【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医用材料领域，具体涉及一种含植物乳植杆菌发酵上清液水凝胶伤口敷料及其制备方法。
技术介绍
1、伤口敷料，是包扎伤口的用品，用以覆盖疮、伤口或其他损害的材料。伤口敷料的种类按与伤口作用的机制主要分为被动型敷料、相互作用型敷料与生物活性敷料(密闭型敷料)。被动型敷料被动覆盖创面和吸收渗出物，为创面提供有限的保护作用；相互作用型敷料在敷料与创面之间存在着多种形式的相互作用，如吸收渗出液和有毒物质、允许气体交换从而为愈合创造良好环境、依靠阻隔性外层结构防止环境中微生物侵入，预防创面交叉感染等；生物活性敷料的共同特点是能够防止创面干燥，因而又被称为密闭型敷料，主要选用的材料有胶原、几丁质/壳聚糖、海藻酸钙等。该种类的凝胶具有生物相容性、较好的吸水性、透气性、黏附性和抗菌、止血作用。它既能吸收创面渗液，保证充分引流，又能将渗液部分保留在敷料中，维持一个仿效创面生理性愈合的局部湿润环境，有利于伤口肉芽组织和上皮细胞再生，加速创面愈合。在合成敷料中，还可以加入一些有利于创面愈合的物质，如药物、细胞因子、生长因子等，形成药物敷料、细胞因子敷料、生长因子敷料等各种敷料，从而增强伤口敷料抑制伤口处细菌增殖、促进伤口愈合的功效。
2、传统敷料主要是干纱布和油纱，只能起到简单的物理屏蔽作用，且容易与伤口粘合导致换药时造成二次伤害。同时，传统敷料还存在着透气性不佳，容易引发细菌滋生和伤口感染等问题。水凝胶是一种以大量水分子为分散介质的、合成或天然来源的、具有三维亲水网络的高分子材料。随着湿性愈合理论被临床的广泛认可，水凝胶敷料
3、甲壳素，又名甲壳质、几丁质，化学名称为(1,4)-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-d-葡聚糖。是一种天然高分子多糖，大量存在于海洋节肢动物，如虾、蟹的甲壳之中。甲壳素在自然界每年的生物合成量仅次于纤维素，是地球上第二大可再生资源。甲壳素脱去c2上的乙酰基后形成的产物被称为壳聚糖。由于壳聚糖具有良好的抗菌、止血、消炎作用，并且具有良好的生物相容性与生物可降解性，已经在医用材料领域中得到了广泛应用。水凝胶本身质地柔软，与伤口充分接触能创造一个适宜的湿润环境，有利于伤口的愈合。通过利用壳聚糖水凝胶研制的医用敷料具有柔软度高、使用舒适等优势，同时可以减轻痛感和控制出血量，部分水凝胶对抗菌消炎还可以起到作用。另外，在受伤部位愈合与新皮肤再生中，壳聚糖水凝胶可以自行降解，更容易机体吸收。
4、近年来，壳聚糖水凝胶产品的应用市场正在逐年增大，在壳聚糖水凝胶医用敷料的生产及其应用过程中，往往都会遇到两大难题。(1)壳聚糖本身难以溶解，在水溶液中不溶，仅能溶于稀有机酸(醋酸、乳酸等)及少数无机酸(如盐酸)，且溶解时需要长时间搅拌；(2)壳聚糖分子的交联主要由两种类型的交联剂催化：一种是以β-甘油磷酸钠为代表的物理交联剂，该种交联剂交联产生的壳聚糖水凝胶存在机械性能差的问题；另一种是以戊二醛为代表的化学交联剂，该种交联剂交联产生的水凝胶机械性能较好，但化学交联剂普遍存在较强的生物毒性，在应用时会产生不利影响。
5、为了解决壳聚糖溶解性差的问题，目前采取的措施主要是采用稀醋酸长时间搅拌并超声使壳聚糖溶解的方法。这种方法耗时长、耗能高，且会在体系中额外引入醋酸，不利于水凝胶的稳定。植物乳植杆菌(l.plantarum)是一种革兰氏阳性、短杆状、厌氧或兼性厌氧、耐酸、异型发酵的乳杆菌群，发酵能产生乙酸、琥珀酸、乳酸等多种有机酸。植物乳植杆菌的发酵产物已被证实能够减少溃疡伤口的细菌负荷、中性粒细胞、凋亡和坏死细胞的数量，并有效促进伤口愈合。由于多种有机酸的存在，植物乳植杆菌的发酵上清液能够促进壳聚糖的溶解。另一方面，有充分的证据表明皮肤微生物群与伤口愈合密切相关。这些微生物产生生物活性化合物，以调节免疫反应、改变细胞浸润，并在伤口中表达趋化因子。近年来国内外学者对益生菌及其代谢产物的功能研究逐渐增加，发现益生菌来源的外泌物具有巨大治疗潜力，其可上调生长因子的表达，促进血管生成、细胞迁移、增殖和再上皮化过程，从而加速伤口闭合。此外，其还可通过阻止成纤维细胞的分化来减少伤口中瘢痕的含量。
技术实现思路
1、基于此，本专利技术以植物乳植杆菌hj-s2经过发酵提取代谢产物，将其与壳聚糖水凝胶相结合制备具有促进伤口愈合的医用水凝胶产品。通过体外和体内实验均表明，它具有优异的抗有害细菌能力和抗炎能力，促进感染伤口闭合和新组织再生，本专利技术可为益生菌在感染伤口的临床管理中的应用开辟新途径。
2、一方面，本专利技术提供了一种植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶，其中，所述植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶包含植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖、京尼平。
3、在一些实施例中，所述植物乳植杆菌发酵上清液通过以下方法制备：
4、(1)挑取植物乳植杆菌单菌落，接入装有mrs培养基中，37℃下、摇床培养过夜；
5、(2)取步骤(1)菌液，接种至装有mrs培养基富集培养；
6、(3)将步骤(2)获得的富集培养液离心过滤后获得植物乳植杆菌上清液。
7、在一些实施例中，所述植物乳植杆菌为植物乳植杆菌hj-s2。
8、在一些实施例中，所述植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖与京尼平的体积质量比为：100ml﹕(1～3)g﹕(0.02～0.1)g；
9、在一些实施例中，所述植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖与京尼平的体积质量比为：100ml﹕(1～2)g﹕(0.025～0.5)g。
10、在一些实施例中，所述植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖与京尼平的体积质量比为：100ml﹕2g﹕0.05g。
11、另一方面，本专利技术提供了一种制备所述植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶的制备方法，其中，所述方法包括：
12、(a)制备植物乳植杆菌上清液；
13、(b)制备壳聚糖溶液；将壳聚糖加入步骤(a)制备的植物乳植杆菌上清液中搅拌制得壳聚糖溶液；
14、(c)制备京尼平溶液；
15、(d)将步骤(b)制备的壳聚糖溶液、步骤(c)制备的京尼平溶液进行混合交联获得植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶。
16、在一些实施例中，所述制备植物乳植杆菌上清液是通过：
17、(i)挑取植物乳植杆菌单菌落，接入装有mrs培养基中，37℃下、摇床培养过夜；(ii)取步骤(i)菌液，接种至装有mrs培养基富集培养；(iii)将步骤(ii)获得的富集培养液离心过滤后获得植物乳植杆菌上清液。
18、在一些实施例中，所述壳聚糖溶液是通过称取壳聚糖，在植物乳植杆菌发酵上清液中磁力搅拌过夜，得到的质量分数为1～3％的壳聚糖溶液。
19、在一些实施例中，所述壳聚糖溶液是通过称取壳聚糖，在植物乳植杆菌发酵上清液中磁力搅拌过夜，得到的质量分数为1～2％的壳聚糖溶液。
20、在一些实施例中，所述壳聚糖溶液是通过称取壳聚糖，在植物乳植杆菌发酵上清液中磁力搅拌过夜，得到的质量分数为2％的壳聚糖溶液本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶，其中，所述植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶包含植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖、京尼平。
2.根据权利要求1所述的植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶，其特征在于，所述植物乳植杆菌发酵上清液通过以下方法制备：
3.根据权利要求1或2所述的植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶，其特征在于，所述植物乳植杆菌为植物乳植杆菌HJ-S2。
4.根据权利要求1所述的植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶，其特征在于，所述植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖与京尼平的体积质量比为：100mL﹕(1～3)g﹕(0.02～0.1)g；优选地，所述植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖与京尼平的体积质量比为：100mL﹕2g﹕0.05g。
5.一种权利要求1-4任一项所述植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶的制备方法，其中，所述方法包括：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述制备植物乳植杆菌上清液是通过：
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖溶液是通过称取壳聚糖，在植物乳植杆菌发酵上清液中磁力搅拌过夜，得到的质量分数为1～3％的壳聚糖
8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述京尼平溶液是通过称取京尼平粉末，溶于无水乙醇，得到浓度为2～10mg/mL的京尼平溶液。
9.根据权利要求5-8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述混合交联是将体积比为(5～15)﹕1的壳聚糖溶液和京尼平溶液混合均匀后，在37℃下反应20～30h获得；优选地，所述混合交联是将体积比为10﹕1的壳聚糖溶液和京尼平溶液混合均匀后，在37℃下反应24h获得。
...【技术特征摘要】
1.一种植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶，其中，所述植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶包含植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖、京尼平。
2.根据权利要求1所述的植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶，其特征在于，所述植物乳植杆菌发酵上清液通过以下方法制备：
3.根据权利要求1或2所述的植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶，其特征在于，所述植物乳植杆菌为植物乳植杆菌hj-s2。
4.根据权利要求1所述的植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶，其特征在于，所述植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖与京尼平的体积质量比为：100ml﹕(1～3)g﹕(0.02～0.1)g；优选地，所述植物乳植杆菌发酵上清液、壳聚糖与京尼平的体积质量比为：100ml﹕2g﹕0.05g。
5.一种权利要求1-4任一项所述植物乳植杆菌壳聚糖水凝胶的制备方法，...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴鹏，李奕震，唐旭，杨隆河，陈小凤，王灵，
申请(专利权)人：自然资源部第三海洋研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。