一种血液灌流器用改性聚苯乙烯吸附树脂及其制备方法技术

本发明专利技术属于改性聚苯乙烯树脂制备技术领域，特别涉及一种血液灌流器用改性聚苯乙烯吸附树脂及其制备方法。该方法通过四个步骤对聚苯乙烯树脂进行处理，通过对聚苯乙烯树脂进行预处理、表面活化以及镀膜，增强聚苯乙烯树脂的活性，然后对聚苯乙烯树脂进行表面羧基化、偶联聚半胱氨酸，最后固定PDGFA单抗，得到固定有PDGFA单抗的改性聚苯乙烯吸附树脂，此种改性聚苯乙烯吸附树脂能够有效降低血液中的PDGFA含量，而且整个制备方法的步骤中不会引入过多无关的化学试剂，生物相容性好。生物相容性好。

【技术实现步骤摘要】
一种血液灌流器用改性聚苯乙烯吸附树脂及其制备方法


[0001]本专利技术属于改性聚苯乙烯树脂制备
，特别涉及一种血液灌流器用改性聚苯乙烯吸附树脂及其制备方法。

技术介绍

[0002]血液灌流是将患者的血液引入装有固态吸附剂的灌流器中，通过吸附作用，清除血液中透析不能清除的外源性或内源性毒素、药物或代谢废物的一种血液净化技术。主要用于抢救药物和毒物中毒，也可与血液透析合用以清除慢性肾功能衰竭维持性透析患者体内的大分子毒素。
[0003]由于内部填充的固态吸附剂材质均为聚苯乙烯树脂或活性炭，目前大多依赖于供应商的直接供应，使用者的自主研发较少，吸附剂所能吸附的物质类型有限，被吸附的物质分子量不能较为准确的控制，使得血液灌流器大多为非特异性吸附。血液灌流器在临床的使用过程中，经常会发生将某些致病物质有效吸附的同时，把分子量大小近似的其余体液成分也一并吸附的情况。这样会导致人体有益体液成分的丢失，引起一些潜在的健康风险。
[0004]目前有部分使用者对固态吸附剂进行了不同程度的修饰和再加工，但吸附树脂还是局限于树脂供应商的本身产品属性，在实际临床应用时难以灵活选择。现有的大多吸附剂供应商所提供的吸附剂吸附树脂基材批次间差异较大，生物相容性不稳定，吸附树脂与血液中有害物质的接触不完全，吸附效率不高。且由于现有的修饰或改性方法对树脂进行化学键的修饰时都会引入多种化学试剂，部分试剂有毒有害或化学性能不稳定，生物相容性的问题没有得到很好的解决。
[0005]特发性肺纤维化（IPF）是一种慢性、进行性、纤维化性间质性肺炎，组织学和（或）胸部HRCT表现为普通型间质性肺炎（UIP），病因不清，好发于老年人。IPF诊断后中位生存期为2
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3年，大多数病人表现为缓慢逐步可预见的肺功能下降。IPF不能治愈，临床上的治疗目的是延缓疾病进展，改善生活质量，延长生存期。临床治疗主要是抗纤维化治疗、非药物治疗、肺移植。抗纤维化治疗很重要的机制是抑制血小板衍化生长因子受体（PDGFR）、血管内皮生长因子受体（VEGFR）和成纤维细胞生长因子受体（FGFR）。布罗索尤单抗可特异性地结合血液中的FGFR，从而起到抗纤维化治疗，改善疾病进展的作用。然而单抗类药物进入体内的过敏、输注反应、全身性血管炎、自身免疫样综合征等相关副作用难以避免，某些患者由于难以耐受而停药，且非人源性单抗反复多次输注后体内会产生抗体，导致疗效下降。

技术实现思路

[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术提出一种血液灌流器用改性聚苯乙烯吸附树脂及其制备方法，本专利技术通过在聚苯乙烯树脂颗粒上固定PDGFA单抗，制备成适用于血液灌流器的吸附树脂，血液中的PDGFA流经以本专利技术所制备的固定有PDGFA单抗的改性聚苯乙烯吸附树脂时，改性聚苯乙烯吸附树脂所固定的PDGFA单抗与PDGFA特异性结合，来降低血液中的PDGFA含量，从而达到治疗相关疾病的作用。
[0007]本专利技术的技术方案是这样实现的：一种血液灌流器用改性聚苯乙烯吸附树脂及其制备方法，包括以下步骤：步骤1：聚苯乙烯树脂预处理、表面活化及镀膜将聚苯乙烯树脂置于二氯甲烷中搅拌浸泡，再用季戊四醇溶液进行洗滤，其中季戊四醇与蒸馏水的体积比=（3
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3.5）:1，蒸馏水洗滤后，真空干燥至恒重，将上述产物置于等离子镀膜机中，进行氩气等离子镀膜，镀膜完成后，聚苯乙烯树脂的离子膜厚度为20
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30nm；步骤2：聚苯乙烯树脂表面羧基化向反应瓶中分别加入邻苯二甲酸酐粉末、硝基苯的二氯甲烷溶液，其中二氯甲烷与硝基苯体积比=（7.5
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9）:1，邻苯二甲酸酐与硝基苯的摩尔比=（2.5
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3）：1，超声振荡后加入步骤1中得到的镀膜完成后的聚苯乙烯树脂，向反应瓶中通纯氮，在搅拌状态下加入氯化铝，其中，聚苯乙烯树脂、氯化铝和硝基苯的摩尔比=1:（2.5
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3.5）:（1
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1.5），持续通纯氮后在常压下进行反应，反应完成后，将反应瓶中依次加入10%稀盐酸、蒸馏水、四氢呋喃、甲醇进行洗滤，洗滤后，真空干燥至恒重；步骤3：羧基偶联聚半胱氨酸将步骤2中得到的羧基化的聚苯乙烯树脂，使用15mM MES 6.0进行清洗和浸泡，然后分别加入15
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25mg/mL的EDC、20
‑
35mg/mL的PEG
‑
聚半胱氨酸
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PLA，立即混匀，在25℃搅拌状态下反应30
‑
45min；步骤4：固定PDGFA单抗将步骤3中得到的偶联聚半胱氨酸的聚苯乙烯树脂滤出，使用足量冷的15mM MES 6.0溶液进行清洗和浸泡，然后加入2
‑
4.5mg/mL的PDGFA单抗，在25℃混匀条件下，反应12
‑
18小时，反应完成后将产物滤出，用缓冲液10mMPBS7.4+0.1%Tween20重复清洗，然后用蒸馏水清洗后加入到缓冲液10mMPBS7.4+0.1%Tween20+0.1%BSA+0.01%Casein中，室温条件下混匀反应后，将产物滤出，水洗后真空干燥，得到表面固定有PDGFA单抗的改性聚苯乙烯吸附树脂。
[0008]通过上述技术方案，步骤1中通过使用二氯甲烷对聚苯乙烯树脂进行预处理，从而消除聚苯乙烯树脂表面残留的杂质以及残留的试剂，使得各种化学试剂不会在聚苯乙烯树脂的孔径中残留，方便后续对聚苯乙烯树脂进行活化。季戊四醇溶液能够对聚苯乙烯树脂进行表面活化，因为聚苯乙烯树脂是惰性的，经过活化后聚苯乙烯树脂的表面才能够与其他物质发生反应，等离子镀膜机能够对活化后的聚苯乙烯树脂进行镀膜，调节聚苯乙烯树脂表面的离子膜厚度，使得聚苯乙烯树脂的表面容易发生羧基化反应。
[0009]步骤2中，邻苯二甲酸酐在硝基苯作用下生成酰基，从而与聚苯乙烯树脂进行傅氏酰基化，傅氏酰基化的目的是使得聚苯乙烯树脂表面连接上酰基，并在氯化铝催化下发生羧基化。氯化铝作为催化剂，催化镀膜后的聚苯乙烯树脂与邻苯二甲酸酐进行表面羧基化反应。邻苯二甲酸酐与聚苯乙烯树脂发生羧基化反应，反应过程中需要硝基苯来温和氧化，二氯甲烷是作为溶剂存在。
[0010]聚苯乙烯树脂表面羧基化后能够通过羧基与PEG
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聚半胱氨酸
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PLA进行偶联，反应过程中通纯氮的目的是防止发生氧化反应，10%稀盐酸进行洗滤能够有效洗去聚苯乙烯树脂溶液中的有机物残留。
[0011]步骤3中，15mM MES 6.0能够调节羧基化的聚苯乙烯树脂的PH值，EDC作为交联剂，
能够在羧基化的聚苯乙烯树脂表面交联上PEG
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聚半胱氨酸
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PLA，EDC提供巯基，使得聚苯乙烯树脂表面的羧基与PEG
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聚半胱氨酸
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PLA上的PEG反应更加完全。聚半胱氨酸含有巯基，EDC作为交联剂的作用类似于，让PEG
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聚半胱氨酸
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PLA分子手本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血液灌流器用改性聚苯乙烯吸附树脂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：聚苯乙烯树脂预处理、表面活化及镀膜将聚苯乙烯树脂置于二氯甲烷中搅拌浸泡，再用季戊四醇溶液进行洗滤，其中季戊四醇与蒸馏水的体积比=（3
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3.5）:1，蒸馏水洗滤后，真空干燥至恒重，将上述产物置于等离子镀膜机中，进行氩气等离子镀膜，镀膜完成后，聚苯乙烯树脂的离子膜厚度为20
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30nm；步骤2：聚苯乙烯树脂表面羧基化向反应瓶中分别加入邻苯二甲酸酐粉末、硝基苯的二氯甲烷溶液，其中二氯甲烷与硝基苯体积比=（7.5
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9）:1，邻苯二甲酸酐与硝基苯的摩尔比=（2.5
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3）：1，超声振荡后加入步骤1中得到的镀膜完成后的聚苯乙烯树脂，向反应瓶中通纯氮，在搅拌状态下加入氯化铝，其中，聚苯乙烯树脂、氯化铝和硝基苯的摩尔比=1:（2.5
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3.5）:（1
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1.5），持续通纯氮后在常压下进行反应，反应完成后，将反应瓶中依次加入10%稀盐酸、蒸馏水、四氢呋喃、甲醇进行洗滤，洗滤后，真空干燥至恒重；步骤3：羧基偶联聚半胱氨酸将步骤2中得到的羧基化的聚苯乙烯树脂，使用15mM MES 6.0进行清洗和浸泡，然后分别加入15
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25mg/mL的EDC、20
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35mg/mL的PEG
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聚半胱氨酸
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PLA，立即混匀，在25℃搅拌状态下反应30
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45min；步骤4：固定PDGFA单抗将步骤3中得到的偶联聚半胱氨酸的聚苯乙烯树脂滤出，使用足量冷的15mM MES 6.0溶液进行清洗和浸泡，然后加入2
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4.5mg/mL的PDGFA单抗，在25℃混匀条件下，反应12
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18小时，反应完成后将产物滤出，用缓冲液10mMPBS7.4+0.1%Tween20重复清洗，然后用蒸馏水清洗后加入到缓冲液10mMPBS7.4+0.1%Tween20+0.1%BSA+0.01%Casein中，室温条件下混匀反应后，将产物滤出，水洗后真空干燥，得到表面固定有PDGFA单抗的改性聚苯乙烯吸附树脂。2.根据权利要求1所述的一种血液灌流器用改性聚苯乙烯吸附...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆雪峰，祖良鹏，王天赐，
申请(专利权)人：江苏恰瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：