【技术实现步骤摘要】
生物组织参照切片、生物标志物的检测方法及应用
[0001]本专利技术涉及化学检测领域,特别涉及一种生物组织参照切片及其应用,利用该组织切片的生物标志物的检测方法及其试剂盒和检测系统。
技术介绍
[0002]各类肿瘤的发生和发展过程都有一定的代谢产物产生,肿瘤代谢组的变化大多是由于基因突变造成的,因此针对肿瘤代谢产物和基因突变的检测可以有效地预判肿瘤发展过程并协助肿瘤分期,对进一步采取有效治疗手段、改善预后具有指导意义,但是现有检测方法操作复杂、检测周期长,无法快速响应临床需求。基因突变常见检测手段主要有基因测序(Sanger)、免疫组织化学法(IHC),定量聚合酶链反应(qPCR)等,这些方法通常劳动密集、样品等预处理复杂,需要熟练掌握核酸提取、PCR操作等复杂精巧的实验技能;另外,这些方法耗时长,通常完成单次实验时长在4小时以上,尤其是临床上多采用的IHC和Sanger方法出具最终报告要1天左右。对肿瘤代谢产物的定性和定量检测有多种方法,如利用气质或液质联用系统(GC/LC
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MS)、磁共振光谱(MRS)、解析电喷雾离子色谱(DESI
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MS)、快速蒸发电离质谱(REI
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MS)等手段检测。这些色谱或质谱检测方法结果准确可靠,但是同样需要复杂且耗时的前处理过程和样品组分分离过程。
[0003]而且,上述方法都是针对肿瘤患者的血清样本或者肿瘤组织的细胞破碎样本进行检测,无法实现肿瘤组织的原位检测。
技术实现思路
[0004]本专利技术旨在至 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种生物组织参照切片,其特征在于,包含:标准品,所述标准品分布于所述生物组织切片的至少部分区域,所述标准品含有生物标志物,所述生物标志物用于鉴定所述生物组织的生理状态。2.根据权利要求1所述的切片,其特征在于,所述生物组织来源于健康个体;任选地,生物组织中所述生物标志物的含量为零;任选地,所述标准品分布于所述生物组织参照切片预定数量的不同区域,所述预定数量的不同区域不重叠;任选地,分布于不同区域内的所述标准品的含量不同;任选地,所述切片是冰冻切片或石蜡切片;任选地,所述切片是冰冻切片;任选地,所述生物标志物是琥珀酸,所述生物组织来源于肺组织。3.权利要求1~2任一所述的生物组织参照切片在检测待测生物组织中所述生物标志物中的应用;任选地,所述检测是原位定量检测。4.一种检测生物组织中生物标志物的方法,其特征在于,利用MALDI
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TOF
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MS质谱分别对待测生物组织切片和权利要求1~2任一所述的生物组织参照切片进行检测,获得待测生物组织切片和生物组织参照切片的质谱峰图和质谱成像图;基于质谱峰图和质谱成像图,确定所述待测生物组织切片中的生物标志物的含量。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,基于质谱峰图和质谱成像图,确定所述待测生物组织切片中的生物标志物的含量是通过如下方式实现的:(1)基于生物组织参照切片的质谱峰图,获得生物组织参照切片预定区域中标准品的质谱峰强度;(2)基于所述生物组织参照切片中预定区域中标准品的质谱峰强度以及标准品的第一浓度,确定第一标准曲线,所述第一浓度为标准品加入到所述生物组织参照切片预定区域前的浓度;(3)基于所述生物组织参照切片中预定区域的厚度和面积,确定所述生物组织参照切片中预定区域的体积;(4)基于所述生物组织参照切片预定区域中标准品的含量以及所述预定区域的体积获得所述预定区域单位体积中所述标准品的含量;(5)基于所述生物组织参照切片中预定区域中标准品的质谱峰强度以及所述预定区域单位体积中所述标准品的含量,确定第二标准曲线;(6)基于待测生物组织切片的质谱成像图,选取感兴趣区域ROI,获得ROI的面积;(7)基于待测生物组织切片样本的质谱峰图,获得ROI的质谱峰强度;(8)基于所述ROI的质谱峰强度以及所述第二标准曲线,确定ROI中生物标志物在待测生物组织切片样本相同预定区域中单位体积所述生物组织中的含量,和/或ROI中生物标志物的总含量;任选地,还包括如下步骤:(9)基于待测生物组织切片样本的质谱成像图,选择预定多个ROI,获得预定多个ROI中
每个ROI中生物标志物在单位体积生物组织中的含量和面积的乘积;(10)基于所述预定多个ROI中每个ROI中生物标志物在单位体积生物组织中的含量和面积的乘积,获得预定多个ROI的乘积之和;进一步地,还包括如下步骤:基于所述预定多个ROI的乘积之和与待测生物组织切片样本的预定多个ROI面积之和的比值,确定生物标志物在单位体积生物组织中的相对含量。6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员:张晨曦,佟雪梅,
申请(专利权)人:融智生物科技青岛有限公司,
类型:发明
国别省市:
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