一种橘柄蔓绿绒组织培养方法技术

本发明专利技术公开了一种橘柄蔓绿绒的组织培养方法，包括如下步骤：获取并处理外植体；外植体接种到接种培养基中培养至顶芽萌发并抽长，启动诱导培养，接种在增殖培养基中培养，然后接种到过渡培养基中进行过渡培养，必要时进行生根培养。本发明专利技术的优点包括：培养周期短，且能够保证成苗率和生根率，能够获得株高2

【技术实现步骤摘要】
一种橘柄蔓绿绒组织培养方法


[0001]本专利技术涉及植物组织培养
，尤其一种蔓绿绒的培养方法。

技术介绍

[0002]橘柄蔓绿绒，又名橙柄蔓绿绒，拉丁名Philodendron billietiae Croat，为天南星科，蔓绿绒属；茎粗厚，短缩；叶具长柄，显橙橘色；叶片绿色至深绿色，中间具青色至白色叶脉，叶边缘橘色，革质，幼时通常盾状，成年植株的为箭状心形。其在中国东南部各省均有广泛栽种。由于市场需求量大，以往繁殖方式并不能够满足需求，因此研发一种能够满足生产需要的繁殖方式是有必要的。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种橘柄蔓绿绒组织培养方法，以解决现有技术中橘柄蔓绿绒生产量不能满足市场需求的问题。
[0004]为了达到上述目的本专利技术采用如下技术方案：
[0005]一种橘柄蔓绿绒的组织培养方法，包括如下步骤：
[0006](1)获取并处理外植体；
[0007](2)外植体接种到接种培养基中培养至顶芽萌发并抽长，接种培养基：MS、0.5
‑
1mg/L BA、0
‑
0.01mg/LNAA、30g/L蔗糖、7g/L卡拉胶，pH＝6；
[0008](3)启动诱导培养，切下顶芽接种到启动诱导培养基中培养，启动诱导培养基成分：MS、1.0mg/LBA、0.01mg/LNAA、30g/L蔗糖、7g/L卡拉胶，pH＝6；
[0009](4)将步骤(3)得到的团块芽切割，接种在增殖培养基中，增殖培养基：MS、0.5
‑
1.0mg/LBA、0.01mg/LNAA、30g/L蔗糖、7g/L卡拉胶，pH＝6；
[0010](5)将步骤(4)获得的增殖苗进行切割，然后接种到过渡培养基中进行过渡培养，第一次过渡培养的培养基是MS、0.2g/LAC、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2；第二次过渡培养的培养基是：MS、0.01mg/LNAA、0.2g/LAC、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2，或，MS、0.1mg/L NAA，30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2，或，MS、0.5mg/L IBA，30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2。
[0011]进一步地，所述步骤(5)培养结束后，将所得的过渡苗进行步骤(6)生根培养，其过程是：挑选达成苗标准的过渡苗，接种在生根培养基中，生根培养基：MS、0.01mg/LNAA、0.2g/LAC、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2，或，MS、0.1mg/LNAA、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2，或，MS、0.1mg/LNAA、0.2mg/L AC、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2。
[0012]进一步地，所述步骤(1)的过程包括：选取生长健壮、无病虫害、遗传性状纯正的母株，使植株干爽；将直径1.5cm，长度3.5cm的顶芽茎段切下，切去气生根及长叶柄，叶柄保留1.5cm左右长度，获得外植体；清理外植体表面并沿顶部苞叶的基部环割露出顶芽，然后消毒外植体。
[0013]进一步地，所述消毒外植体的方法包括：将外植体先后75％酒精消毒30s，0.1％升
汞30min，无菌水冲洗；以1
‑
2个芽点为标准进行外植体切割，切分外植体，接触消毒液的伤口处切下1
‑
2mm厚的部分制造新伤口。
[0014]进一步地，所述步骤(2)的过程包括：夹住外植体芽点朝上插入到接种培养基中，插入接种培养基深度约3mm，按如下要求进行培养：
[0015]培养条件：25℃，光照3000LX，12h光/12h暗；
[0016]培养周期：30
‑
50d。
[0017]进一步地，所述步骤(3)的过程包括：将顶芽从外植体上切下，去掉无用的愈伤组织和黑头，然后对半切开成两份，切开后接种至启动诱导培养基中，按如下要求进行培养：
[0018]培养条件：26
±
1℃，光照3000LX，12h光/12h暗；
[0019]转接周期：60
‑
70天；
[0020]若新芽生长情况不佳，可转接新的启动诱导培养基继续诱导培养。
[0021]进一步地，所述步骤(4)的过程包括：将步骤(3)得到的团块芽切割，切割要求：去除枯黄叶片及底部淡黄色或褐色愈伤组织，大芽去顶，保留0.8
‑
1cm长度，进行单芽増殖；小芽不去顶，视团块芽大小切成单芽或2
‑
4个芽团块，进行团块增殖，培养要求：
[0022]培养条件：25℃，光照3000LX，12h光/12h暗；
[0023]转接周期：35～60天。
[0024]进一步地，所述步骤(5)的过程包括：将步骤(4)得到的增殖苗去除底部愈伤组织，去掉枯黄叶片，小芽以3
‑
4个芽的团块形式将组培苗进行分割，不去顶，接种至准备好的培养基中进行过渡培养；大芽以单株形式接种至准备好的培养基中进行过渡培养，培养要求如下：
[0025]培养条件：25℃，光照3000LX，12h光/12h暗；
[0026]转接周期：40天。
[0027]进一步地，所述步骤(6)的培养要求：培养条件：25℃，光照3000LX，12h光/12h暗；
[0028]培养周期：12
‑
15天。
[0029]本专利技术的优点包括：培养周期短，且能够保证成苗率和生根率，能够获得株高2
‑
2.5cm，冠幅2.5
‑
3.5cm，叶长1.2
‑
1.8cm，叶宽0.8
‑
1.2cm，叶片3片以上，根长1.5
‑
2.5cm，根数2根以上的合格组培苗，产能可以满足市场需求。
附图说明
[0030]此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本申请的一部分，并不构成对本专利技术的不当限定，在附图中：
[0031]图1是橘柄蔓绿绒母株照片；
[0032]图2是预处理获得的外植体照片；
[0033]图3是细处理获得的外植体照片；
[0034]图4是消毒后外植体照片；
[0035]图5是接种培养前切分的外植体照片；
[0036]图6是外植体接种培养后长芽的实验照片；
[0037]图7是外植体接种培养50d后的实验照片；
[0038]图8是第一次启动诱导接种的照片；
[0039]图9是第一次启动诱导69d后的照片；
[0040]图10是第二次启动诱导接种的照片；
[0041]图11是第二次启动诱导66d后照片；
[0042本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种橘柄蔓绿绒的组织培养方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)获取并处理外植体；(2)外植体接种到接种培养基中培养至顶芽萌发并抽长，接种培养基：MS、0.5
‑
1mg/LBA、0
‑
0.01mg/LNAA、30g/L蔗糖、7g/L卡拉胶，pH＝6；(3)启动诱导培养，切下顶芽接种到启动诱导培养基中培养，启动诱导培养基成分：MS、1.0mg/LBA、0.01mg/LNAA、30g/L蔗糖、7g/L卡拉胶，pH＝6；(4)将步骤(3)得到的团块芽切割，接种在增殖培养基中，增殖培养基：MS、0.5
‑
1.0mg/LBA、0.01mg/LNAA、30g/L蔗糖、7g/L卡拉胶，pH＝6；(5)将步骤(4)获得的增殖苗进行切割，然后接种到过渡培养基中进行过渡培养，第一次过渡培养的培养基是MS、0.2g/LAC、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2；第二次过渡培养的培养基是：MS、0.01mg/LNAA、0.2g/LAC、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2，或，MS、0.1mg/LNAA，30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2，或，MS、0.5mg/LIBA，30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2。2.根据权利要求1所述的一种橘柄蔓绿绒的组织培养方法，其特征在于：所述步骤(5)培养结束后，将所得的过渡苗进行步骤(6)生根培养，其过程是：挑选达成苗标准的过渡苗，接种在生根培养基中，生根培养基：MS、0.01mg/LNAA、0.2g/LAC、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2，或，MS、0.1mg/LNAA、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2，或，MS、0.1mg/LNAA、0.2mg/LAC、30g/L蔗糖，6g/L卡拉胶，pH值6.0
‑
6.2。3.根据权利要求2所述的一种橘柄蔓绿绒的组织培养方法，其特征在于：所述步骤(1)的过程包括：选取生长健壮、无病虫害、遗传性状纯正的母株，使植株干爽；将直径1.5cm，长度3.5cm的顶芽茎段切下，切去气生根及长叶柄，叶柄保留1.5cm左右长度，获得外植体；清理外植体表面并沿顶部...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆小康，郭梓华，周博，黎东均，蔡桂奇，
申请(专利权)人：西昌海越生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：