一株酿酒酵母QLJJ61及其在合成胞苷三磷酸中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一株酿酒酵母QLJJ61及其在合成胞苷三磷酸中的应用，属于生物工程技术领域。本发明专利技术提供了一株具有优异的胞苷三磷酸合成能力的酿酒酵母QLJJ61，保藏编号为GDMCC No.62834，与出发菌株相比，该酿酒酵母QLJJ61的啤酒酿造指标并未发生明显变化，可在实现高品质啤酒稳定生产的同时，收集到的废弃酿酒酵母QLJJ61能够用于制备更多高附加值产物胞苷三磷酸，从而提高啤酒工业的产值和效益。从而提高啤酒工业的产值和效益。从而提高啤酒工业的产值和效益。

【技术实现步骤摘要】
一株酿酒酵母QLJJ61及其在合成胞苷三磷酸中的应用


[0001]本专利技术涉及一株酿酒酵母QLJJ61及其在合成胞苷三磷酸中的应用，属于生物工程


技术介绍

[0002]在历史上，啤酒的酿造原料主要有四种，它们分别是大麦芽、水、啤酒花和酵母，随着酿酒工艺的发展和啤酒的广泛传播，啤酒风靡全球。在我国，啤酒工业同样发展迅速，2021年全年产量达到3562.4万千升，是全球毫无争议的第一啤酒生产大国。啤酒生产时，会产生大量的废弃酵母。目前啤酒工业的废弃酿酒酵母往往作为饲料或有机肥而使用，其附加值较低，对产业提升带动作用有限。在不降低啤酒品质和产量的同时，如何进一步培育和挖掘废弃酵母的利用价值，成为啤酒工业提质增效的重要抓手。
[0003]废弃的酿酒酵母中含有丰富且复杂的酶系，能够作为完整的催化体系催化合成多种生物活性物质。胞苷三磷酸(cytidine triphosphate，CTP)，又称胞嘧啶核苷三磷酸、胞三磷，是由一个胞嘧啶，一个核糖和一个三磷酸单位组成的核苷酸。胞苷三磷酸是机体细胞内的一种正常成分，它在体内参与能量供给，并具有调节神经功能、缓解血管硬化、改善脂肪代谢等功能。主要适用于治疗植物神经紊乱、脑震荡及其后遗症、脑神经疾患、神经官能症及脂肪肝等，是一种重要的心脑血管类生物药物。同时，CTP也是合成寡聚糖、CDP
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胆碱及CMP
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唾液酸等多种药物的中间体。CTP还能用于合成真核生物细胞中最重要的磷脂——磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺，此外，CTP还可合成CDP<br/>‑
二脂酰甘油，后者是原核生物体内磷脂合成的关键中间体。它们都有着重要的调节功能。基于CTP上述生理功能，CTP在医疗领域有着广泛的用途。在临床上CTP被用来治疗脑血管意外及后遗症、脑震荡、外伤性昏迷、颅脑手术后功能障碍、老年性痴呆、外周神经损伤、儿童脑发育不全、脂肪肝及血管疾病、神经损伤所致的意识障碍。CTP衍生物，如胞二磷胆碱临床上用于颅脑损伤、颅脑术后和急性脑梗塞引起的意识障碍，以及帕金森综合征、神经性耳聋和耳鸣的辅助治疗。
[0004]现有的研究中，有面包酵母、假丝酵母、产氨短杆菌、白地霉细胞、啤酒酵母等合成CTP等三磷酸核苷的方法，其中啤酒酵母由于来源稳定、充足且质量稳定，适合大规模生产。但是，既不影响啤酒发酵品质又具有CTP高转化率的啤酒酵母仍需要进一步的筛选与开发。
[0005]中国专利文献CN 101265453A(申请号200810023903.6)公开了一种含高活力CMP激酶和CDP激酶的啤酒酵母菌的筛选以及该啤酒酵母菌在生产胞苷三磷酸中的应用，该专利技术的啤酒酵母菌菌株是利用亚硝基胍(NTG)诱变手段筛选出含高活力CMP激酶、CDP激酶的啤酒酵母菌菌株；在生产胞苷三磷酸的应用中，游离啤酒酵母细胞的CTP收率为65.1％。

技术实现思路

[0006]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一株酿酒酵母QLJJ61及其在合成胞苷三磷酸中的应用。
[0007]本专利技术的技术方案如下：
[0008]一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)QLJJ61，于2022年9月26日保藏于广州省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC No.62834。
[0009]上述酿酒酵母QLJJ61是由酿酒酵母BKS
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03经诱变筛选后得到的。
[0010]上述酿酒酵母QLJJ61的培养方法，包括如下步骤：取酿酒酵母QLJJ61接入麦汁培养基中，发酵培养。
[0011]根据本专利技术优选的，所述发酵培养的温度为16～25℃。
[0012]上述酿酒酵母QLJJ61在合成胞苷三磷酸中的应用。
[0013]上述酿酒酵母QLJJ61在啤酒酿造后合成胞苷三磷酸中的应用。
[0014]一种产品，其活性成分为上述酿酒酵母QLJJ61。
[0015]根据本专利技术优选的，所述产品为按照上述培养方法发酵培养得到的发酵物。
[0016]上述产品在合成胞苷三磷酸中的应用。
[0017]上述产品在在啤酒酿造后合成胞苷三磷酸中的应用。
[0018]有益效果：
[0019]本专利技术提供了一株具有优异的胞苷三磷酸合成能力的酿酒酵母QLJJ61，同时该酿酒酵母QLJJ61的啤酒酿造指标并未发生明显变化，可在实现高品质啤酒稳定生产的同时，将收集到的废弃酵母用于制备更多高附加值产物胞苷三磷酸，胞苷三磷酸的转化率可达到92.5％，反应时间仅需60min，转化效率高，从而提高啤酒工业的产值和效益。
附图说明
[0020]图1为CTP的转化率随时间的变化曲线。
具体实施方式
[0021]下面结合实施例对本专利技术的技术方案作进一步说明，但是本专利技术的保护范围并不仅限于此。实施例中涉及的试剂及药品，若无特殊说明，均为普通市售产品。实施例中涉及的实验步骤，若无特殊说明，均为本领域常规实验操作。
[0022]实施例中涉及的微生物：
[0023]一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)QLJJ61，于2022年9月26日保藏于广州省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC No.62834。
[0024]上述菌株由酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BKS
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03经诱变筛选而得，酿酒酵母BKS
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03由啤酒厂提供。
[0025]实施例1：酿酒酵母的诱变筛选
[0026]1、诱变方法：
[0027](1)紫外线诱变
[0028]将出发菌株酿酒酵母BKS
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03在琼脂固体YPD培养基上进行纯化，挑取纯化后的单菌落接种至液体YPD培养基中培养到对数生长期，在无菌环境下取对数生长期的菌液1.0mL，以10倍梯度稀释法制成10
‑1～10
‑5的酿酒酵母菌悬液，涂布在琼脂固体YPD培养基平板上，并在垂直于紫外灯(20W)的25～30cm处照射，照射时间分别为0s(对照)、10s、20s、
30s、40s、50s、60s、70s、80s，照射完成后，立即用遮光纸包裹，在28℃生化培养箱中倒置培养72h，培养后根据菌落数计算致死率，以致死率85％～90％的照射时间为最佳诱变剂量。
[0029]其中，致死率的计算公式如下：
[0030][0031](2)ARTP诱变
[0032]将出发菌株酿酒酵母BKS
‑
03在琼脂固体YPD培养基上进行纯化，挑取纯化后的单菌落接种至液体YPD培养基中培养到对数生长期，采用无菌生理盐水以10倍梯度稀释法将对数生长期的菌液制成OD
600
为0.6～0.8之间的菌悬液。准确吸取10μL菌悬液均匀的涂布于无菌金属载片表面，即刻进行ARTP诱变处理。调节ARTP诱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)QLJJ61，其特征在于，于2022年9月26日保藏于广州省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC No.62834。2.权利要求1所述的酿酒酵母QLJJ61的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：取酿酒酵母QLJJ61接入麦汁培养基中，发酵培养。3.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述发酵培养的温度为16～25℃。4.权利要求1所述的酿酒酵母QLJ...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱德强，陈硕，刘新利，仝展鹏，
申请(专利权)人：山东巴克斯啤酒有限公司酵爵健康科技重庆有限公司，
类型：发明
国别省市：