本申请公开了一种海洋土曲霉发酵培养基，包含蔗糖28～40g/L、可溶性淀粉5～15g/L、酵母提取物2～6g/L、花生饼粉8～18g/L、谷氨酸钠10～18g/L、苯丙氨酸5～10g/L、K2HPO4·
【技术实现步骤摘要】
0.1～1.0g/L、MgSO4·
7H2O 0.1～1.0g/L。
[0008]作为进一步优选的方案，本申请实施例中所述的海洋土曲霉发酵培养基采用离子水作为溶剂。
[0009]作为进一步优选的方案，本申请实施例中，所述的海洋土曲霉发酵培养基包含蔗糖20～35g/L、可溶性淀粉10～15g/L、酵母提取物3～5g/L、花生饼粉10～15g/L、谷氨酸钠12～15g/L、苯丙氨酸5～8g/L、K2HPO4·
3H2O 0.2～0.6g/L、MgSO4·
7H2O 0.2～0.6g/L。
[0010]本申请所述的海洋土曲霉发酵培养基在利用海洋土曲霉发酵生产BTL
‑
I中的应用。
[0011]本申请还提供了一种利用海洋土曲霉发酵生产BTL
‑
I的工艺，在该工艺中，通过对发酵培养基的组成和配比进行优化设计，并调整培养条件以实现BTL
‑
I产量的大幅提高，为BTL
‑
I大规模生产提供条件。
[0012]所述工艺包括菌种培养：配制活化培养基，接入土曲霉以获得发酵菌种；
[0013]配置发酵液：按照权利要求1～3任一项所述的发酵培养基组成将蔗糖、可溶性淀粉、酵母提取物、花生饼粉、谷氨酸钠、苯丙氨酸、K2HPO4·
3H2O、MgSO4·
7H2O混合后加入去离子水，得到发酵培养基；
[0014]发酵：去上述培养基，调节pH为6.5～6.9，灭菌后接入二代菌种，摇床发酵；
[0015]发酵液处理：将发酵液经抽滤分离菌体和上清液，菌体干燥后经甲醇超声破碎，上清液经乙酸乙酯萃取，提取纯化后得到目标代谢产物。
[0016]作为进一步优选的方案，本申请实施例中，上述工艺所述的菌种培养过程中，所采用的土曲霉为土曲霉H768，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2017121，保藏地址为中国，武汉，武汉大学，保藏日期为2017年3月15日。
[0017]作为进一步优选的方案，本申请实施例中，上述工艺所述的发酵过程中，二代菌种的接种量为0.2～0.8ml(1％，v/v)。
[0018]作为进一步优选的方案，本申请实施例中，上述工艺摇床发酵时。温度为27～28℃，摇床转速为100～300rpm，发酵时间为5～10天。
[0019]与现有技术相比，本申请的有益效果是：
[0020]1.本申请所述的海洋土曲霉发酵培养基通过对组成和配比进行调整和优化，应用于土曲霉的发酵，提高了培养基对土曲霉的发酵效果。
[0021]2.本申请所述的海洋土曲霉发酵培养基采用去离子水为溶剂，不额外添加任何表面活性剂和离子盐。
[0022]3.本申请所述的利用海洋土曲霉发酵生产BTL
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I的工艺中，通过培养基成分、初始pH、发酵温度、发酵时间等条件进行了优化和调整，大幅提高了BTL
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I的产量，实现了BTL
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I的规模化制备。
附图说明
[0023]图1土曲霉H768的生长曲线。
[0024]图2碳源种类对BTL
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I产量的影响。
[0025]图3蔗糖添加浓度对BTL
‑
I产量的影响。
[0026]图4可溶性淀粉添加浓度对BTL
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I产量的影响。
[0027]图5氮源种类对BTL
‑
I产量的影响。
[0028]图6花生饼粉添加浓度对BTL
‑
I产量的影响。
[0029]图7谷氨酸钠添加浓度对BTL
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I产量的影响。
[0030]图8磷酸盐种类对BTL
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I产量的影响。
[0031]图9表面活性剂种类对BTL
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I产量的影响。
[0032]图10镁盐添加浓度对BTL
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I产量的影响。
[0033]图11前体种类及添加浓度对BTL
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I产量的影响。
[0034]图12温度、初始pH两因素对土曲霉H768摇瓶发酵生产BTL
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I浓度影响的响应曲面三维图。
[0035]图13蔗糖
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酵母提取物、蔗糖
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花生饼粉对土曲霉H768摇瓶发酵生产BTL
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I浓度影响的响应曲面三维图。
具体实施方式
[0036]为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本申请实施例，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
[0037]本申请中说明书和权利要求所涉及的术语“包括”以及与其等同的其他描述方式，均在于覆盖不排他的包含，既包含了已明确在说明书和权利要求书中描述的内容，也可以包含未在说明书和权利要求书中描述，但为产品、方法或结构中所固有的步骤或单元。
[0038]在本申请中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所采用的设备和原料等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
[0039]本申请实施例提供一种海洋土曲霉发酵培养基，包含蔗糖28～40g/L、可溶性淀粉5～15g/L、酵母提取物2～6g/L、花生饼粉8～18g/L、谷氨酸钠10～18g/L、苯丙氨酸5～10g/L、K2HPO4·
3H2O0.1～1.0g/L、MgSO4·
7H2O 0.1～1.0g/L。在上述方案中，通过蔗糖为主，可溶性淀粉为辅作为发酵时的碳源，替代了传统以葡萄糖作为单一碳源的培养液，避免微生物快速利用速效碳源从而大量繁殖导致发酵过程不可控；采用花生饼粉作为主要氮源，酵母提取物作为补充氮源，具有经济、高效的特点。
[0040]作为进一步优选的方案，本申请实施例中所述的海洋土曲霉发酵培养基采用去离子水作为溶剂。
[0041]作为进一步优选的方案，本申请实施例中，所述的海洋土曲霉发酵培养基包含蔗糖20～35g/L、可溶性淀粉10～15g/L、酵母提取物3～5g/L、花生饼粉10～15g/L、谷氨酸钠12～15g/L、苯丙氨酸5～8g/L、K2HPO4·
3H2O 0.2～0.6g/L、MgSO4·
7H2O 0.2～0.6g/L。
[0042]本申请所述的海洋土曲霉发酵培养基在利用海洋土曲霉发酵生产BTL
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I中的应用。
[0043]本申请还提供了一种利用海洋土曲霉发酵生产BTL
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I的工艺，在该工艺中，通过对发酵培养基的组成和配比进行优化设计，并调整培养条件以实现BTL
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I产量的大幅提高，为BTL
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I大规模生产本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种海洋土曲霉发酵培养基，其特征在于，包含蔗糖28～40g/L、可溶性淀粉5～15g/L、酵母提取物2～6g/L、花生饼粉8～18g/L、谷氨酸钠10～18g/L、苯丙氨酸5～10g/L、K2HPO4·
3H2O 0.1～1.0g/L、MgSO4·
7H2O 0.1～1.0g/L。2.根据权利要求1所述的海洋土曲霉发酵培养基，其特征在于，其采用去离子水作为溶剂。3.根据权利要求1所述的海洋土曲霉发酵培养基，其特征在于，包含蔗糖20～35g/L、可溶性淀粉10～15g/L、酵母提取物3～5g/L、花生饼粉10～15g/L、谷氨酸钠12～15g/L、苯丙氨酸5～8g/L、K2HPO4·
3H2O 0.2～0.6g/L、MgSO4·
7H2O 0.2～0.6g/L。4.如权利要求1～3任一项所述的海洋土曲霉发酵培养基在利用海洋土曲霉发酵生产丁内酯
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I中的应用。5.利用海洋土曲霉发酵生产丁内酯
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I的工艺，其特征在于，包括菌种培养：配制活...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨献文，胡曼宜，徐琳，罗联忠，谢春兰，
申请(专利权)人：自然资源部第三海洋研究所，
类型：发明
国别省市：
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