黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记，特异性PCR扩增引物对序列如下：正向引物

【技术实现步骤摘要】
黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记及其应用


[0001]本专利技术涉及食用菌
，具体地，涉及黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记及其应用。

技术介绍

[0002]鹿茸菇，学名鹿茸菇(Lyophyllumdecastes，属担子菌亚门(Basidiomycotina)伞菌目(Agaricales)白蘑科(Tricholomataceae)离褶伞属(Lyophyllum)。在欧洲被称为Friedchickenmushroom，又名“路基蘑”“铁道蘑”“荷叶蘑”等；在中国因其切片与名贵中药鹿茸相似而得名鹿茸菇，为食药兼用的大型真菌。
[0003]目前市面上的鹿茸菇均为浅灰色品系，主要存在以下问题：1、子实体色泽单一，同质化明显，产品辨识度不高；2、培养及栽培周期较长；3、纤维较粗，口感不够细腻。这些问题无疑都最终导致了生产成本的增加，降低了产品的市场竞争力。
[0004]黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株具有色泽独特，生长周期短，子实体纤维相对紧实细腻，口感脆嫩等特点，产品辨识度高，且周期较短，耐二氧化碳，保藏时间更长等特点，适宜工厂化推广种植。
[0005]随着分子生物学的发展，分子标记法越来越广泛地用于菌种的鉴别。SCAR(Sequence
‑
characterized Amplified Region)标记是一种十分稳定的分子标记，能够简便、快速、稳定的进行菌种鉴定，但目前尚未有对黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的SCAR分子标记，以快速鉴定和检测黑褐色鹿茸菇昌里1号。
专利技术内容
[0006]针对现有技术中的缺陷，本专利技术的目的是提供一种黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记，能够用于黑褐色鹿茸菇昌里1号的鉴别和检测，与常规的食用菌菌种检测方法相比，具有检测时间短、准确性高的特点。
[0007]本专利技术第一方面提供了一种黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记，特异性PCR扩增引物对序列如下：
[0008]正向引物
‑
F：5'
‑
CTCTCTCTCTCTCTCCCACTCTCTCACACGCTCCCT
‑
3'和，
[0009]反向引物
‑
R：5'
‑
GGTTCCGATTCCTCCTCTCG
‑
3'；
[0010]分子标记的片段大小为1582bp，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0011]本专利技术第二方面提供了上述黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记在黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的鉴定和检测中的应用。
[0012]与现有技术相比，本专利技术的实施例具有如下的有益效果：本专利技术实施例提供的黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记，能够用于黑褐色鹿茸菇昌里1号的鉴别和检测，与常规的食用菌菌种检测方法(形态学检测、拮抗试验和出菇试验等方法)相比，具有检测时间短、准确性高的特点。
附图说明
[0013]通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本专利技术的其它特征、目的和优点将会变得更明显：
[0014]图1为分子标记的验证的凝胶电泳图；
[0015]图2为SCAR得到的条带序列在GenBank(基因库)中比对结果图；
[0016]图3为设计的分子标记扩增条带在GenBank(基因库)中比对结果图；
[0017]图4为分子标记的验证的凝胶电泳图(重复性验证)；
[0018]图5为分子标记的验证的凝胶电泳图(重复性验证)；
[0019]图6为ISSR
‑
PCR体系变异菌株所对应亲本菌株的多态性条带凝胶电泳图。
具体实施方式
[0020]下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本专利技术，但不以任何形式限制本专利技术。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变化和改进。这些都属于本专利技术的保护范围。
[0021]本专利技术提供了一种分子标记，通过该分子标记能够能够简便、快速、稳定的鉴定和检测黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株，该黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株，属于荷叶离褶伞(Lyophyllum decastes)，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉市武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M2023595，保藏日期为2023年04月23日。
[0022]以下通过具体实施方式对黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记进行进一步描述。
[0023]实施例1
[0024]1试验材料
[0025]1.1供试菌株
[0026]实验品种：黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株(
‘
LY
‑
PPX
‑
BY
’
)，试验编号：B，菌株由江苏品品鲜生物科技股份有限公司提供。
[0027]对照品种：(1)
‘
LY
‑
PPX
‑
QB
’
、试验编号：Q；(2)
‘
LY
‑
SD
’
、试验编号：S；上述两个对照品种的菌株均购自江苏品品鲜生物科技股份有限公司。
[0028]1.2试剂
[0029]2×
HippoQ3fastTaqpremix易禾生物；引物由福州擎科生物科技有限公司合成；DNAmarket上海百赛生物技术股份有限公司；真菌DNA提取mini试剂盒美国OmegaBio
‑
Tek公司；
[0030]1.3仪器：
[0031]主要仪器与设备
[0032][0033]1.4引物：
[0034]从加拿大哥伦比亚大学所公布的100条随机引物中随机随机选取67条引物，分别命名为P1
‑
29、ISSR1
‑
38。
[0035]表1ISSR的引物序列(P1
‑
29)
[0036][0037][0038]表2 ISSR的引物序列(ISSR1
‑
38)
[0039]编号序列编号序列ISSR1GAGAGAGAGAGAGAGAAISSR20AGAGAGAGAGAGAGAGGISSR2GGATGCAACACACACACACISSR21GSGTGTGTGTGTGTGTGTISSR3ACACACACACACACACCISSR22AGAGAGAGAGAGAGAGTISSR4ACACACACACACACACTISSR23TCTCTCTCTCTCTCTCISSR5TCTCTCTCTCTCTCTCCISSR24AGAGAGAGAGAGAGAGYAISSR6GAGAGAGAGAGAGAGAYCISSR25AGAGAGAGAGAGAGAGYCISSR7KKRBRBRACACACACACACISSR26GAGAGAGAGAGAGAGAYCISSR8DBDACACACAC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黑褐色鹿茸菇昌里1号菌株的分子标记，其特征在于，特异性PCR扩增引物对序列如下：正向引物
‑
F：5'
‑
CTCTCTCTCTCTCTCCCACTCTCTCACACGCTCCCT
‑
3'和，反向引物
‑
R...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱昌里，陈长茂，卓智茂，路选，
申请(专利权)人：江苏品品鲜生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：