用于产生生物工程化的病毒特异性淋巴细胞的材料和方法技术

一种用于活化或富集Vβ17+CD8+T细胞的方法，包括使源自人甲型流感病毒的M1肽(M1 58

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于产生生物工程化的病毒特异性淋巴细胞的材料和方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年8月10日提交的美国序列号63/063,749、2020年8月10日提交的美国序列号63/063,771、2020年8月10日提交的美国序列号63/063,784、2020年8月10日提交的美国序列号63/063,793、2020年8月10日提交的美国序列号63/063,801、2020年8月10日提交的美国序列号63/063,806、2020年8月10日提交的美国序列号63/063,811的权益，这些申请中的每一篇全文以引用方式并入本文。
[0003]以电子方式提交的参考序列表
[0004]本申请包含序列表，该序列表作为ASCII格式的序列表经由EFS
‑
Web以电子方式递交，文件名为“14620
‑
544
‑
228_SEQ_LISTING.txt”，创建日期为2021年7月26日，并且大小为8,048字节。经由EFS
‑
Web提交的该序列表是本说明书的一部分并且全文以引用方式并入本文。
1.

[0005]在一些实施方案中，本文提供了生物工程化的淋巴细胞，诸如生物工程化的T细胞和使用改良T细胞的过程。公开了用于产生此类T细胞(包括流感特异性Vβ17
+
CD8
+
T细胞)的方法及此类T细胞例如用于制备表达嵌合抗原受体的T细胞(CAR
‑
T细胞)的用途。在某些实施方案中，本文还提供了包含CAR
‑
T细胞的组合物及该组合物治疗疾病或障碍的用途。
2.
技术介绍

[0006]经遗传修饰以识别恶性肿瘤相关抗原的免疫细胞的过继转移显示出作为治疗癌症的新方法的希望(参见，例如，Brenner等人,Current Opinion in Immunology,22(2):251
‑
257(2010)；Rosenberg等人,Nature Reviews Cancer,8(4):299
‑
308(2008))。例如，表达嵌合抗原受体(CAR)的基因工程化T细胞已经作为最有效的癌症治疗之一出现。
[0007]常规地，为了生成临床级CAR
‑
T细胞，通过白细胞除去法(leukapheresis)从患者体内(或外周血)收集T细胞，活化T细胞，使用病毒载体用CAR构建体转导T细胞，扩增T细胞，并且然后在淋巴细胞清除性化疗之后作为单次治疗再输注给同一患者(参见Ruella等人,BioDrugs,31(6):473
‑
481(2017))。尽管CAR
‑
T疗法的治疗结果是前所未有的，但受自身特征显著地限制。例如，不能从所有患者收获T细胞，并且T细胞的质量可能不满足制造标准。另外，常规的CAR
‑
T疗法具有固有的制造问题，诸如制造失效、时间延迟、细胞扩增不充分或异质产物，这些问题可对受体患者有害。对于此类高度个性化的程序，高成本也是不可避免的。因此，需要改良的T细胞疗法。
3.
技术实现思路

[0008]在一个方面，本文提供了一种用于活化或富集Vβ17
+
CD8
+
T细胞的方法，该方法包括使源自人甲型流感病毒的M1肽(M1
58
–
66
)与包含T细胞的细胞群接触。
[0009]在一些实施方案中，该M1肽包含GILGFVFTL(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列。
[0010]在一些实施方案中，该方法还包括使IL
‑
2与包含T细胞的细胞群接触。
[0011]在一些实施方案中，在包含M1肽和/或IL
‑
2的培养基中离体培养该细胞群。
[0012]在一些实施方案中，该方法包括：(i).在包含M1肽和IL
‑
2的培养基中离体培养该细胞群；(ii).在包含M1肽的培养基中离体培养该细胞群，并且然后在包含IL
‑
2的培养基中离体培养该细胞群；或(iii).在包含M1肽的培养基中离体培养该细胞群，并且然后在包含M1肽和IL
‑
2的培养基中离体培养该细胞群；并且然后在包含IL
‑
2的培养基中离体培养该细胞群。
[0013]在一些实施方案中，该细胞群离体培养至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天或14天。
[0014]在一些实施方案中，该细胞群离体培养1
‑
20天、2
‑
18天、3
‑
16天、4
‑
14天、5
‑
14天、6
‑
14天、7
‑
14天、8
‑
14天、9
‑
14天、10
‑
14天、11
‑
14天或12
‑
14天。
[0015]在一些实施方案中，该细胞群是全外周血单核细胞(PBMC)群。在一些实施方案中，该全PBMC群来自健康供体。
[0016]在一些实施方案中，来自该细胞群的CD8+细胞中的Vβ17
+
CD8
+
T细胞的初始百分比是CD8+细胞的2％
‑
10％。在一些实施方案中，来自该细胞群的CD8+细胞中的Vβ17
+
CD8
+
T细胞的初始百分比是CD8+细胞的3％
‑
8％。在一些实施方案中，来自该细胞群的CD8+细胞中的Vβ17
+
CD8
+
T细胞的初始百分比是CD8+细胞的4％
‑
6％。在一些实施方案中，来自该细胞群的CD8+细胞中的Vβ17
+
CD8
+
T细胞的初始百分比是CD8+细胞的4％
‑
5％。在一些实施方案中，来自该细胞群的CD8+细胞中的Vβ17
+
CD8
+
T细胞的初始百分比是CD8+细胞的5％
‑
6％。在一些实施方案中，来自该细胞群的CD8+细胞中的Vβ17
+
CD8
+
T细胞的初始百分比是CD8+细胞的5.5％。
[0017]在一些实施方案中，该方法使来自该细胞群的CD8+细胞中的Vβ17
+
CD8
+
T细胞的百分比增加CD8+细胞中Vβ17
+
CD8
+
T细胞的初始百分比的至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、90％、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、11倍、12倍、13倍或14倍；或者其中该方法使来自该细胞群的CD8+细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于活化或富集Vβ17
+
CD8
+
T细胞的方法，所述方法包括使源自人甲型流感病毒的M1肽(M1
58
–
66
)与包含T细胞的细胞群接触。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述M1肽包含GILGFVFTL(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列。3.根据权利要求1或2所述的方法，所述方法还包括使IL
‑
2与包含所述T细胞的所述细胞群接触。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述细胞群在包含所述M1肽和/或IL
‑
2的培养基中离体培养。5.根据权利要求3所述的方法，其中所述方法包括：(i).在包含所述M1肽和IL
‑
2的培养基中离体培养所述细胞群；(ii).在包含所述M1肽的培养基中离体培养所述细胞群，并且然后在包含IL
‑
2的培养基中离体培养所述细胞群；或(iii).在包含所述M1肽的培养基中离体培养所述细胞群，然后在包含所述M1肽和IL
‑
2的培养基中离体培养所述细胞群；并且然后在包含IL
‑
2的培养基中离体培养所述细胞群。6.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述细胞群离体培养至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天或14天。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述细胞群是全外周血单核细胞(PBMC)群。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述全PBMC群来自健康供体。9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述方法使来自所述细胞群的CD8+细胞中的所述Vβ17
+
CD8
+
T细胞的百分比增加至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、90％、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、11倍、12倍、13倍或14倍；或者其中所述方法使来自所述细胞群的CD8+细胞中的所述Vβ17
+
CD8
+
T细胞的百分比增加到至少6％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％。10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述方法还包括在使所述细胞群与所述M1肽和/或IL
‑
2接触之后从所述细胞群中分离Vβ17
+
CD8
+
T细胞。11.一种分离的Vβ17
+
CD8
+
T细胞群，所述分离的Vβ17
+
CD8
+
T细胞群根据权利要求1至10中任一项所述的方法产生。12.一种分离的细胞群，其中所述分离的细胞群中所述Vβ17
+
CD8
+
T细胞的百分比大于6％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％。13.根据权利要求12所述的分离的细胞群，其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：詹森生物科技公司，
类型：发明
国别省市：