一种高效低损伤组合式肿瘤组织消化液和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种高效低损伤组合式肿瘤组织消化液和应用，所述肿瘤组织消化液由A类模块消化酶、B类模块消化酶、C类模块消化酶、D类模块消化酶中的一种或多种组合而成；使用A类模块消化酶、B类模块消化酶、C类模块消化酶、D类模块消化酶，根据不同来源或不同质地的肿瘤组织，可选择相应的模块消化酶进行消化，确保不同组织能被尽可能消化解离成细胞且不至于消化过度。于消化过度。于消化过度。

【技术实现步骤摘要】
一种高效低损伤组合式肿瘤组织消化液和应用


[0001]本专利技术涉及体外培养
，特别涉及一种高效低损伤组合式肿瘤组织消化液和应用。

技术介绍

[0002]肿瘤类器官培养是将从生物体获得的一部分肿瘤组织经过处理后，再将其与基质胶混合进行3D培养所得。与传统细胞系相比，肿瘤类器官与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大，作为研究模型，也具有更高的相关性。因此，如何高效、低损伤且具有较大广谱性的将肿瘤细胞完好的从肿瘤组织中解离出来是类器官培养的重中之重。
[0003]目前使用较多的消化液多由胰酶和EDTA(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid，乙二胺四乙酸)，或者由单一胶原酶、金属盐、PMSF(Phenylmethylsulfonyl fluoride，苯甲基磺酰氟)等配制而成。然而胰酶具有非特异消化蛋白特点且消化强度大，消化程度不易控制，在消化过程中容易发生细胞膜破损，甚至细胞裂解，导致细胞获得效率低甚至培养失败；而仅仅使用单一胶原酶，使得可消化组织类型也变得狭窄，且消化力度不够，导致细胞获得率减少，金本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效低损伤组合式肿瘤组织消化液，其特征在于：所述肿瘤组织消化液由A类模块消化酶、B类模块消化酶、C类模块消化酶、D类模块消化酶中的一种或多种组合而成；所述A类模块消化酶由以下组分构成：Ⅱ型胶原酶50~200U/mL、透明质酸酶50~200U/mL、中性蛋白酶50~100U/mL，脱氧核糖核酸酶Ⅰ25~50U/mL、4
‑
(2
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氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐0.1~1mM、马黛茶多糖乙酰氧基甲酯2~6mg/mL，黄芪甲苷20~50μg/mL、4
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羟乙基哌嗪乙磺酸10~25mM、D
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葡萄糖10~20mM、氯化钠90~110mM、氯化钾4~8mM、L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺1~2mM，甘氨酸0.1~0.3mM，pH缓冲对5~25mM，金属络合物0.1~15mM、灭菌超纯水和二甲亚砜溶剂；所述B类模块消化酶由以下组分构成：Ⅳ型胶原酶100~400U/mL、半胱氨酸0.05~0.2mM、灭菌超纯水溶剂；所述C类模块消化酶由以下组分构成：
Ⅴ
型胶原酶100~400U/mL、半胱氨酸0.05~0.2mM、灭菌超纯水溶剂；所述D类模块消化酶由以下组分构成：弹性蛋白酶50~200U/mL、脱氧核糖核酸酶Ⅰ25~50U/mL、半胱氨酸0.05~0.2mM、灭菌超纯水溶剂。2.如权利要求1所述的一种高效低损伤组合式肿瘤组织消化液，其特征在于：所述pH缓冲对由10~20mM的碳酸氢钠和 5~10mM的磷酸二氢钠构成；或所述pH缓冲对由10~20mM的磷酸氢二钠和10~20mM的磷酸二氢钠构成。3.如权利要求1所述的一种高效低损伤组合式肿瘤组织消化液，其特征在于：所述金属络合物由0.5~5mM的枸橼酸钙和1~10mM的枸橼酸锰构成；或所述金属络合物由0.5~5mM的甘氨酸钙和0.5~5mM的枸橼酸镁构成；或所述金属络合物由0.5~5mM的枸橼酸钙、0.5~5mM的枸橼酸镁和0.5~2mM的甘氨酸锌构成。4.如权利要求1所述的一种高效低损伤组合式肿瘤组...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖红江，王丰，解翠薇，张超然，
申请(专利权)人：杭州济扶科技有限公司，
类型：发明
国别省市：