一种抗原肽组合物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抗原肽组合物及其制备方法，包含抗原肽或抗原肽组、环糊精类辅料和多元醇类辅料，所述抗原肽组包括2

【技术实现步骤摘要】
一种抗原肽组合物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及制剂生产
，特别是一种抗原肽组合物及其制备方法。

技术介绍

[0002]肿瘤新生抗原(neoantigens)通常由肿瘤细胞基因组突变产生，仅存在于肿瘤细胞，是肿瘤 特异性抗原(tumor specific antigen，TSA)中的一类。相较于肿瘤相关抗原，新生抗原除了具有 高度肿瘤特异性，通常还有更强的免疫原性和更好的主要组织相容性复合体(MHC分子)亲和 性，并且不受中枢免疫耐受的影响，因此在肿瘤临床治疗应用上具有极大的潜力。2017年《自 然》杂志发表了两项基于新生抗原的肿瘤疫苗的研究成果。美国波士顿Dana Farber癌症中心 的Catherine Wu教授团队和德国美因茨大学Ugur Sahin团队分别展示了基于肿瘤新生抗原的 个体化多肽疫苗和个体化RNA疫苗治疗黑色素瘤中晚期复发高危患者的优异疗效。这些结果 为个体化肿瘤新生抗原疫苗的安全性、免疫原性、有效性提供了有力证据。
[0003]个体化多肽疫苗，是指为单个肿瘤患者定制化设计不超过30条新生抗原肽，每条肽的序 列各不相同；同时，不同患者的抗原肽序列完全一致的可能性也微乎其微。而不同序列抗原 肽的理化性质各有不同，比如溶解性、肽链的化学稳定性。目前为止没有一套完美的制剂方 案可以同时解决不同理化性质的抗原肽的制剂生产，因此，为使尽可能多的抗原肽进入制剂 生产，保证个体化多肽肿瘤疫苗的有效性以及兼顾制剂生产的便利性，使用一个对多肽助溶 效果好、稳定性佳的水溶液体系来溶解尽可能多的抗原肽，显得特别重要。本专利技术极大地解 决了上述问题。

技术实现思路

[0004]为解决现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种抗原肽组合物及其制备方法，。
[0005]为了实现上述目标，本专利技术采用如下的技术方案：
[0006]一种抗原肽组合物，包括抗原肽或抗原肽组、环糊精类辅料和多元醇类辅料，所述抗原 肽组包括2～6种抗原肽，所述抗原肽或抗原肽组、环糊精类辅料以及多元醇类辅料的质量比 为0.01～0.18:1～5:1～5。
[0007]一种抗原组合物溶液，包含所述抗原肽组合物，所述抗原肽组合物溶解于注射用水中， 所述的环糊精类辅料在注射用水中的重量体积比浓度为1～5％，所述的多元醇类辅料在注射用 水中的重量体积比浓度为1～5％，所述的抗原肽或抗原肽组在注射用水中的重量体积比浓度为 0.01～0.18％。
[0008]前述的一种抗原肽组合物，所述的环糊精类辅料包括但不限于羟丙基β环糊精、磺丁基 醚β环糊精或其他β环糊精衍生物中至少一种。
[0009]前述的一种抗原肽组合物，所述的多元醇类辅料包括但不限于甘露醇、山梨醇或木糖醇 中至少一种。
[0010]前述的一种抗原肽组合物，所述抗原肽或抗原肽组中包含至少一种难溶性多肽。
[0011]前述的一种抗原肽组合物，所述难溶性多肽为在水或生理盐水或pH7.4磷酸盐缓冲液中 溶解度低于0.3mg/mL的多肽。
[0012]一种抗原肽组合物的制备方法，包括如下步骤：
[0013](1)配液：将环糊精类辅料以及多元醇类辅料溶解于适量注射用水中，再加入抗原肽或抗原 肽组，充分溶解；
[0014](2)过滤：将步骤(1)中的溶液进行除菌过滤；
[0015](3)分装：将过滤后的溶液无菌分装；
[0016](4)冻干：将上述过滤后的溶液进行冷冻干燥，得到抗原肽组合物。
[0017]一种抗原肽组合物溶液的制备方法，包括如下步骤：
[0018](1)配液：将环糊精类辅料以及多元醇类辅料溶解于适量注射用水中，再加入抗原肽或抗原 肽组，充分溶解；
[0019](2)过滤：将步骤(1)中的溶液进行除菌过滤；
[0020](3)分装：将过滤后的溶液无菌分装，获得抗原肽组合物溶液。
[0021]前述的一种制备方法，所述的冷冻干燥的方法如下：
[0022]A、预冻：在1h内降温至
‑
40℃以下，维持4h及以上，之后预抽真空至0.25mbar以下；
[0023]B、一次升华：真空度维持0.2mbar以下，通过3～7h升温至
‑
30℃，
‑
30℃维持3～5h；控 制真空度为0.1mbar以下，经过6～14h升温至
‑
20℃，维持1～3h，通过3～7h升温至0℃，维 持1～3h；
[0024]C、解析干燥：抽真空至0.05mbar以下，温度经过3～5h逐渐升高至25～30℃，保持5～7h； 获得冻干的抗原肽组合物。
[0025]本专利技术的有益之处在于：
[0026]本专利技术通过加入一定量的多元醇类辅料、环糊精类辅料，增溶的难溶性抗原肽条数显著 增多，可用于制剂生产的个体化定制的多肽数量增加，提升了个体化疫苗的抗肿瘤效果；且 提高了多肽稳定性，不易被降解，在光照下也具有更好的稳定性，延长了个体化多肽药物的 储存时间；另外，本专利的冻干工艺适用于绝大多数含难溶性多肽的配方，解决了不同患者 的个体化多肽药物的工艺通用性问题。
附图说明
[0027]图1为本专利技术各组B16F10荷瘤模型小鼠的肿瘤生长曲线
[0028]图2为本专利技术各组淋巴结活化指标T细胞总数
[0029]图3为本专利技术各组脾细胞活化指标T细胞总数
[0030]图4为本专利技术各组TILs活化指标T细胞总数
[0031]图5为本专利技术各组ELISpot检测结果
具体实施方式
[0032]以下结合附图和具体实施例对本专利技术作具体的介绍。
[0033]一种抗原肽组合物的制备方法，包括如下步骤：
[0034](1)配液：将环糊精类辅料以及多元醇类辅料溶解于适量注射用水中，再加入抗原
肽或抗原 肽组，充分溶解；
[0035](2)过滤：将步骤(1)中的溶液用0.22μm滤膜进行除菌过滤；
[0036](3)分装：将过滤后的溶液无菌分装；
[0037](4)冻干：将上述过滤后的溶液进行冷冻干燥，结束冻干后充氮，压塞并轧盖，得到抗原肽 组合物。
[0038]冻干具体为：
[0039]A、预冻：在1h内降温至
‑
40℃以下，维持4h及以上，之后预抽真空至0.25mbar以下；
[0040]B、一次升华：真空度维持0.2mbar以下，通过3～7h升温至
‑
30℃，
‑
30℃维持3～5h；控 制真空度为0.1mbar以下，经过6～14h升温至
‑
20℃，维持1～3h，通过3～7h升温至0℃，维 持1～3h；
[0041]C、解析干燥：抽真空至0.05mbar以下，温度经过3～5h逐渐升高至25～30℃，保持5～7h；
[0042]D、压塞、充氮出箱：充氮复压至600～800mbar，压塞轧盖后获得冻干的抗原肽组合物。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗原肽组合物，其特征在于：包含抗原肽或抗原肽组、环糊精类辅料和多元醇类辅料，所述抗原肽组包括2
‑
6种抗原肽，所述抗原肽或抗原肽组、环糊精类辅料以及多元醇类辅料的质量比为0.01～0.18:1～5:1～5。2.一种抗原组合物溶液，包含权利要求1所述抗原肽组合物，其特征在于：所述抗原肽组合物溶解于注射用水中，所述的环糊精类辅料在注射用水中的重量体积比浓度为1～5％，所述的多元醇类辅料在注射用水中的重量体积比浓度为1～5％，所述的抗原肽或抗原肽组在注射用水中的重量体积比浓度为0.01～0.18％。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于：所述的环糊精类辅料包括但不限于羟丙基β环糊精、磺丁基醚β环糊精或其他β环糊精衍生物中至少一种。4.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于：所述的多元醇类辅料包括但不限于甘露醇、山梨醇或木糖醇中至少一种。5.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于：所述的抗原肽为10～40个氨基酸序列的多肽。6.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于：所述抗原肽或抗原肽组中包含至少一种难溶性多肽。7.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于：所述难溶性多肽为在水或生理盐水或pH7.4磷酸盐缓冲液中溶解度低于0.3mg/mL的多肽。8.一种权利要求1所述组合物的制...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩宁，
申请(专利权)人：杭州芯递力生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：