一种大白桩菇多肽-亚铁螯合物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种大白桩菇多肽

【技术实现步骤摘要】
一种大白桩菇多肽
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亚铁螯合物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于肽铁螯合物
，尤其涉及一种大白桩菇多肽
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亚铁螯合物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]肿瘤相关性贫血(cancer
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relatedanemia，CRA)是恶性肿瘤常见的伴随疾病之一，是指肿瘤患者在疾病的发展及治疗过程中发生的外周血中单位容积内红细胞数减少或血红蛋白浓度减低使机体不能对周围组织细胞充分供氧的疾病。CRA发生的原因主要包括肿瘤方面的因素(如失血、溶血、骨髓受侵犯)和针对肿瘤治疗方面的因素(如化疗的骨髓抑制作用、放疗等)。CRA治疗率较低，可以引发多种临床症状，会严重导致患者的生活质量下降，还会缩短CRA患者的生存时间，是独立于放化疗之外的影响肿瘤患者生存的危险因素。其中，消化系统肿瘤较其他系统贫血发生率更高。
[0003]肝癌和结肠癌为我国常见的恶性消化系统肿瘤之一，其伴发贫血的治疗对患者的预后及生存质量的改善有重要影响。目前针对肝癌和结肠癌相关贫血的治疗主要包括输血治疗、补充铁剂及促红细胞生成素(EPO)治疗等，虽能有效缓解病人的贫血状况，但其不良反应也同样明显，EPO会导致血栓的发生、输血会发生感染及铁量过载等问题，且这些治疗在对患者生存期的影响方面存在着较大的争议。因此，单纯补充铁剂在治疗CRA上显得尤为重要，急需开发新型补铁剂来缓解这一问题。多肽铁鳌合物是一种优良的补铁剂，是缓解铁缺乏的最佳铁补充剂之一。其没有异味，生物利用度较高，对铁缺乏有显著的防治效果。最重要的是，多肽铁鳌合物除了具有较好的补铁效果，还具有抗氧化活性、抗菌活性和免疫活性等生理活性。
[0004]在日常膳食中，富含蛋白质的食物分为肉类、奶类、蛋类、豆类、坚果类等。食用菌同样也可作为一类重要的补充蛋白的食材，其蛋白质含量为7.7％～49.9％，很多种类均高于动物源、植物源、蛋类等食物原料中的蛋白质含量，而且，金针菇、杏鲍菇等氨基酸营养指数与鸡蛋蛋白模式比较接近，蛹虫草的必需氨基酸的含量水平超过牛奶的50％，营养价值极高，可作为良好的天然蛋白质来源进行制备生物活性肽。
[0005]本课题组前期研究发现，大白桩菇子实体蛋白质含量为49.12g/100g(干重)，远高于其他种类的食用菌，如羊肚菌(28.43g/100g)及动物源、植物源、蛋类等，17种游离氨基酸总量为33.95g/100g，其中必需氨基酸占比31.41％(色氨酸除外)，不仅富含鲜味物质天冬氨酸和谷氨酸，且氨基酸评分(35.26)高于FAO/WHO模式谱的35％，赋予大白桩菇较好的口感和风味，由此可见，大白桩菇可以作为良好的天然蛋白质来源进行生物活性肽的制备。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种大白桩菇多肽
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亚铁螯合物及其制备方法与应用，本专利技术提供的大白桩菇多肽
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亚铁螯合物具有抗氧化、抑菌作用，对缺铁性贫血、恶性消化道肿瘤肝癌、直肠癌及其相关性贫血具有显著的治疗效果。
[0007]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一种大白桩菇多肽
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亚铁螯合物的制备方法，包括如下步骤：以大白桩菇菌株的液态发酵物为原料，碱溶酸沉法得大白桩菇蛋白，采用蛋白酶水解大白桩菇蛋白，水解结束后将水解产物加热使酶失活，取上清液收集水解产物中小于3kDa的大白桩菇多肽部分，加入抗坏血酸和氯化亚铁反应即得大白桩菇多肽
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亚铁螯合物。
[0009]优选的，液态发酵的液体培养基包括：碳源16
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35g/L，氮源4
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6g/L，磷酸二氢钾0.4
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0.6g/L，硫酸镁0.2
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0.3g/L，维生素B18
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12mg/L，所述液体培养基的pH值为4
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6。
[0010]优选的，所述蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶中的至少一种。
[0011]优选的，所述蛋白酶的酶含量为6000
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8000U/mL。
[0012]优选的，所述水解的pH值6.0
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7.0，所述水解的温度为30
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50℃，所述水解的时间为4.0
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7.0h。
[0013]优选的，所述抗坏血酸的添加量为0.075
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0.15％，所述大白桩菇多肽的浓度为2
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6％，大白桩菇多肽与氯化亚铁的质量比为3:1
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6:1。
[0014]优选的，所述反应的温度为10
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50℃，pH值为4
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7，时间为10
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50min。
[0015]本专利技术还提供了上述制备方法制备所得的大白桩菇多肽
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亚铁螯合物。
[0016]本专利技术还提供了上述大白桩菇多肽
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亚铁螯合物在制备肝癌和/或直肠癌防治药物中的应用。
[0017]本专利技术还提供了上述大白桩菇多肽
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亚铁螯合物在制备肝癌和/或直肠癌相关性贫血防治药物中的应用。
[0018]本专利技术还提供了上述大白桩菇多肽
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亚铁螯合物在制备缺铁性贫血防治药物中的应用。
[0019]本专利技术的有益效果：
[0020]本专利技术首次提供一种大白桩菇多肽
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亚铁螯合物的制备方法，采用本专利技术制备方法制备获得的大白桩菇多肽
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亚铁螯合物具有体外抗氧化作用和抑菌作用，稳定性高，且对肝癌和直肠癌具有一定的抑制作用，另外对缺铁性贫血疾病具有一定的改善效果，本专利技术提供的大白桩菇多肽
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亚铁鳌合物能够作为一种新型的预防、干预、治疗肝癌及其相关性贫血的潜在药物。
附图说明
[0021]图1
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图6分别为液态发酵中不同碳源、氮源、碳氮比、pH值、发酵温度、发酵时间对发酵产物中可溶性蛋白含量的影响；
[0022]图7
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图11分别为水解时不同蛋白酶种类、加酶量、pH值、温度、时间对多肽含量的影响；
[0023]图12
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图17分别为螯合反应时肽铁质量比、多肽浓度、抗坏血酸添加量、螯合时间、pH值、螯合温度对螯合率的影响；
[0024]图18为不同组别对DPPH自由基的清除作用；
[0025]图19为不同组别的抑菌活性；
[0026]图20为不同组别大鼠体重结果；
[0027]图21为不同组别大鼠血清铁含量结果；
[0028]图22为不同组别大鼠血清铁蛋白含量结果；
[0029]图23为不同组别对直肠癌Caco2细胞的抑制率结果；
[0030]图24为不同组别对肝癌HepG2细胞的抑制率结果；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大白桩菇多肽
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亚铁螯合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以大白桩菇菌株的液态发酵物为原料，碱溶酸沉法得大白桩菇蛋白，采用蛋白酶水解大白桩菇蛋白，水解结束后将水解产物加热使酶失活，取上清液收集水解产物中小于3kDa的大白桩菇多肽部分，加入抗坏血酸和氯化亚铁反应即得大白桩菇多肽
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亚铁螯合物。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，液态发酵的液体培养基包括：碳源16
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35g/L，氮源4
‑
6g/L，磷酸二氢钾0.4
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0.6g/L，硫酸镁0.2
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0.3g/L，维生素B18
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12mg/L，所述液体培养基的pH值为4
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6。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶中的至少一种。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶的酶含量为6000
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8000U/mL。5.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭尚，李艳婷，郭霄飞，徐莉娜，郭伟伟，李银生，
申请(专利权)人：山西农业大学山西功能食品研究院，
类型：发明
国别省市：