百子莲的组织培养方法技术

本发明专利技术涉及百子莲的组织培养方法，包括无菌材料的获得，球茎的分化和增殖，球茎壮苗培养，生根培养，炼苗与移栽等步骤。与现有技术相比，本发明专利技术大大提高了百子莲的繁殖速度和苗的整齐度，可实现育苗的工厂化大批量生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种植物的组织培养方法，尤其是涉及一种。
技术介绍
百子莲为石蒜科百子莲属植物，原产于秘鲁和巴西一带，现栽培较为广泛。百子莲 是多年生草本植物，鳞茎肥大，近球形，直径5-7cm，外皮呈淡绿色或黄褐色。叶片两侧对生， 带状，先端渐尖，共6-8枚，叶片多于花后生出。顶端着花2-4朵，花朵硕大，花色紫色，是良 好的花镜与庭院材料。做为国外引进的新品种，百子莲的引种数量较少，种球分株慢，种苗 供应受限制。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可提高繁殖速 度和苗的整齐度的。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现，其特征在于，该方法包括以下步骤(1)无菌材料的获得在百子莲开花时，摘取未开花的花苞，用自来水冲洗l_3h后于超净工班工作 台上，依次利用质量浓度为60-75%的乙醇浸泡10-50s，体积浓度为0. 5_2%。的汞浸泡 10-30min,再用无菌水冲洗4_6次，利用无菌滤纸吸干花苞表面的水分后，将花苞接种于花 苞诱导培养基上；(2)球茎的分化和增殖花苞接种于花苞诱导培养基上，1-3周后花苞开始膨大，出现白色突起，3-5周后 可见芽分生组织，再培养1-2个月，有小球茎生成，将小球茎切下移入球茎增殖培养基中进 行增殖培养，球茎基部的愈伤组织较多，但球茎生长发育良好，无玻璃化等不良现象；(3)球茎壮苗培养将球茎增殖培养基上诱导出的球茎转至壮苗培养基上生长，20-40天后可以长成 0. 2-0. 5cm 的球茎；(4)生根培养取0. 2-0. 5cm的球茎，转接入生根培养基中诱导生根，10-20天后幼苗基部分化出 白色的根原基，30-35天后可以长至2-4cm，根系粗壮，须根众多，生根率为90-100% ；(5)炼苗与移栽生根培养30-35天，根系长至0. 5-lcm时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室 内开瓶炼苗1-3天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室的苗床中驯化30-50天，即可 移栽室外上盆或地栽，给予肥水管理，最终的移栽成活率为90-100 %。所述的花苞诱导培养基包括MS+6-BA1. 0-5. 0mg/L+NAA0. 1-0. 5mg/L。所述的花苞诱导培养基优选MS+6-BA5. 0mg/L+NAA0. 5mg/L。所述的球茎增殖培养基包括MS+6-BA0. 5-4. 0mg/L+NAA0. 1-0. 3mg/L。所述的球茎增殖培养基优选MS+6-BA2. 0mg/L+NAA0. 2mg/L。所述的壮苗培养基包括MS+6-BA0. 5-2. Omg/L+NAAO. 1-0. 3mg/L。所述的壮苗培养基优选MS+6-BA1. Omg/L+NAAO. lmg/L。所述的生根培养基包括MS+NAA0. 1-0. 3mg/L。所述的生根培养基优选MS+NAAO. lmg/L。所述的培养基还包括蔗糖20_40g/L、琼脂粉4_8g/L，培养基pH5. 5-6. 0，培养温度 24-26°C，光照 1500-25001x。与现有技术相比，本专利技术通过组培技术，极大提高了百子莲的繁殖速度和苗的整 齐度，可以实现育苗的工厂化大批量生产。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。实施例1(1)无菌材料的获得在百子莲开花时，摘取未开花的花苞，用自来水冲洗Ih后于超净工班工作台上， 依次利用质量浓度为60%的乙醇浸泡10s，体积浓度为0. 5%。的汞浸泡lOmin，无菌水冲洗 4次，用无菌滤纸吸干表面水分后，将花苞接种于包括MS+6-BA1. Omg/L+NAAO. lmg/L的腋芽 诱导培养基上；(2)球茎的分化和增殖花苞接种于花苞诱导培养基上，1周后花苞开始膨大，出现白色突起，3周后可 见芽分生组织，再培养1个月，有小球茎生成，将小球茎切下移入包括MS+6-BA0. 5mg/ L+NAAO. lmg/L的球茎增殖培养基中进行增殖培养，球茎基部的愈伤组织较多，但球茎生长 发育良好，无玻璃化等不良现象；(3)球茎壮苗培养将在球茎增殖培养基上诱导出的球茎转至包括MS+6-BA0. 5mg/L+NAA0. lmg/L的 壮苗培养基上生长，20天后可以长成0. 2cm的球茎；(4)生根培养取0. 2cm的球茎，转接入包括MS+NAAO. lmg/L的生根培养基中诱导生根，10天后幼 苗基部分化出白色的根原基，30天后可以长至2cm，根系粗壮，须根众多，生根率为90% ；(5)炼苗与移栽生根培养30天，根系长至0. 5cm时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室内开 瓶炼苗1天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室的苗床中驯化30天，即可移栽室外 上盆或地栽，给予肥水管理，最终的移栽成活率为90%。上述各种情况的培养基还包括蔗糖20g/L、琼脂粉4g/L，pH= 5. 5，培养温度24°C， 光照 15001x。实施例2(1)无菌材料的获得在百子莲开花时，摘取未开花的花苞，用自来水冲洗Ih后于超净工班工作台上，4依次利用质量浓度为75%的乙醇浸泡30s，体积浓度为1%。的汞浸泡15min，无菌水冲洗5 次，用无菌滤纸吸干表面水分后，将花苞接种于包括MS+6-BA5. 0mg/L+NAA0. 5mg/L的腋芽 诱导培养基上；(2)球茎的分化和增殖花苞接种于花苞诱导培养基上，3周后花苞开始膨大，出现白色突起，4周后可 见芽分生组织，再培养1个半月，有小球茎生成，将小球茎切下移入包括MS+6-BA2. Omg/ L+NAAO. 2mg/L的球茎增殖培养基中进行增殖培养，球茎基部的愈伤组织较多，但球茎生长 发育良好，无玻璃化等不良现象；(3)球茎壮苗培养将在球茎增殖培养基上诱导出的球茎转至包括MS+6-BA1. 0mg/L+NAA0. lmg/L的 壮苗培养基上生长，30天后可以长成0. 5cm的球茎；(4)生根培养取0. 5cm的球茎，转接入包括MS+NAAO. lmg/L的生根培养基中诱导生根，15天后幼 苗基部分化出白色的根原基，30天后可以长至4cm，根系粗壮，须根众多，生根率为100% ；(5)炼苗与移栽生根培养30天，根系长至Icm时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室内开瓶 炼苗3天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室的苗床中驯化40天，即可移栽室外上 盆或地栽，给予肥水管理，最终的移栽成活率为100%。上述各种情况的培养基还包括蔗糖30g/L、琼脂粉6g/L，pH = 5. 8，培养温度25°C， 光照 20001x。实施例3(1)无菌材料的获得在百子莲开花时，摘取未开花的花苞，用自来水冲洗3h后于超净工班工作台上， 依次利用质量浓度为75%的乙醇浸泡50s，体积浓度为2%。的汞浸泡30min，无菌水冲洗6 次，用无菌滤纸吸干表面水分后，将花苞接种于包括MS+6-BA5. 0mg/L+NAA0. 5mg/L的腋芽 诱导培养基上；(2)球茎的分化和增殖花苞接种于花苞诱导培养基上，3周后花苞开始膨大，出现白色突起，5周后可 见芽分生组织，再培养2个月，有小球茎生成，将小球茎切下移入包括MS+6-BA4. Omg/ L+NAAO. 3mg/L的球茎增殖培养基中进行增殖培养，球茎基部的愈伤组织较多，但球茎生长 发育良好，无玻璃化等不良现象本文档来自技高网...

【技术保护点】
百子莲的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（１）无菌材料的获得在百子莲开花时，摘取未开花的花苞，用自来水冲洗１－３ｈ后于超净工班工作台上，依次利用质量浓度为６０－７５％的乙醇浸泡１０－５０ｓ，体积浓度为０．５－２‰的汞浸泡１０－３０ｍｉｎ，再用无菌水冲洗４－６次，利用无菌滤纸吸干花苞表面的水分后，将花苞接种于花苞诱导培养基上；（２）球茎的分化和增殖花苞接种于花苞诱导培养基上，１－３周后花苞开始膨大，出现白色突起，３－５周后可见芽分生组织，再培养１－２个月，有小球茎生成，将小球茎切下移入球茎增殖培养基中进行增殖培养，球茎基部的愈伤组织较多，但球茎生长发育良好，无玻璃化等不良现象；（３）球茎壮苗培养将球茎增殖培养基上诱导出的球茎转至壮苗培养基上生长，２０－４０天后可以长成０．２－０．５ｃｍ的球茎；（４）生根培养取０．２－０．５ｃｍ的球茎，转接入生根培养基中诱导生根，１０－２０天后幼苗基部分化出白色的根原基，３０－３５天后可以长至２－４ｃｍ，根系粗壮，须根众多，生根率为９０－１００％；（５）炼苗与移栽生根培养３０－３５天，根系长至０．５－１ｃｍ时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室内开瓶炼苗１－３天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室的苗床中驯化３０－５０天，即可移栽室外上盆或地栽，给予肥水管理，最终的移栽成活率为９０－１００％。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建华，黄建荣，沈勤，
申请(专利权)人：上海上房园林植物研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]