一种林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白冻干粗粉制备方法技术

一种林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白冻干粗粉制备方法，包括以下步骤：步骤1预处理；步骤1.1林蛙（雪蛤）皮净选清洗；步骤1.2脱杂质、色素；步骤2林蛙（雪蛤）皮干燥；步骤3粉碎；步骤4酶解提取；步骤5过滤离心；步骤6分离浓缩；步骤7真空冷冻干燥。本发明专利技术技术选择性分离强，对杂质分离强，过滤精度高，运行稳定可靠，优于传统的过滤设备，实现高精度、低成本、低能耗、高提取率品质的要求，减少溶剂的消耗，有效提高分离浓缩酶解提取液的纯度，提高产品生产的安全性，同时不会造成对环境的危害，具有较高的社会效益以及环境效益。及环境效益。及环境效益。

【技术实现步骤摘要】
一种林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白冻干粗粉制备方法


[0001]本专利技术涉及生物科技
，尤其是一种林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白冻干粗粉制备方法。

技术介绍

[0002]中国林蛙(Rana tempoviductus ranaearia chensinensis david）简称林蛙，俗称哈士蟆，是我国传统的名贵药用动物，是集药用、食补、美容等功能于一体的珍稀两栖类动物。主要产地为黑龙江、辽宁、吉林三省，辽宁的清原、新宾、恒仁、西丰，吉林的桦甸、舒兰、蛟河、抚松、安图、磐石、长白、敦化，以及黑龙江的五常、尚志、宁安等县都有分布。林蛙以其特有的药用价值与营养价值日益被人们所重视，成为蛙类中经济价值最高的一种。其肉质细嫩，味道鲜美，干肉的蛋白质含量可达79%，而从雌蛙输卵管提取出的林蛙油(哈士蟆油)中蛋白质含量为56.3%、脂肪含量为3.5%、矿物质含量为4.7%、无氮有机物含量为27.5%，而且富含4种激素、9种维生素、13种微量元素和人体所必需的18种氨基酸，在药用、滋补、美容方面具有很高的利用价值。
[0003]东北长白山地区是林蛙的天然分布主产区，年产林蛙10亿余只，目前林蛙产品大部多数均以提取林蛙油出品，其大量含多种抗氧化活性成分的剩余林蛙胴体都被丢弃浪费。而蛙类皮肤中含有丰富的胶原蛋白和透明质酸，其中胶原蛋白具有非常好的生物相容性、生物降解性和低抗原性，可以广泛应用于生物医学材料、食品、营养保健品、化妆品等方面。本专利技术利用废弃的林蛙（雪蛤）皮提取具有一定抗氧化性的胶原蛋白，可以在充分利用废弃生物资源的同时开发高附加值的产品，以资源保护、产品深加工及持续发展为目的，深层次开发含有丰富营养物质的林蛙（雪蛤）应用价值，具有重要的环境效益和经济效益，为林蛙（雪蛤）深加工产业规模化、品牌化开辟新途径。
[0004]胶原蛋白（Collagen）又称胶原，在动物的结缔组织（皮、骨、肌腱、韧带、血管等）中含量非常丰富，是机体的主要蛋白质，主要存在于结缔组织，具有支撑器官，保护机体等作用。胶原蛋白与动物组织的形成、细胞间信息的传递，以及伤口愈合、血液凝固、关节润滑、钙化作用等有着密切的关系。很多学者对胶原蛋白的功能以及提取工艺都有着浓厚的研究兴趣，一些专家和学者们已经开始试图从更多的途径提取胶原蛋白。
[0005]林蛙（雪蛤）皮中含有相当丰富的胶原蛋白和透明质酸，据国内专家研发发现，从林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白对羟自由基的抑制率达到70%以上，具有良好的清除自由基的能力，具有一定的抗氧化能力。但是目前对中国林蛙（雪蛤）长白山亚种新鲜林蛙（雪蛤）皮的工业化提取工艺开发生产几乎处于空白状态，该方面研究未见文献报道。据此，本专利技术研究了林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白提取工艺及其制备方法进行优化。本专利技术要解决的技术问题是，用长白山亚种新鲜林蛙（雪蛤）剩余胴体皮肤提取有效成分胶原蛋白粗粉，为提高长白山林蛙深加工最大程度利有资源提供有效方法。
[0006]目前，国内外关于中国林蛙深加工的研究报道多为林蛙油、蛙体的制药及蛙肉的食用等传统的工艺范畴，有关于林蛙（雪蛤）皮深加工的工艺制作开发很少，总的来说，对中
国长白山林蛙药用价值的开发利用，还基本上是一种粗放式的、对资源造成极大的浪费的非持续性开发。对中国长白山林蛙大量活性物质的分离、定性、定量研究工作进行得很少。现在国内对于中国长白山林蛙从开发技术产品看，存在着产品品种类不全、产品种类单一、用途单一等缺点。
[0007]因此有必要采用现代食品及药品深加工新技术、新设备，设计一种从林蛙（雪蛤）皮肤中提取胶原蛋白的制备工艺。

技术实现思路

[0008]为了解决上述现有技术中存在的问题，本专利技术提供一种林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白冻干粗粉制备方法，采用酸酶结合提取法、膜分离工艺技术开发研究，以确保原料中有效成分、生理活性成分不损失，所提取出的胶原蛋白理化性质稳定、品质高。
[0009]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白冻干粗粉制备方法，包括以下步骤：步骤1预处理；步骤1.1林蛙（雪蛤）皮净选清洗：拣取新鲜活体取油、去体后剥离的干林蛙（雪蛤）皮，在清洁的挑选台上，人工挑选分离杂质，至无霉、无杂质的状态。将经过挑选将无杂质洁净的林蛙（雪蛤）皮放入不锈钢清洗槽中，注入清水，浸泡48
‑
72h，反复冲洗，去掉杂物，直至林蛙（雪蛤）皮完全复水，成为松软状态，然后沥干水分，放入不锈钢清洗槽中，作为原料备用。
[0010]步骤1.2脱杂质、色素：将放入不锈钢清洗槽中净选后的原料，投入10%碳酸钠溶液中，充分搅拌后，室温下处理，待浸泡结束后注入蒸馏水，反复冲洗，洗去碳酸钠溶液。重复上述过程1次，结束后用蒸馏水清洗蛙皮直至pH值为7。最后，沥干待用。
[0011]步骤2林蛙（雪蛤）皮干燥：将清洗好沥干待用的林蛙（雪蛤）皮投入真空冷冻干燥机，得到冷冻干燥后的原料。
[0012]步骤3粉碎：将冷冻干燥后的原料，投入冷冻粉碎机中，得林蛙（雪蛤）皮粗粉。
[0013]步骤4酶解提取：将林蛙（雪蛤）皮粗粉投入酶解罐，进行酶解提取，得到酶解提取液。
[0014]步骤5过滤离心：将酶解提取液合并经真空过滤器过滤，弃出提取原料的废渣后，打入贮液罐静止1h，得到静止后的林蛙（雪蛤）皮酶解提取液；再将静止后的林蛙（雪蛤）皮酶解提取液打入离心机，合并收集得上清液。
[0015]步骤6分离浓缩：将上清液打入卷式超滤膜分离设备，进行分离浓缩后，得林蛙（雪蛤）皮酶解浓缩液。
[0016]步骤7真空冷冻干燥：将林蛙（雪蛤）皮酶解浓缩液，置于真空冷冻干燥机中，得林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白
冻干粗粉。
[0017]本专利技术还具有以下附加技术特征：作为本专利技术技术方案进一步具体优化的：步骤2的真空冷冻干燥机的型号为GZLYZ医药型；步骤3的冷冻粉碎机的型号为江苏瑰宝冷冻粉碎机FL
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150型；步骤4的酶解罐的型号为MJ
‑
2型；步骤5的真空过滤器的型号为3T/H，过滤精度100目；离心机的型号为Z400K型；步骤6的卷式超滤膜分离设备的型号为S
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NF80
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2540型；步骤7的真空冷冻干燥机的型号为GZLYZ医药型。
[0018]作为本专利技术技术方案进一步具体优化的：步骤1.2脱杂质、色素：将放入不锈钢清洗槽中净选后的原料，按质量比为料液1：60的比例，投入10%碳酸钠溶液中，充分搅拌后，室温下，处理2h后，待浸泡结束后注入蒸馏水，反复冲洗，洗去碳酸钠溶液。
[0019]作为本专利技术技术方案进一步具体优化的：步骤2林蛙（雪蛤）皮干燥：真空冷冻干燥机，设置冻干机参数
‑
40℃、真空度13pa，进行冷冻干燥12h。
[0020]作为本专利技术技术方案进一步具体优化的：步骤3粉碎：冷冻粉碎机中，低温4℃进行粉碎，过80目筛。
[0021]作为本专利技术技术方案进一步具体优化的：步骤4酶解提取：将林蛙（雪蛤）皮粗粉投入酶解罐，加本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白冻干粗粉制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1预处理；步骤1.1林蛙（雪蛤）皮净选清洗：拣取新鲜活体取油、去体后剥离的干林蛙（雪蛤）皮，在清洁的挑选台上，人工挑选分离杂质，至无霉、无杂质的状态；将经过挑选将无杂质洁净的林蛙（雪蛤）皮放入不锈钢清洗槽中，注入清水，浸泡48
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72h，反复冲洗，去掉杂物，直至林蛙（雪蛤）皮完全复水，成为松软状态，然后沥干水分，放入不锈钢清洗槽中，作为原料备用；步骤1.2脱杂质、色素：将放入不锈钢清洗槽中净选后的原料，投入10%碳酸钠溶液中，充分搅拌后，室温下处理，待浸泡结束后注入蒸馏水，反复冲洗，洗去碳酸钠溶液；重复上述过程1次，结束后用蒸馏水清洗蛙皮直至pH值为7；最后，沥干待用；步骤2林蛙（雪蛤）皮干燥：将清洗好沥干待用的林蛙（雪蛤）皮投入真空冷冻干燥机，得到冷冻干燥后的原料；步骤3粉碎：将冷冻干燥后的原料，投入冷冻粉碎机中，得林蛙（雪蛤）皮粗粉；步骤4酶解提取：将林蛙（雪蛤）皮粗粉投入酶解罐，进行酶解提取，得到酶解提取液；步骤5过滤离心：将酶解提取液合并经真空过滤器过滤，弃出提取原料的废渣后，打入贮液罐静止1h，得到静止后的林蛙（雪蛤）皮酶解提取液；再将静止后的林蛙（雪蛤）皮酶解提取液打入离心机，合并收集得上清液；步骤6分离浓缩：将上清液打入卷式超滤膜分离设备，进行分离浓缩后，得林蛙（雪蛤）皮酶解浓缩液；步骤7真空冷冻干燥：将林蛙（雪蛤）皮酶解浓缩液，置于真空冷冻干燥机中，得林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白冻干粗粉。2.根据权利要求1所述的一种林蛙（雪蛤）皮胶原蛋白冻干粗粉制备方法，其特征在于：步骤2的真空冷冻干燥机的型号为GZLYZ医药型；步骤3的冷冻粉碎机的型号为江苏瑰宝冷冻粉碎机FL
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150型；步骤4的酶解罐的型号为MJ
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【专利技术属性】
技术研发人员：杨棣，曲艳梅，
申请(专利权)人：吉林省均泰东方药业有限公司，
类型：发明
国别省市：