一种与肺腺癌相关的血浆tRFs/tiRNAs标志物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及与肺腺癌相关的血浆tRFs/tiRNAs标志物及其应用，血浆tRFs/tiRNAs标志物为tRF

【技术实现步骤摘要】
一种与肺腺癌相关的血浆tRFs/tiRNAs标志物及其应用


[0001]本专利技术属于生物诊断和医药领域，具体涉及一种与肺腺癌相关的血浆tRFs/tiRNAs标志物及其应用。

技术介绍

[0002]长久以来，肺癌是世界上威胁人类生命最主要的恶性肿瘤，其中发病率最高的亚型是肺腺癌(LUAD)(Sung et al.,2021；Zhang et al.,2020)。尽管治疗取得了长足的进步，但LUAD的5年总生存率(OS)不超过15％，因为很大一部分患者通常在症状变得明显时才被诊断出来(Al
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Dherasi et al.,2021)。虽然低剂量计算机断层扫描(LDCT)是现有的肺腺癌检出率最高的早期诊断技术，但其存在价格高、假阳性率高等明显不足(National Lung Screening Trial Research Team et al.,2011)。传统的血清生物标志物如癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白片段抗原21
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1(CYFRA21
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1)由于特异性不足，往往无法实现肺腺癌的早期诊断(I and Cho,2015)。因此，发现新的早期诊断生物标志物对于攻克肺腺癌具有重要意义，将为肺腺癌的及时发现、早期治疗乃至改善预后提供切实有效的帮助。
[0003]在高通量测序技术的帮助下，大量的非编码RNA(ncRNA)已被证实在癌症的发生和发展中发挥重要作用(Zhou et al.,2011)。转移RNA衍生的非编码小RNA(tsRNAs)受到广泛关注，其主要成员是tRNA衍生片段(tRFs)和tRNA衍生的应激诱导RNAs(tiRNAs)，它们是核酸酶通过对前体或成熟tRNA的特异性切割获得(Xu et al.,2017；Saikia and Hatzoglou,2015)。对tRFs/tiRNAs的研究可以追溯到19世纪70年代，当时Borek E等人发现肿瘤组织中大量的tRFs/tiRNAs来源于高周转的tRNA(Borek et al.,1977)。此后，一系列研究在细胞、组织和体液中检测到了大量的tRFs/tiRNAs(Honda et al.,2015；Sharma et al.,2016；Godoy et al.,2018)，并证明了稳定存在的tRFs/tiRNAs在基因表达、蛋白质翻译和表观遗传修饰中发挥重要的调节功能(Kuscu et al.,2018；Lyons et al.,2020；Watanabe et al.,2011)。最新证据表明，tRFs/tiRNAs在神经系统疾病、代谢疾病和癌症中异常表达(Oberbauer et al.,2018)。具体的说，研究表明tiRNA
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Gln
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CTG
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003、tiRNA
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His
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GTG
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002在晚期卵巢癌组织中异常表达，5'
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tRF
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LysCTT在膀胱癌患者中明显过表达(Chen et al.,2021；Papadimitriou et al.,2020)。此外，Shao Y等表明tRF
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Leu
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CAG在非小细胞肺癌肿瘤组织和细胞系中表达上调，并观察到其在非小细胞肺癌血清中的表达与肿瘤分期进展显著相关(Shao et al.,2017)。Li J等人发现非小细胞肺癌患者血清中tRF
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31
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79MP9P9NH57SD表达升高，且其表达水平与临床分期和淋巴结恶性程度有关(Li et al.,2022)。因此，有理由相信tRFs/tiRNAs可以作为监测癌症的候选分子标志物。
[0004]目前，tRFs/tiRNAs与肺腺癌方面的相关研究尚未见报道，如果能筛选到肺腺癌中异常表达的血浆tRFs/tiRNAs作为生物标志物，并研发相应的诊断试剂盒，对肺腺癌的诊断现状将会有大大的推动。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种与肺腺癌相关的血浆tRFs/tiRNAs标志物以及该标志物在制备用于诊断肺腺癌的试剂盒中的应用。另外，本专利技术还提供与肺腺癌相关的血浆tRFs/tiRNAs标志物的特异性引物及其应用。
[0006]本专利技术的目的通过如下技术方案实现：
[0007]一种与肺腺癌相关的血浆tRFs/tiRNAs标志物，所述的血浆tRFs/tiRNAs标志物为tRF
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Pro
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AGG
‑1‑
M6、tRF
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55:76
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Tyr
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GTA
‑1‑
M2中的一种或组合；所述tRF
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1:29
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Pro
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AGG
‑1‑
M6的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述tRF
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55:76
‑
Tyr
‑
GTA
‑1‑
M2的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
[0008]所述血浆tRFs/tiRNAs标志物在制备用于诊断肺腺癌的试剂盒中的应用。
[0009]本专利技术提供了一种诊断肺腺癌的试剂盒，它包括用于扩增所述tRF
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Pro
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AGG
‑1‑
M6、tRF
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Tyr
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GTA
‑1‑
M2中的一种或组合的引物。
[0010]其中，用于扩增所述tRF
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Pro
‑
AGG
‑1‑
M6的引物的序列为：
[0011]F:5
’‑
GATCGGCTCGTTGGTCTAGG
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3'(SEQ ID NO：3)，
[0012]R:5
’‑
CTTCCGATCTCGAGAATCATACC
‑3’
(SEQ ID NO：4)。
[0013]用于扩增所述tRF
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Tyr
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GTA
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M2的引物的序列为：
[0014]F:5
’‑
CAGTCCGACGATCTCGAATCC
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3'(SEQ ID NO：5)，
[0015]R:5
’‑
GCTCTTCCGATCTTGGTCCTTC
‑3’
(SEQ ID NO：6)。
[0016]所述的试剂盒，它还包括用于扩增内参U6本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种与肺腺癌相关的血浆tRFs/tiRNAs标志物，其特征在于：所述的血浆tRFs/tiRNAs标志物为tRF
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Pro
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AGG
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M6、tRF
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Tyr
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GTA
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M2中的一种或组合；所述tRF
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Pro
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M6的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述tRF
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GTA
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M2的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。2.一种血浆tRFs/tiRNAs标志物在制备用于诊断肺腺癌的试剂盒中的应用，其特征在于：所述的血浆tRFs/tiRNAs标志物为tRF
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M6、tRF
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Tyr
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M2中的一种或组合；所述tRF
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M6的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述tRF
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GTA
‑1‑
M2的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：用于扩增所述tRF
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Pro
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3'，R:5
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CTTCCGATCTCGAGAATCATACC
‑3’
；用于扩增所述tRF
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M2的引物序列为：F:5
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CAGTCCGACGATCTCGAATCC
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3'，R:5
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。4.一种诊断肺腺癌的试剂盒，其特征在于：它包括用于扩增所述tRF
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M6、t...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈良远，尤剑彬，陈发林，黄舒宇，徐驯宇，康艳丽，杨国溜，江颖锋，甘雨涵，
申请(专利权)人：福建省立医院，
类型：发明
国别省市：