针对人B7-H3的抗体及其变体制造技术

本申请提供了特异性识别B7

【技术实现步骤摘要】
针对人B7
‑
H3的抗体及其变体
[0001]交叉引用：
[0002]本申请要求2022年2月25日提交的PCT申请PCT/CN2022/078008的优先权，全部内容通过引用的方式整体并入本文。本申请为2023年2月7日提交的、申请号为202310076398.6的中国专利申请的分案申请，在此通过引用将其全文并入本文。


[0003]本申请涉及能够与B7
‑
H3蛋白特异性结合的抗体或其抗原结合片段以及此类药剂的用途。这些抗体或其抗原结合片段可用于治疗与B7
‑
H3的活性和/或表达相关的疾病。

技术介绍

[0004]B7
‑
H3是2001年发现的单程I型跨膜蛋白，它属于B7家族[Molecular characterization of human 4Ig
‑
B7
‑
H3,a member of the B7 family with four Ig
‑
like domains.J Immunol 172(4):2352
‑
2359]。它在多种癌症中广泛表达，这些癌症包括非小细胞肺癌(NSCLC)、头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)、乳腺癌和其他癌症，但它在正常组织中较低或不可检测[B7
‑
H3:an attractive target for antibody
‑
based immunotherapy.Clin Cancer Res]。同时，已经在低或阴性PD
‑
L1表达实体瘤中发现B7
‑
H3。已经对B7
‑
H3进行了20多项临床试验，包括单克隆抗体(Mab)、双特异性抗体(BsAb)、抗体
‑
药物缀合物(ADC)、嵌合抗原受体(CAR)
‑
T和放射免疫疗法(RIT)。
[0005]在I/II期临床研究中测试了MGC018(NCT03729596)和DS
‑
7300a(NCT04145622)，即针对B7
‑
H3的两种ADC。虽然有ADC靶向B7
‑
H3，但是由于B7
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H3在正常细胞中低表达，尚不清楚是否会引起威胁生命的脱肿瘤中靶毒性[New B7 family checkpoints in human cancers.Mol Cancer Ther 16(7):1203
‑
1211]。靶向B7
‑
H3的RIT(带有碘
‑
131标签的奥布他单抗(omburtamab))已被授予突破性疗法，但迄今为止，其适应症几乎限于脑肿瘤。
[0006]MGA271(依诺妥珠单抗(Enoblituzumab))和DS
‑
5573a是靶向B7
‑
H3的两种抗体。MGA271(依诺妥珠单抗，Macrogenics)是Fc优化的人源化IgG1抗体，并且其安全性特征和功效已经在三项临床研究(NCT01391143、NCT02923180、NCT02982941)中进行了测试，具有B7
‑
H3依赖性抗体依赖性细胞毒性(ADCC)活性的效力。DS
‑
5573a(Daiichi Sankyo Inc)是人源化抗B7
‑
H3 IgG1[Development of DS
‑
5573a:a novel afucosylated mAb directed at B7
‑
H3 with potent antitumor activity.Cancer Sci 107(5):674
‑
681]。DS
‑
5573a的临床试验是一项开放标签I期研究(NCT021925679)，该研究于2014年在晚期实体瘤患者中启动并于2017年出于商业决策而终止。DS
‑
5573a依赖于ADCC和补体依赖性细胞毒性(CDC)活性杀伤肿瘤细胞。
[0007]阿维鲁单抗(Avelumab)(抗PD
‑
L1)、曲妥珠单抗(trastuzumab)(抗HER2)和西妥昔单抗(cetuximab)(抗EGFR)是单克隆抗体，这些抗体很大程度上依赖于ADCC杀伤肿瘤细胞。这些经过批准的药物支持ADCC相关药物在实体瘤治疗中的治疗潜力。另外，根据NCT02923180和NCT02982941的临床结果，MGA271(依诺妥珠单抗)显示了患有表达B7
‑
H3的
复发性或难治性实体瘤的患者的缓解。
[0008]需要开发靶向B7
‑
H3的抗体，这些抗体可依赖于ADCC和CDC杀伤肿瘤诸如NSCLC和HNSCC，并且具有比阳性对照MGA271(依诺妥珠单抗)和DS
‑
5573a更好的功效。

技术实现思路

[0009]在一方面，本披露提供了一种分离的抗体或其抗原结合片段，包含：
[0010]I)重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)分别包含：
[0011]1)重链决定区1(CDR1)，所述重链决定区1(CDR1)包含选自由SEQ ID NO:2、10、18、26、34、42、50、58、66和74组成的组的氨基酸序列；
[0012]2)重链CDR2，所述重链CDR2包含选自由SEQ ID NO:3、11、19、27、35、43、51、59、67和75组成的组的氨基酸序列；以及
[0013]3)重链CDR3，所述重链CDR3包含选自由SEQ ID NO:4、12、20、28、36、44、52、60、68和76组成的组的氨基酸序列；以及
[0014]II)轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)分别包含：
[0015]1)轻链CDR1，所述轻链CDR1包含选自由SEQ ID NO:6、14、22、30、38、46、54、62、70和78组成的组的氨基酸序列；
[0016]2)轻链CDR2，所述轻链CDR2包含选自由SEQ ID NO:7、15、23、31、39、47、55、63、71和79组成的组的氨基酸序列；以及
[0017]3)轻链CDR3，所述轻链CDR3包含选自由SEQ ID NO:8、16、24、32、40、48、56、64、72和80组成的组的氨基酸序列，
[0018]其中所述抗体或其抗原结合片段能够与B7
‑
H3，优选人B7
‑
H3特异性结合。
[0019]在一些实施例中，在所述分离的抗体或其抗原结合片段中，1)所述VH包含分别具有SEQ ID NO:2、3和4的氨基酸序列的重链CDR1、CDR2和CDR3序列，并且所述VL包含分别具有SEQ ID NO:6、7和8的氨基酸序列的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，包含：I)重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)分别包含：1)重链决定区1(CDR1)，所述重链决定区1(CDR1)的氨基酸序列如SEQ ID NO:74所示；2)重链CDR2，所述重链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO:75所示；以及3)重链CDR3，所述重链CDR3的氨基酸序列为SEQ ID NO:76所示；以及II)轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)分别包含：1)轻链CDR1，所述轻链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO:78所示；2)轻链CDR2，所述轻链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO:79所示；以及3)轻链CDR3，所述轻链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO:80所示，其中所述抗体或其抗原结合片段能够与人B7
‑
H3特异性结合。2.如权利要求1中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中：所述VH包含SEQ ID NO:73所示氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO:77所示氨基酸序列。3.如权利要求1
‑
2中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段与表达所述B7
‑
H3的细胞之间的结合的EC
50
为10
‑9M至10
‑
12
M。4.如权利要求1
‑
3中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段与表达所述B7
‑
H3的细胞之间的结合具有低于参考抗体MGA271的EC
50
。5.如权利要求1
‑
4中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是小鼠抗体、嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。6.如权利要求1
‑
5中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述人源化抗体的VH包含SEQ ID NO:87所示氨基酸序列，所述人源化抗体的VL包含SEQ ID NO:91所示氨基酸序列。7.如权利要求1
‑
6中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH与免疫球蛋白的重链恒定区融合。8.如权利要求1
‑
7中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述重链恒定区来自人IgG1。9.如权利要求1
‑
8中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述重链恒定区包含增强所述抗体的ADCC效应的修饰。10.如权利要求1
‑
9中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述重链恒定区包含突变K214R、...

【专利技术属性】
技术研发人员：周艺，李中道，方卓，贾文双，邵翠英，
申请(专利权)人：南京蓬勃生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：