【技术实现步骤摘要】
一种低聚半乳糖的液相色谱
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质谱联用检测方法及其应用
[0001]本专利技术涉及分析检测
,尤其是涉及一种低聚半乳糖的液相色谱
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质谱联用检测方法及其应用。
技术介绍
[0002]低聚半乳糖(galactooligosaccharides, GOS)是一种具有天然属性的功能性低聚糖,主要存在于动物乳汁和母乳中,已被允许作为营养强化剂添加到婴幼儿配方奶粉等食品中,同时在医药和饲料等行业也受到广泛关注。GOS的分子结构是在半乳糖或葡萄糖一端通过不同糖苷键(有α/β构型和不同的连接位置((1
→
6),(1
→
4),(1
→
3)或(1
→
2)))连接1~7个半乳糖基,即(Gal)n
‑
Gal/Glc(n=1~7)(Gal, galactose, 半乳糖;Glc, glucose, 葡萄糖)。GOS目前主要采用半乳糖苷酶催化乳糖制备,受酶来源和反应条件的影响,不同企业生产的GOS在化学组成上存在较大差异。构效关系研究显示GOS的功能与其结构密切相关,含不同糖苷键的异构体或由不同单糖组成的异构体往往具有不同的生物活性。近年来,随着理论上定向改造半乳糖苷酶以用于定向合成具有特定功能活性的特定GOS组分成为可能,对特定构型GOS组分的分析也提出了要求。因此,开发GOS中不同异构体组分的定性分析方法,对建立完整的GOS异构体营养价值判定体系,引导工业生产出高活性、高稳定性和高附加值的GOS产品具有重要意义
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种低聚半乳糖的液相色谱
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质谱联用检测方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、标准品溶液配制:将不同的糖标准品配制成糖标准品储备液;S2、将实际样品进行前处理得到待测液;S3、液相色谱质谱检测:将S1的糖标准品储备液和S2的待测液通过液相色谱质谱进行分离测定;S4、色谱质谱图分析:记录标准品和待测液中各色谱峰的保留时间,以及标准品和待测液中各色谱峰在串联质谱图上的特征子离子和母离子强度;计算特征子离子/母离子强度的比值;通过保留时间和色谱峰在串联质谱图上的子离子与母离子强度比值来鉴定低聚半乳糖中二糖、三糖和四糖糖苷键的α/β构型和/或糖苷键的连接位置。2.根据权利要求1所述的低聚半乳糖的液相色谱
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质谱联用检测方法,其特征在于,所述标准品储备液的浓度为0.001~0.1 mg/mL。3.根据权利要求1所述的低聚半乳糖的液相色谱
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质谱联用检测方法,其特征在于,所述糖标准品包括曲二糖、异麦芽糖、黑曲霉二糖、蜜二糖、麦芽糖、1,4
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半乳二糖、1,6
‑
半乳二糖、乳糖、纤维二糖、槐糖、昆布二糖、龙胆二糖、麦芽三糖、纤维三糖、异麦芽三糖、黑曲霉三糖、昆布三糖、麦芽四糖、纤维四糖、异麦芽四糖、黑曲霉四糖、昆布四糖中的至少一种。4.根据权利要求1所述的低聚半乳糖的液相色谱
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质谱联用检测方法,其特征在于,所述液相色谱的条件为:色谱柱:Infinity Lab Poroshell 120 HILIC(3.0 mm
×
100 mm, 2.7 μm);柱温:30~40 ℃;进样量:0.5~2 μL;流速:0.4~0.7 mL/min;流动相:水(A)
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乙腈(B);梯度洗脱:0~10 min,90%~75% B;10~10.5 min,75%~90% B;10.5~15.5 min,90% B。5.根据权利要求1所述的低聚半乳糖的液相色谱
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质谱联用检测方法,其特征在于,所述质谱条件为:电喷雾离子源:正离子,质谱扫描范围:m/z 50~1000;全扫描模式和母离子(m/z):[C
12
H
22
O
11
+Na]
+
(m/z 365.1054)、[C
18
H
32
O
16
+Na]
+
(m/z 527.1583)、[C
24
H
42
O
21
+Na]
+
(m/z 689.2111)的串联质谱扫描。6.根据权利要求1所述的低聚半乳糖的液相色谱
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质谱联用检测方法,其特征在于,步骤S4中,所述色谱质谱图分析包括,记录标准品和待测液中各色谱峰的保留时间,以及标准品和待测液中各色谱峰在串联质谱图上的特征子离子和母离子强度;计算特征子离子/母离子强度的比值;以保留时间为横坐标,特征子离子/母离子强度的比值为纵坐标对标准品和待测液作图;以不同结构的标准品和/或不同样品为横坐标,特征子离子/母离子强度的比值为纵坐标作图。7.根据权利要求6所述的低聚半乳糖的液相色谱
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质谱联用检测方法,其特征在于,步骤S4中,所述色谱质谱图分析包括,通过对全扫描模式色谱图提取离子m/z 365.1054、m/z 527.1583和...
【专利技术属性】
技术研发人员:余祥英,闫景坤,李琳,彭雪颖,李玉婷,
申请(专利权)人:东莞理工学院,
类型:发明
国别省市:
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