，所述高分子材料包括可降解的高分子材料；优选的，所述高分子材料为天然高分子或合成高分子；优选的，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张益，刘博勋，
申请(专利权)人：权利要求书二页说明书八页附图三页，
类型：发明
国别省市：