识别生物标志物的荧光显微镜及生物标志物识别方法技术

提供了一种用于识别生物标志物的荧光显微镜以及使用该荧光显微镜的生物标志物识别方法，该荧光显微镜能够通过荧光分析容易地识别生物标志物的类型。本公开涉及一种能够在用于分析从样品发射的荧光的荧光显微镜中识别生物标志物的荧光显微镜，其中，该荧光显微镜的检测单元设置有识别滤波器，该识别滤波器阻挡入射到检测单元的部分荧光光谱。挡入射到检测单元的部分荧光光谱。挡入射到检测单元的部分荧光光谱。

【技术实现步骤摘要】
识别生物标志物的荧光显微镜及生物标志物识别方法


[0001]本公开涉及一种用于识别生物标志物的荧光显微镜和使用该荧光显微镜的生物标志物识别方法，更具体地，涉及一种用于识别生物标志物的荧光显微镜，其能够通过荧光分析容易地识别生物标志物的类型，以及使用该荧光显微镜的生物标志物识别方法。

技术介绍

[0002]荧光显微镜是一种利用荧光进行成像的光学显微镜，并且可以检测和成像长波长光，其中当照射样品中存在的荧光材料吸收的特定波长时，荧光材料吸收的光以荧光的形式发射。
[0003]荧光显微镜检测到的发射光比使用特定波长滤波器照射的光弱得多。荧光显微镜由使用氙、汞、LED和激光的光源、激发滤波器、分色镜和发射滤波器组成。通过激发滤波器，光源发出的光仅通过可被荧光材料吸收的波长，并通过分色镜照射样品。样品中的荧光材料吸收特定波长的光，以荧光的形式发出长波长的光，并且发出的光不反射到分色镜上，而是被检测器检测到。在多色荧光显微镜的情况下，可以通过使用与每种颜色对应的激发滤波器和分色镜来对存在于样品中的荧光材料的各种颜色进行成像(参见图2)。
[0004]这种荧光显微镜用于对细胞内的细胞器、蛋白质等进行成像，并且包括共焦显微镜、全内反射荧光显微镜等。
[0005]在传统的荧光显微镜中，从通过第一光学滤波器12的白光中选择与附着在放置在衬底上的样品上的荧光体的吸收波长相匹配的单色光，选择的具有吸收波长的单色光的路径通过分色镜23调整并通过物镜22照射到样品，与样品荧光体的发射波长匹配的光从样品的荧光体通过物镜和分色镜而产生的光中选择，通过第二光学滤波器以被提供给检测单元。另一方面，检测单元由镜筒透镜、诸如CCD或CMOS的相机31、32和33构成，以观察样品的形状或样品发出的荧光(见图2)。
[0006]然而，由于传统的荧光显微镜具有根据照射到样品上的光获得单一荧光图像的结构，因此存在需要使用各种荧光染料来识别各种类型的样品的缺点，并且需要激发和检测每种荧光染料所需的各种波长的光源和相机(见图3)。
[0007]特别地，为了清楚地识别这些样品，由于优选各荧光体发出的荧光光谱彼此不重叠，因此存在只能同时使用2到5种荧光体的问题，因此要识别的样品类型有限，并且由于需要与荧光体相同数量的光源，因此设备尺寸增加，它变得昂贵，并且检测时间增加(见图3)。
[0008]为了解决这个问题，已经开发了一种利用棱镜从样品发射的荧光光谱的技术。它通过比较原始荧光的位置与棱镜分散的荧光的相对位置来识别每个荧光体(见图4)。在该技术的情况下，由于通过分析相对位置来识别荧光的类型，因此可以使用具有重叠吸收光谱和发射光谱的各种类型的荧光体来分析各种类型的样品并大大减少光源单位的数量。然而，在该技术中，由于需要进行位置比较，因此需要分别安装用于原始荧光的检测单元和用于由棱镜分散的荧光的额外的检测单元，并且发射的荧光需要沿两个路径分开。因此，存在检测区域减小和灵敏度降低的缺点(见图4)。
[0009]因此，需要制造一种荧光显微镜，该显微镜能够同时分析各种类型的样品，同时在使用荧光进行样品分析期间最小化检测区域和灵敏度的变化。
[0010][现有技术文件][0011][专利文件][0012](0001)韩国专利第10
‑
0942195号
[0013](0001)韩国专利第10
‑
2290325号
[0014]本背景部分公开的上述信息仅用于增强对本专利技术背景的理解，因此它可能包含不构成本领域普通技术人员在该国已知的现有技术的信息。

技术实现思路

[0015]为了解决上述问题，本专利技术的目的在于提供一种能够通过荧光分析容易地识别生物标志物的种类的用于识别生物标志物的荧光显微镜及使用该荧光显微镜的生物标志物识别方法。
[0016]本公开的一个方面提供了一种荧光显微镜，其能够在荧光显微镜中识别生物标志物以分析从样品发射的荧光，其中荧光显微镜的检测单元设置有识别滤波器，该识别滤波器阻挡入射到该检测单元的部分荧光光谱。
[0017]在一个实施例中，识别滤波器可以阻挡在从样品发射的荧光中具有短波长发射峰的部分荧光光谱中的至少一个；以及在样品发出的荧光中具有长波长发射峰的部分荧光光谱。
[0018]在一个实施例中，识别滤波器可以阻挡在从样品发射的荧光中具有短波长发射峰的荧光光谱的峰值波长或更短的波长以及在从样品发出的荧光中具有长波长发射峰的荧光光谱的峰值波长或更长的波长。
[0019]在一个实施例中，从样品发射的荧光可以具有2至100个发射峰，并且部分或全部发射光谱的每个峰彼此重叠。
[0020]在一个实施例中，样品中包含的荧光体可以与一个或多个激发光同时发射。
[0021]在一个实施例中，样品可以包括2到100种荧光体。
[0022]在一个实施例中，样品可以包括附着在衬底上的拍摄探针；与拍摄探针结合的生物标志物；与生物标志物结合的检测探针标记有荧光体，其中，衬底表面可以存在2～100种检测探针。
[0023]在一个实施例中，检测探针可以与至少一种类型的荧光体连接，因此与检测探针结合的生物标志物可以具有一个或多个发射峰。
[0024]在一个实施例中，检测单元可以包括用于光谱化从样品发射的荧光的光谱装置。
[0025]在一个实施例中，识别滤波器可以设置在光谱装置的前面。
[0026]在一个实施例中，由分光装置分散的荧光可以以具有一个或两个切边的椭圆形来观察。
[0027]本专利技术的另一方面提供了一种生物标志物识别方法，包括以下步骤：制备用荧光体标记的样品；将样品放置在荧光显微镜的物镜单元上；使用光源照射样品；使用识别滤波器阻挡样品发射的部分荧光光谱；用分光装置分散荧光；并使用观察到的光谱形状识别样品类型。
[0028]在一个实施例中，识别样品类型可以包括识别荧光光谱的阻挡点；从阻挡点分析荧光光谱的相对位置和长度；使用荧光光谱的相对位置和长度来识别样品的类型。
[0029]在一个实施例中，荧光体标记的样品可以是2至100种不同荧光体标记的生物标志物。
[0030]根据本公开，由于用于识别生物标志物的荧光显微镜可以利用发射光谱的差异来识别生物标志物的类型，因此荧光显微镜可以广泛用于快速准确地识别多种生物标志物。
[0031]此外，根据本公开，由于可以通过阻挡部分荧光光谱来识别荧光的类型，因此与使用发射波长中的差异的现有分析方法相比，可以提供具有改进的检测区域和灵敏度的荧光显微镜。
[0032]此外，根据本公开，由于通过阻挡部分荧光光谱波长，然后分散荧光光谱来识别其形状，因此即使在使用具有相似峰值发射波长的荧光时也可以识别形状。因此，可以减少激发光的数量，并且可以同时使用各种类型的荧光体。
附图说明
[0033]图1是示出根据本专利技术的实施例的能够识别生物标志物的荧光显微镜的结构图。
[0034]图2是示出常规的荧光显微镜的结构的图。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于识别生物标志物的荧光显微镜，在用于分析从样品发射的荧光的荧光显微镜中，其中，所述荧光显微镜的检测单元设置有识别滤波器，所述识别滤波器阻挡入射到检测单元的部分荧光光谱。2.根据权利要求1所述的用于识别生物标志物的荧光显微镜，其中，所述识别滤波器阻挡以下至少一种：所述样品发射的荧光中具有短波长发射峰的部分荧光光谱；和所述样品发射的荧光中具有长波长发射峰的部分荧光光谱。3.根据权利要求1所述的用于识别生物标志物的荧光显微镜，其中，所述识别滤波器阻挡以下至少一种：所述样品发射的荧光中具有短波长发射峰的荧光光谱的峰值波长或更短的波长；和所述样品发射的荧光中具有长波长发射峰的荧光光谱的峰值波长或更长的波长。4.根据权利要求1所述的用于识别生物标志物的荧光显微镜，其中，所述样品发射的荧光具有2至100个发射峰，且部分或全部发射光谱的各光谱相互重叠。5.根据权利要求1所述的用于识别生物标志物的荧光显微镜，其中，包含在所述样品中的荧光体被一种或多种激发光同时激发。6.根据权利要求1所述的用于识别生物标志物的荧光显微镜，其中，所述样品包括2至100种荧光体。7.根据权利要求1所述的用于识别生物标志物的荧光显微镜，其中，所述样品包括：附着在衬底上的拍摄探针；与所述拍摄探针结合的生物标志物；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李钟真，
申请(专利权)人：JL美迪乐博斯公司，
类型：发明
国别省市：