异养硝化-好氧反硝化细菌固定化载体的制备方法及应用技术

本发明专利技术属于池塘养殖的水处理技术领域，具体地说是异养硝化

【技术实现步骤摘要】
异养硝化
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好氧反硝化细菌固定化载体的制备方法及应用


[0001]本专利技术涉及池塘养殖的水处理
，具体是异养硝化
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好氧反硝化细菌固定化载体的制备方法。

技术介绍

[0002]随着人们对水产品需求的增加，高密度、投喂人工饲料的养殖技术日益普遍，然而养殖鱼类的排泄物和残饵中含有大量的含氮污染物，造成养殖水体恶化，增加养殖鱼类的病害风险。养殖废水的排放监管日益严格，需要进行净化处理，微生物脱氮过程被认为是最经济有效的方式。传统液体微生物菌液泼洒到养殖水体中，降雨和换水过程容易导致高效菌株从养殖系统丢失。
[0003]养殖池塘投饵机投喂区域是残饵和粪便集中的区域，传统的液体菌液在养殖系统中流动，菌液浓度被极大的稀释，不能定向处理高污染区域，且添加的菌液在水体中和养殖系统原生细菌竞争生长空间和营养盐，不利于菌液活性保持。
[0004]因此，针对上述问题提出异养硝化
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好氧反硝化细菌固定化载体的制备方法。

技术实现思路

[0005]为了弥补现有技术的不足，本专利技术提供一种用于处理养殖污水的异养硝化
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好氧反硝化细菌固定化载体的制备及应用方法，以便将好氧反硝化固定化载体用于净化水产养殖废水。
[0006]本专利技术提供的技术方案：处理养殖污水的异养硝化
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好氧反硝化细菌固定化载体的应用方法，包括如下步骤：
[0007](1)配置异养硝化
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好氧反硝化细菌扩大培养基，主要配方如下：0.3g/L乙酸钠，0.05g/LNH4Cl，0.02g/L酵母提取物。
[0008](2)将
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20℃保存的异养硝化
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好氧反硝化细菌菌种按10％接种到10mL上述异养硝化
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好氧反硝化细菌扩大培养基中，37℃，培养24h，恢复细菌的活性。
[0009](3)将1mL上述恢复细菌活性的异养硝化
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好氧反硝化细菌菌液按1％加入到100mL的异养硝化
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好氧反硝化细菌扩大培养液中，37℃，培养24h。
[0010](4)取10mL上述扩大培养的异养硝化
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好氧反硝化培养液至15mL无菌一次性离心管中，4℃，5000rpm低温高速离心，用无菌的移液枪将9mL上清液移除。
[0011](5)用1mL移液枪，反复吹打混合15mL离心管底部的细菌团块，形成浓缩的异养硝化
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好氧反硝化细菌菌液。
[0012](6)将30g琼脂加入100mL上述异养硝化
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好氧反硝化扩大培养基中，加热到60℃以上搅拌均匀，配制成质量体积比为3％的琼脂糖溶液。
[0013](7)待3％的琼脂糖溶液冷却到37℃，立即将上述浓缩的1mL异养硝化
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好氧反硝化细菌菌液加入到100mL的3％的琼脂糖溶液中，迅速混匀后，倒入载体制备模具中。
[0014](8)所述模具为矩形塑料板，上密集排列圆柱体凹槽。
[0015](9)将倒有混合异养硝化
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好氧反硝化细菌的3％琼脂糖溶液的载体模具置于4℃冰箱中冷却，10min后待琼脂凝固时将圆柱体的琼脂载体倒出，即制备成异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体。
[0016](10)异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体应置于水产养殖水体的好氧区域发挥最大性能，采用挂载的方法进行实际应用，具体方法如下：
[0017](11)使用塑料框架支撑细孔密网，将固体缓释碳源和上述制备的异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体置入其中，用尼龙绳将细孔密网口扎牢，防止载体和固体缓释碳源漏出。
[0018](12)在细孔密网上端系有足够浮力的浮子，控制系绳长度，保证载体和固体缓释碳源漂浮在水体中0.5m深度位置。
[0019](13)在池塘投饵机投喂饲料的中间区域用牵引尼龙线横拉至池塘两岸，在池塘一岸牵引尼龙绳，并按照合适的间隔系上准备好的多个上述装有异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体的细孔密网，牵引尼龙绳至装有异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体的细孔密网均匀分布在饲料投饵区。
[0020](14)在养殖桶、养殖围网、养殖围隔、养殖围栏、养殖网箱，养殖集装箱等小型高密度养殖系统中，直接用绳索将装有异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体的细孔密网固定在养殖系统上层0.3
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0.5m深度的养殖水体中进行应用。
[0021](15)所述用于承载异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体的细孔密网可以根据养殖渔民易获得的材料进行改造。例如将常见的450mL
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4.5L的饮料瓶或者矿泉水瓶的瓶身扎满细孔，保证能进行充足的水体交换的同时，异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体和固体缓释碳源不会漏出，系上足够大小的泡沫，即可制备简易的应用装置。
[0022]本专利技术的有益之处在于：
[0023]1.使用塑料框架支撑细孔密网，将固体缓释碳源和上述制备的异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体置入其中，用尼龙绳将细孔密网口扎牢，防止载体和固体缓释碳源漏出，有利于异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体置于水产养殖水体的好氧区域发挥最大性能；
[0024]2.用于承载异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体的细孔密网可以根据养殖渔民易获得的材料进行改造。例如将常见的450mL
‑
4.5L的饮料瓶或者矿泉水瓶的瓶身扎满细孔，保证能进行充足的水体交换的同时，异养硝化
‑
好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体和固体缓释碳源不会漏出，系上足够大小的泡沫，即可制备简易的应用装置。
附图说明
[0025]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
[0026]图1为本专利技术的异养硝化
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好氧反硝化细菌固定化载体应用方法的示意图；
[0027]图2为本专利技术的倒入异养硝化
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好氧反硝化细菌琼脂载体的模具实例图和制成的圆柱体载体示意图；
[0028]图3为本专利技术的含有异养硝化
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好氧反硝化细菌琼脂载体和固体缓释碳源聚已酸酯的细孔密网应用装置的实例图；
[0029]图4为本专利技术细孔密网应用装置悬挂于水产养殖桶中用于调控养殖水体氮营养盐浓度的应用实例图；
[0030]图5为悬本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.异养硝化
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好氧反硝化细菌固定化载体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、配置异养硝化
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好氧反硝化细菌扩大培养基；S2、将
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20℃保存的异养硝化
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好氧反硝化细菌菌种按10％接种到10mL上述异养硝化
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好氧反硝化细菌扩大培养基中，37℃，培养24h，恢复细菌的活性；S3、将1mL上述恢复细菌活性的异养硝化
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好氧反硝化细菌菌液按1％加入到100mL的异养硝化
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好氧反硝化细菌扩大培养液中，37℃，培养24h；S4、取10mL上述扩大培养的异养硝化
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好氧反硝化培养液至15mL无菌一次性离心管中，4℃，5000rpm低温高速离心，用无菌的移液枪将9mL上清液移除；S5、用1mL移液枪，反复吹打混合15mL离心管底部的细菌团块，形成浓缩的异养硝化
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好氧反硝化细菌菌液；S6、将30g琼脂加入100mL上述异养硝化
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好氧反硝化扩大培养基中，加热到60℃以上搅拌均匀，配制成质量体积比为3％的琼脂糖溶液；S7、待3％的琼脂糖溶液冷却到37℃，立即将上述浓缩的1mL异养硝化
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好氧反硝化细菌菌液加入到100mL的3％的琼脂糖溶液中，迅速混匀后，倒入载体制备模具中；S8、将倒有混合异养硝化
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好氧反硝化细菌的3％琼脂糖溶液的载体模具置于4℃冰箱中冷却，10min后待琼脂凝固时将圆柱体的琼脂载体倒出，即制备成异养硝化
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好氧反硝化细菌的固定化琼脂载体。2.根据权利要求1所述的异养硝化
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好氧反硝化细菌固定化载体的制备方法，其特征在于：所述配置异养硝化
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好氧反硝化细菌扩大培养基的主要配方如下：0.3g/L乙酸钠，0.05...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋康，邓闵，李露，
申请(专利权)人：中国科学院水生生物研究所，
类型：发明
国别省市：