莓叶萎陵菜的组织培养方法技术

本发明专利技术涉及莓叶萎陵菜的组织培养方法，包括无菌材料的获得，芽的分化和增殖，不定芽壮苗培养，生根培养，炼苗与移栽等步骤。与现有技术相比，本发明专利技术大大提高了莓叶萎陵菜的繁殖速度和苗的整齐度，并提高了其性状的稳定性，可实现育苗的工厂化大批量生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种植物的组织培养方法，尤其是涉及。
技术介绍
莓叶萎陵菜为蔷薇科萎陵菜属植物，遍布于亚洲、欧洲、北美洲各国。高10-15cm， 茎细弱，具匍匐枝，长20-50cm，节部生根。在上海地区终年常绿，花期为2-3月，花呈黄色，9 月可有少量二次花开放，花大而美丽。耐半荫，喜湿，可栽种于林下，道旁，湿地。花大株低， 无需特殊管理，地面覆盖效果好，是良好的观花、观叶地被。但是，莓叶萎陵菜分株慢，种子 发芽率低，因此无法大量快速推广。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可提高繁殖速 度和苗的整齐度，并提高性状稳定性的。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现，其特征在于，该方法包括以下步骤(1)无菌材料的获得取幼嫩的芽，去除外面包裹的叶片后，用自来水冲洗l_3h后于超净工作台上，依 次利用质量浓度为70-75%的乙醇浸泡10-50s，体积浓度为0. 5_2%。的汞浸泡10-30min，再 用无菌水冲洗4-6次，利用无菌滤纸吸干表面的水分后，再切成0. 5-2cm长的带腋芽的节 段，节段接种于芽诱导培养基上；(2)芽的分化和增殖节段接种于芽诱导培养基上1-3周后，腋芽部位开始膨大，出现黄绿色突起，2-4 周后可见芽分生组织，再培养1-2个月，不定芽可以长到l-2cm，将不定芽切下转入芽的增 殖培养基中进行增殖培养，不定芽基部的愈伤组织较多，但不影响增殖，不定芽生长迅速且 无玻璃化等不良现象，在培养基中生长发育良好；(3)不定芽壮苗培养在芽的增殖培养基上，诱导出的丛生芽中每丛有2-3株能够伸长，其余的处于矮 化状态，将丛生芽分成小丛后，转至壮苗培养基上生长，不定芽迅速伸长，15-30天后可以长 至 l-2cm ；(4)生根培养取l-2cm的不定芽小植株，转接入生根培养基中诱导生根，5-15天后幼苗基部分 化出白色的根原基，25-40天后可以长至4-6cm，根系粗壮，须根众多，生根率为90-100% ；(5)炼苗与移栽生根培养20-40天，根系长至0. 5-lcm时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室 内开瓶炼苗2-4天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室内的苗床中驯化20-40天，即 可移栽室外，给予肥水管理，最终的移栽成活率为90-100%。所述的芽诱导培养基包括MS+6-BA1. 0-3. 0mg/L+NAA0. 1-0. 3mg/L。所述的芽诱导培养基优选MS+6-BA1. 0mg/L+NAA0. lmg/L。所述的芽的增殖培养基包括MS+6-BA0. 2-2. Omg/L+NAAO. 1-0. 2mg/L。所述的芽的增殖培养基优选MS+6-BA0. 5mg/L+NAA0. lmg/L。所述的壮苗培养基包括MS+6-BA0. 1-1. Omg/L+NAAO. 1-0. 2mg/L。 所述的壮苗培养基优选 MS+6-BA0. 2mg/L+NAA0. lmg/L。所述的生根培养基包括MS+NAA0. 05-0. 2mg/L。所述的生根培养基优选MS+NAAO. 05mg/L。所述的培养基还包括蔗糖20_40g/L、琼脂粉4_8g/L，培养基pH5. 5-6. 0，培养温度 24-26°C，光照 1500-25001x。与现有技术相比，本专利技术通过组培技术，极大提高了莓叶萎陵菜的繁殖速度和苗 的整齐度，并提高了其性状的稳定性，可实现育苗的工厂化大批量生产。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。实施例1(1)无菌材料的获得取幼嫩的芽，去除外面包裹的叶片后，用自来水冲洗Ih后于超净工作台上，依次 利用质量浓度为70%的乙醇浸泡10s，体积浓度为0. 5%。的汞浸泡lOmin，再用无菌水冲洗 4次，利用无菌滤纸吸干表面的水分后，再切成0. 5cm长的带腋芽的节段，节段接种于包括 MS+6-BA1. Omg/L+NAAO. lmg/L 的芽诱导培养基上；(2)芽的分化和增殖节段接种于芽诱导培养基上1周后，腋芽部位开始膨大，出现黄绿色突起， 2周后可见芽分生组织，再培养1个月，不定芽可以长到1cm，将不定芽切下转入包括 MS+6-BA0. 2mg/L+NAA0. lmg/L的芽的增殖培养基中进行增殖培养，不定芽基部的愈伤组织 较多，但不影响增殖，不定芽生长迅速且无玻璃化等不良现象，在培养基中生长发育良好；(3)不定芽壮苗培养在芽的增殖培养基上，诱导出的丛生芽中每丛有2株能够伸长，其余的处于矮化 状态，将丛生芽分成小丛后，转至包括MS+6-BA0. lmg/L+NAAO. lmg/L的壮苗培养基上生长， 不定芽迅速伸长，15天后可以长至Icm ；(4)生根培养取Icm的不定芽小植株，转接入包括MS+NAAO. 05mg/L的生根培养基中诱导生根， 5天后幼苗基部分化出白色的根原基，25天后可以长至4cm，根系粗壮，须根众多，生根率为 90% ；(5)炼苗与移栽生根培养20天，根系长至0. 5cm时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室内开 瓶炼苗2天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室内的苗床中驯化20天，即可移栽室 外，给予肥水管理，最终的移栽成活率为90%。上述各种情况的培养基还包括蔗糖20g/L、琼脂粉4g/L，pH= 5. 5，培养温度24°C，5光照 15001x。实施例2(1)无菌材料的获得取幼嫩的芽，去除外面包裹的叶片后，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，依次 利用质量浓度为75%的乙醇浸泡30s，体积浓度为1%。的汞浸泡15min，再用无菌水冲洗 5次，利用无菌滤纸吸干表面的水分后，再切成Icm长的带腋芽的节段，节段接种于包括 MS+6-BA1. 0mg/L+NAA0. lmg/L 的芽诱导培养基上；(2)芽的分化和增殖节段接种于芽诱导培养基上2周后，腋芽部位开始膨大，出现黄绿色突起， 3周后可见芽分生组织，再培养1个月，不定芽可以长到2cm，将不定芽切下转入包括 MS+6-BA0. 5mg/L+NAA0. lmg/L的芽的增殖培养基中进行增殖培养，不定芽基部的愈伤组织 较多，但不影响增殖，不定芽生长迅速且无玻璃化等不良现象，在培养基中生长发育良好；(3)不定芽壮苗培养在芽的增殖培养基上，诱导出的丛生芽中每丛有3株能够伸长，其余的处于矮化 状态，将丛生芽分成小丛后，转至包括MS+6-BA0. 2mg/L+NAA0. lmg/L的壮苗培养基上生长， 不定芽迅速伸长，20天后可以长至2cm(4)生根培养取2cm的不定芽小植株，转接入包括MS+NAAO. 05mg/L的生根培养基中诱导生根， 10天后幼苗基部分化出白色的根原基，30天后可以长至6cm，根系粗壮，须根众多，生根率 为 100% ；(5)炼苗与移栽生根培养30天，根系长至Icm时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室内开瓶 炼苗3天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室内的苗床中驯化30天，即可移栽室外， 给予肥水管理，最终的移栽成活率为100%。上述各种情况的培养基还包括蔗糖30g/L、琼脂粉6g/L，pH = 5. 8，培养温度25°C， 光照 20001x。实施例3(1)无菌材料的获得取幼嫩的芽，去除外面包裹的叶片后，用自来水冲洗3h后于超净工作台上，依次 利用质量本文档来自技高网...

【技术保护点】
莓叶萎陵菜的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（１）无菌材料的获得取幼嫩的芽，去除外面包裹的叶片后，用自来水冲洗１－３ｈ后于超净工作台上，依次利用质量浓度为７０－７５％的乙醇浸泡１０－５０ｓ，体积浓度为０．５－２‰的汞浸泡１０－３０ｍｉｎ，再用无菌水冲洗４－６次，利用无菌滤纸吸干表面的水分后，再切成０．５－２ｃｍ长的带腋芽的节段，节段接种于芽诱导培养基上；（２）芽的分化和增殖节段接种于芽诱导培养基上１－３周后，腋芽部位开始膨大，出现黄绿色突起，２－４周后可见芽分生组织，再培养１－２个月，不定芽可以长到１－２ｃｍ，将不定芽切下转入芽的增殖培养基中进行增殖培养，不定芽基部的愈伤组织较多，但不影响增殖，不定芽生长迅速且无玻璃化等不良现象，在培养基中生长发育良好；（３）不定芽壮苗培养在芽的增殖培养基上，诱导出的丛生芽中每丛有２－３株能够伸长，其余的处于矮化状态，将丛生芽分成小丛后，转至壮苗培养基上生长，不定芽迅速伸长，１５－３０天后可以长至１－２ｃｍ；（４）生根培养取１－２ｃｍ的不定芽小植株，转接入生根培养基中诱导生根，５－１５天后幼苗基部分化出白色的根原基，２５－４０天后可以长至４－６ｃｍ，根系粗壮，须根众多，生根率为９０－１００％；（５）炼苗与移栽生根培养２０－４０天，根系长至０．５－１ｃｍ时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室内开瓶炼苗２－４天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室内的苗床中驯化２０－４０天，即可移栽室外，给予肥水管理，最终的移栽成活率为９０－１００％。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建华，黄建荣，沈勤，
申请(专利权)人：上海上房园林植物研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]