一种用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法及其应用，包括如下步骤：(1)将所述的硅酸盐与缓冲液、水或水溶液混合，得到特定浓度的蒙脱土混悬液；(2)硅酸盐混悬液与纳米抗体按体积比为1：1的比例混合；(3)将步骤(2)在一定温度、搅拌时间和搅拌速度下搅拌后，制得用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体。本发明专利技术的硅酸盐载体可稳定负载纳米抗体，在胃肠道中保护纳米抗体，可以在肠道释放该纳米抗体，中和巨噬细胞表面的膜连TNF

【技术实现步骤摘要】
一种用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及医药
，特别是涉及一种用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF
‑
α)是炎症反应的主要介质，与肠道菌群紊乱密切相关，肠道菌群被认为可以调节黏膜稳态和宿主免疫。阻断TNF
‑
α，加强黏膜屏障功能的完整性，重塑肠道微生态，对于治疗肠道疾病及调节远端肠外组织具有重要意义，有利于治疗自身免疫性和过敏性疾病。
[0003]以TNF
‑
α为靶点的生物制剂(如adalimumab,infliximab,Golimumab和Certolizumab pegol)可以有效地中和TNF
‑
α，从而阻断TNF
‑
α与其受体结合，大大降低炎症反应的放大，促进粘膜愈合并增加肠道菌群多样性。然而，由于其皮下或系统注射会导致它们分布在全身。免疫原性，抗药物抗体的诱导可能增强药物清除和降低药物中和能力，导致严重的过敏反应和反应丧失。同时，长期全身给药有严重的副作用，包括感染并发症、自身免疫疾病和恶性肿瘤，如黑色素瘤。此外，治疗成本高且病人依从性差等均导致其临床应用仍受到一定的限制。因此，急需将抗TNF
‑
α活性药物口服递送而减少抗体在外周血的暴露和免疫抑制，从而降低副作用。21世纪初，为了解决TNF
‑
α抗体药物治疗肠炎的副作用问题，有2
‑
3种口服TNF
‑
α抗体进入临床前研究，但是鉴于胃部的极酸环境和肠道部位的酶降解作用，至今尚未有可用于口服的TNF
‑
α抗体批准上市。
[0004]如何构建简单便捷、稳定、高效的口服纳米抗体递送系统，在低成本条件下实现体内治疗性抗体的高效递送，仍有待实现进一步研究突破。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的问题，本专利技术的目的是提供一种用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法及其应用。
[0006]为达到上述目的，本专利技术采用了下列技术方案：本专利技术的一种用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法，包括如下步骤：
[0007](1)将所述的硅酸盐与缓冲液、水或水溶液混合，得到特定浓度的蒙脱土混悬液；
[0008](2)硅酸盐混悬液与纳米抗体按体积比为1：1的比例混合；
[0009](3)将步骤(2)在一定温度、搅拌时间和搅拌速度下搅拌后，制得用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体。
[0010]进一步地，所述的纳米抗体通过静电及氢键作用插层或吸附进入硅酸盐的内外表面及边缘；所述的纳米抗体种属来源为骆驼科动物和/或鲨鱼科软骨鱼中的至少一种；所述的纳米抗体为单价纳米抗体、多价/多特异性纳米抗体、融合型纳米抗体中的至少一种；所述的硅酸盐为蒙脱土、萤石、凹凸棒石、高岭土、伊利石、海泡石、绿泥石或沸石中的一种或
几种的混合物。
[0011]进一步地，所述的骆驼科动物为骆驼、大羊驼或羊驼及其近亲物种中的任意一种；所述的鲨鱼科动物为护士鲨、斑纹须、银鲛或鳐中的任意一种；
[0012]所述的蒙脱土为Ca
2+
‑
蒙脱土、Mg
2+
‑
蒙脱土、K
+
‑
蒙脱土、Na
+
‑
蒙脱土或Cs
+
‑
蒙脱土中的一种或几种的混合物；所述的蒙脱土可与有机化合物、无机化合物、有机
‑
无机化合物形成蒙脱土层间有机化合物和蒙脱土层间无机化合物以及蒙脱土层间有机
‑
无机化合物。
[0013]更进一步地，所述的有机化合物为醇、醚、酮、醛、羧酸、酸酐、酚、醌、胺、烃、芳香类、酰类或硅烷偶联剂中一种或几种的混合物；所述的有机
‑
无机化合物为聚合羟基阳离子
‑
有机物中的至少一种。
[0014]进一步地，所述的硅酸盐为蒙脱土，所述的蒙脱土和纳米抗体质量吸附比为10000
‑
0.0001，所述的搅拌速度在100
‑
6000rpm，所述的搅拌温度在0
‑
37℃之间，所述的搅拌时间在0.25
‑
3h，所述的递送纳米抗体的口服蒙脱土载体平均粒径为0.1
‑
8μm。
[0015]进一步地，所述的硅烷偶联剂包括且不限于小分子硅烷偶联剂，通常以Y
‑
R
‑
SiX3表示其结构，其中，X是卤素或烷氧基，式中Y
‑
R为有机硅碳功能性基团，Y代表巯基、多硫基团、氨基、改性氨基、乙烯基、环氧基、氰基、异氰酸酯基、甲基丙乙烯酰氧基等功能基团中的一种或多种的组合；所述的蒙脱土和纳米抗体质量吸附比为40000:0.1。
[0016]所述的蒙脱土和纳米抗体质量吸附比为4000:0.1。
[0017]本专利技术所述的硅酸盐载体在制备硅酸盐纳米抗体口服递送系统中的应用。
[0018]本专利技术所述的硅酸盐纳米抗体口服递送系统在制备炎症性肠病药物中的应用，其中炎症性肠病为溃疡性结肠炎、克罗恩病或一些不常见表型的结肠炎。
[0019]本专利技术所述的硅酸盐纳米抗体口服递送系统在治疗过敏性鼻炎的应用。
[0020]本专利技术所述的硅酸盐纳米抗体口服递送系统在治疗自身免疫性疾病和过敏性疾病中的应用。
[0021]有益效果：本专利技术的硅酸盐载体可稳定负载纳米抗体，在胃肠道中保护纳米抗体，可以在肠道释放该纳米抗体，中和巨噬细胞表面的膜连TNF
‑
α(transmembrane precursor form,mTNF)，缓解炎症症状，同时增加肠道梭状芽胞杆菌丰度，有助于诱导Treg的产生，调控宿主免疫，有效缓解过敏性鼻炎小鼠过敏症状。
[0022]与现有的技术相比，本专利技术具有以下优点：
[0023](1)本专利技术通过选择蒙脱土作为口服纳米抗体的递送载体，通过将纳米抗体插层或吸附在蒙脱石的内外表面及边缘，具有长时间保护及炎症结肠富集的作用，有效缓解炎症性肠病小鼠疾病活动指数，小鼠结肠长度明显改善，并与模型组具有统计学的差异。
[0024](2)从粪便成型度来看，本专利技术的蒙脱石/纳米抗体口服递送体系治疗相比于模型组、蒙脱土组、纳米抗体组粪便成型度高，同时显著降低促炎细胞因子TNF
‑
α、IL
‑
1β、IL
‑
6和IL
‑
17A的mRNA表达水平，显著提高结肠组织紧密连接蛋白occludin
‑
1、ZO
‑
1的mRNA表达水平，以上共同提示，纳米抗体被蒙脱石包载后，能抵抗胃肠道复杂环境，保护纳米抗体，发挥治疗作用。同时，本专利技术在OVA诱导的过敏性鼻炎小鼠模型中，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将所述的硅酸盐与缓冲液、水或水溶液混合，得到特定浓度的蒙脱土混悬液；(2)硅酸盐混悬液与纳米抗体按体积比为1：1的比例混合；(3)将步骤(2)在一定温度、搅拌时间和搅拌速度下搅拌后，制得用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体。2.根据权利要求1所述的用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法，其特征在于：所述的纳米抗体通过静电及氢键作用插层或吸附进入硅酸盐的内外表面及边缘；所述的纳米抗体种属来源为骆驼科动物和/或鲨鱼科软骨鱼中的至少一种；所述的纳米抗体为单价纳米抗体、多价/多特异性纳米抗体、融合型纳米抗体中的至少一种；所述的硅酸盐为蒙脱土、萤石、凹凸棒石、高岭土、伊利石、海泡石、绿泥石或沸石中的一种或几种的混合物。3.根据权利要求2所述的用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法，其特征在于：所述的骆驼科动物为骆驼、大羊驼或羊驼及其近亲物种中的任意一种；所述的鲨鱼科动物为护士鲨、斑纹须、银鲛或鳐中的任意一种；所述的蒙脱土为Ca
2+
‑
蒙脱土、Mg
2+
‑
蒙脱土、K
+
‑
蒙脱土、Na
+
‑
蒙脱土或Cs
+
‑
蒙脱土中的一种或几种的混合物；所述的蒙脱土可与有机化合物、无机化合物、有机
‑
无机化合物形成蒙脱土层间有机化合物和蒙脱土层间无机化合物以及蒙脱土层间有机
‑
无机化合物。4.根据权利要求3所述的用于递送纳米抗体的口服硅酸盐载体的制备方法，其特征在于：所述的有机化合物为醇、醚、酮、醛、羧酸、酸酐、酚...

【专利技术属性】
技术研发人员：华子春，曹志婷，黄宝莲，
申请(专利权)人：江苏靶标生物医药研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：