用于测定N末端脑利钠肽前体的缓冲液、体系及试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及试剂盒技术领域，公开了用于测定N末端脑利钠肽前体的缓冲液、体系及试剂盒，所述缓冲液含有2

【技术实现步骤摘要】
用于测定N末端脑利钠肽前体的缓冲液、体系及试剂盒


[0001]本专利技术涉及试剂盒
，具体涉及用于测定N末端脑利钠肽前体的缓冲液、体系及试剂盒。

技术介绍

[0002]血清氨基末端
‑
B
‑
型利钠肽前体(N
‑
terminal pro
‑
B
‑
type natriuretic peptede，NT
‑
proBNP)和B型利钠肽(B
‑
type natriuretic peptide，BNP)同属利钠肽家族。两者有相同的生物学来源，但生物学效应和临床意义不完全相同。心肌细胞受刺激后，产生134个氨基酸的前B型利钠肽前体(pre proBNP)，随后形成108个氨基酸的B型利钠肽前体(proBNP)，后者在内切酶的作用下裂解为含有76个氨基酸、无生物学活性的NT
‑
proBNP和含有32个氨基酸、有生物学活性的BNP。NT
‑
proBNP主要由肾小球滤过，因此在血液中的浓度受肾功能影响较大。NT
‑
proBNP体内半衰期为120分钟，体外稳定性强，在心力衰竭患者血液中的浓度较BNP高，因此在某些情况下更利于心力衰竭的诊断。临床上用于心力衰竭的辅助诊断。
[0003]现有的NT
‑
proBNP测定试剂在长期保存时经常出现信号高低受测试温度影响的情况，导致试剂的稳定性较差，影响临床使用。

技术实现思路

>[0004]本专利技术的目的在于提供用于测定N末端脑利钠肽前体的缓冲液，旨在提高现有技术中NT
‑
proBNP测定试剂的稳定性，解决测定临床样本经常出现天间质控不稳定的情况。
[0005]此外，本专利技术还包括含上述缓冲液的磁保体系、酶保体系以及试剂盒。
[0006]本专利技术通过下述技术方案实现：
[0007]用于测定N末端脑利钠肽前体的缓冲液，所述缓冲液含有2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸，所述缓冲液的pH值为6.0
‑
7.0。
[0008]申请人通过试验发现：
[0009]采用2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸缓冲体系用于N末端脑利钠肽前体的测定，相比现有N末端脑利钠肽前体的测定用的磷酸盐缓冲液体系、Tris
‑
盐酸缓冲液体系相比，采用2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸缓冲液体系作为磁保与酶保，其曲线形状低端信号能拉开，灵敏度可以、质控品天间稳定性较好，稳定性明显高于磷酸盐缓冲液体系、Tris
‑
盐酸缓冲液体系。
[0010]且申请人通过试验发现：
[0011]2‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸缓冲液体系的pH值对N末端脑利钠肽前体检测试剂的稳定性影响较大，将2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸缓冲液体系的pH值控制在6.0
‑
7.0，能够使N末端脑利钠肽前体检测试剂的稳定较好。
[0012]进一步地，缓冲液的pH值为6.45
‑
6.55。
[0013]申请人通过试验发现：2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸缓冲液体系的pH值控制在6.5左右，N末端脑利钠肽前体检测试剂的稳定最好
[0014]进一步地，所述缓冲液包括以下组分：
[0015]2‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸和NaOH。
[0016]用于测定N末端脑利钠肽前体的磁保体系，包括上述的缓冲液，还包括NaCl、蔗糖、蛋白保护剂和PC
‑
950，该磁保体系为抗人NT
‑
proBNP特异性单克隆抗体包被磁珠的保护体系。
[0017]进一步地，磁保体系的配方为：
[0018]9.00～10.00g/L 2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸、6～10mL/L 20％NaOH、20.00～30.00g/L NaCl、10.00～30.00g/L蔗糖、5.00～15.00g/L蛋白保护剂和0.5～1.5mL/L PC
‑
950。
[0019]用于测定N末端脑利钠肽前体的酶保体系，包括上述的缓冲液，还包括NaCl、蔗糖、蛋白保护剂、果绿色素、丙三醇、MgCl2和ZnCl2；该酶保体系为碱性磷酸酶活化的抗人NT
‑
proBNP特异性单克隆抗体的保护体系。
[0020]进一步地，酶保体系的配方为：
[0021]9.00～10.00g/L 2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸、6～10mL/L 20％NaOH、5.00～15.00g/LNaCl、5.00～15.00g/L蔗糖、5.00～15.00g/L蛋白保护剂、0.025～0.075g/L果绿色素、5.00～15.00mL/L丙三醇、5.00～10mL/L 0.1M MgCl2、5.00～10mL/L 0.01M ZnCl2。
[0022]用于测定N末端脑利钠肽前体的试剂盒，包括：
[0023]第一试剂，包括上述的磁保体系、抗人NT
‑
proBNP特异性单克隆抗体、链亲和素磁珠、磁珠封闭液；
[0024]第二试剂，包括上述的酶保体系和碱性磷酸酶活化的抗人NT
‑
proBNP特异性单克隆抗体。
[0025]第三试剂，为上述的缓冲液。
[0026]进一步地，第一试剂由9.76g/L 2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸、8mL/L 20％NaOH、27.00g/L NaCl、20.00g/L蔗糖、10.00g/L蛋白保护剂、1mL/L PC
‑
950、抗人NT
‑
proBNP特异性单克隆抗体、链亲和素磁珠、磁珠封闭液组成，第一试剂的pH为6.45
‑
6.55；
[0027]第二试剂由9.76g/L 2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸、8mL/L 20％NaOH、9.00g/L NaCl、10.00g/L蔗糖、10.00g/L蛋白保护剂、0.05g/L果绿色素、10.00mL/L丙三醇、10mL/L 0.1M MgCl2、10mL/L0.01M ZnCl2、碱性磷酸酶活化的抗人NT
‑
proBNP特异性单克隆抗体组成；第二试剂的pH为6.45
‑
6.55。
[0028]进一步地，第一试剂、第二试剂和第三试剂的体积比为1:1:1。
[0029]本专利技术与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：
[0030]1、本通过采用2
‑
(N
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于测定N末端脑利钠肽前体的缓冲液，其特征在于，所述缓冲液含有2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸，所述缓冲液的pH值为6.0
‑
7.0。2.根据权利要求1所述的用于测定N末端脑利钠肽前体的缓冲液，其特征在于，所述缓冲液的pH值为6.45
‑
6.55。3.根据权利要求1或2所述的用于测定N末端脑利钠肽前体的缓冲液，其特征在于，所述缓冲液包括以下组分：2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸和NaOH。4.用于测定N末端脑利钠肽前体的磁保体系，其特征在于，包括如权利要求3所述的缓冲液，还包括NaCl、蔗糖、蛋白保护剂和PC
‑
950，该磁保体系为抗人NT
‑
proBNP特异性单克隆抗体包被磁珠的保护体系。5.根据权利要求4所述的磁保体系，其特征在于，磁保体系的配方为：9.00～10.00g/L 2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸、6～10mL/L 20％NaOH、20.00～30.00g/L NaCl、10.00～30.00g/L蔗糖、5.00～15.00g/L蛋白保护剂和0.5～1.5mL/L PC
‑
950。6.用于测定N末端脑利钠肽前体的酶保体系，其特征在于，包括如权利要求3所述的缓冲液，还包括NaCl、蔗糖、蛋白保护剂、果绿色素、丙三醇、MgCl2和ZnCl2；该酶保体系为碱性磷酸酶活化的抗人NT
‑
proBNP特异性单克隆抗体的保护体系。7.根据权利要求6所述的酶保体系，其特征在于，酶保体系的配方为：9.00～10.00g/L 2
‑
(N
‑
吗啉代)乙磺酸、6～10mL/L 20％NaOH、5.00～15.00g/LN...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁益洁，方丽，
申请(专利权)人：四川沃文特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：