PCBP2抑制剂在制备促进模拟禁食饮食治疗胆囊癌的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了PCBP2抑制剂在制备促进模拟禁食饮食治疗胆囊癌的药物中的应用。本发明专利技术通过体内功能实验发现模拟禁食饮食能够抑制胆囊癌细胞的增殖、迁移与侵袭、糖酵解等生物学功能；而在对禁食相关基因PCBP2深入研究发现，PCBP2在胆囊癌组织中表达水平显著上调，体内功能实验表明敲低PCBP2后，胆囊癌细胞的增殖明显减弱；随后，通过体内体外功能实验表明敲减PCBP2后模拟禁食饮食对胆囊癌细胞增殖、迁移与侵袭、糖酵解的抑制作用明显增强，过表达PCBP2后，模拟禁食饮食的抗癌作用受到显著的抑制。本发明专利技术提供了PCBP2是调控模拟禁食饮食治疗胆囊癌的重要因子，有望成为治疗胆囊癌的潜在分子靶点。潜在分子靶点。潜在分子靶点。

【技术实现步骤摘要】
PCBP2抑制剂在制备促进模拟禁食饮食治疗胆囊癌的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及PCBP2抑制剂在制备促进模拟禁食饮食治疗胆囊癌的药物中的应用，属于生物医药


技术介绍

[0002]胆囊癌是一种常见的胆道恶性肿瘤，在消化道肿瘤中排名第5位，其早期诊断困难，无明显特异性症状，发现时多已属晚期，手术根治率低，易出现转移，预后极差，5年生存率不足10％。目前禁食或模拟禁食饮食正作为治疗各类消化道肿瘤的一种策略，营养物质的缺乏可导致香瓜逆生长因子和代谢物质的改变，从而减少肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移。虽然模拟禁食饮食在肿瘤治疗上取得了一些进展，但仍缺乏对于胆囊癌的研究。还需要进一步探索胆囊癌发生发展和侵袭转移等分子机制。
[0003]PCBP2是目前已知的受禁食调控的基因，也被发现其与促进肿瘤发生、增殖、转移等有关，与代谢性疾病相关的恶性肿瘤不良预后有关，如肝细胞癌、胃癌、胰腺导管腺癌等。但是，目前还没有关于PCBP2作为禁食抑制胆囊癌的治疗靶点的相关报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是：为了解决目前针对胆囊癌的治疗存在根治率低，易出现转移，预后极差的技术问题，本专利技术提供PCBP2抑制剂在制备促进模拟禁食饮食治疗胆囊癌的药物中的应用，PCBP2能模拟禁食饮食抑制胆囊癌的发生发展与侵袭转移，为临床上治疗胆囊癌提供了一种新的治疗靶点。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供了PCBP2抑制剂在制备促进模拟禁食饮食治疗胆囊癌的药物中的应用。
[0006]其中，所述PCBP2抑制剂能够调控模拟禁食饮食对胆囊癌增殖、迁移与侵袭、糖酵解的抑制作用。
[0007]所述PCBP2通过靶向ANGPTL4来发挥其调控模拟禁食饮食对胆囊癌的治疗作用。
[0008]优选地，所述PCBP2抑制剂包括PCBP2基因特异性的RNAi、microRNA、shRNA、siRNA，或PCBP2蛋白的抗体、活性抑制剂。
[0009]优选地，所述PCBP2抑制剂为PCBP2基因特异性的shRNA。
[0010]优选地，所述shRNA的序列如SEQ ID NO：3和/或SEQ ID NO：4所示。
[0011]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0012]本专利技术首次发现在胆囊癌细胞中，PCBP2能调控模拟禁食饮食抑制胆囊癌的发生发展与侵袭转移，首次证实PCBP2/ANGPTL4信号轴的存在，是胆囊癌治疗领域的一种潜在治疗靶点，为后续通过模拟禁食饮食治疗胆囊癌的机制研究提供了理论基础，同时PCBP2作为胆囊癌的治疗靶点具有潜在的应用价值。
附图说明
[0013]图1展示了模拟禁食饮食能够抑制胆囊癌细胞的增殖、迁移与侵袭、糖酵解；其中，A为CCK
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8实验证实模拟禁食饮食能降低胆囊癌细胞GBC
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SD和SGC
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996的细胞活力；B为集落形成实验证实模拟禁食饮食能抑制胆囊癌细胞GBC
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SD和SGC
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996的增殖活性；C为Transwell实验检测模拟禁食饮食后胆囊癌细胞GBC
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SD的侵袭与迁移能力；D为Transwell实验检测模拟禁食饮食后胆囊癌细胞SGC
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996的侵袭与迁移能力；E为划痕实验检测模拟禁食饮食后胆囊癌细胞GBC
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SD的迁移能力；F为划痕实验检测模拟禁食饮食后胆囊癌细胞SGC
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996的迁移能力；G为葡萄糖吸收检测实验证实了模拟禁食饮食能显著降低胆囊癌细胞GBC
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SD和SGC
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996的葡萄糖吸收水平；H为乳酸比色检测实验证实了模拟禁食饮食能显著降低胆囊癌细胞GBC
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SD和SGC
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996的乳酸生成水平；I为细胞外通量分析仪检测胆囊癌细胞经禁食处理后胆囊癌细胞GBC
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SD的氧耗率均显著升高；J为细胞外通量分析仪检测胆囊癌细胞经禁食处理后胆囊癌细胞SGC
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996的氧耗率均显著升高；K为蛋白质印迹法证实模拟禁食饮食能显著降低胆囊癌细胞GBC
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SD和SGC
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996中各糖酵解限速酶(PDK1、PKM2和HK
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2)的蛋白表达水平；
[0014]图2展示了PCBP2在胆囊癌组织中表达上调及促进胆囊癌的增殖作用；其中，A为通过TCGA公共数据库证实了PCBP2在胆道肿瘤组织中表达上调；B为36对胆囊癌及癌旁组织中运用qRT
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PCR方法证实了PCBP2的mRNA水平在肿瘤组织中表达上调；C为免疫组化方法证实了PCBP2的蛋白水平在肿瘤组织中表达上调；D为各胆囊癌细胞株中(EH
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GB1、NOZ、GBC
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SD、SGC
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996)PCBP2的基因表达情况；E为在胆囊癌细胞SGC
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996上构建敲减PCBP2，在GBC
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SD上过表达PCBP2的转染效率图；F为CCK
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8实验证实敲减PCBP2能降低胆囊癌细胞SGC
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996的活力，过表达PCBP2能促进胆囊癌细胞GBC
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SD的细胞活力；G为集落形成实验证实敲减PCBP2能降低胆囊癌细胞SGC
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996的增殖能力，过表达PCBP2能促进胆囊癌细胞GBC
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SD的增殖能力；H为核质分离实验证实PCBP2在胆囊癌细胞SGC
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996和GBC
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SD的细胞核和细胞质中均有表达；
[0015]图3展示了PCBP2能够调控模拟禁食饮食抑制胆囊癌增殖的作用；其中，A为通过免疫印迹实验与qRT
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PCR实验证实经模拟禁食饮食处理后的胆囊癌细胞SGC
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996和GBC
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SD中PCBP2蛋白及mRNA表达水平降低；B为通过免疫印迹实验与qRT
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PCR实验证实模拟禁食饮食能进一步抑制敲低或过表达后PCBP2的胆囊癌细胞SGC
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996中PCBP2蛋白与mRNA水平；C为通过免疫印迹实验与qRT
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PCR实验证实模拟禁食饮食能进一步抑制敲低或过表达后PCBP2的胆囊癌细胞GBC
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SD中PCBP2蛋白与mRNA水平；D为CCK
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8实验证实敲低PCBP2比单独禁食更能降低胆囊癌细胞SGC
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996和GBC
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SD的活力，过表达PCBP2可以增加细胞活力，但禁食减少了PCBP2过表达对胆囊癌细胞活力的影响；E为集落形成实验证实敲低PCBP2比单独禁食更能降低胆囊癌细胞SGC
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996和GBC
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SD的增殖能力，过表达PCBP2可以增加细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.PCBP2抑制剂在制备促进模拟禁食饮食治疗胆囊癌的药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述PCBP2抑制剂包括PCBP2基因特异性的RNAi、microRNA、shRNA、siRNA，或PCBP2蛋白的抗体、活性抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈盛，陶颖，巩子君，昝睿，郑博豪，锁涛，刘厚宝，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：