一种替抗预防犊牛腹泻的微生物菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种替抗预防犊牛腹泻的微生物菌剂及其应用，所述菌剂由如下微生物发酵液组成：植物乳杆菌发酵液50

【技术实现步骤摘要】
一种替抗预防犊牛腹泻的微生物菌剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物菌剂
，具体涉一种替抗预防犊牛腹泻的微生物菌剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]犊牛一般指出生4
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6月的小牛，是畜禽中最重要的家畜之一，也是发展现代畜牧业所不可或缺的核心动物群体。然而，随着城市化趋势的不断发展，犊牛和经济畜禽养殖放在不可分割的关系中，每年部分犊牛因肠道疾病死亡，这其中以腹泻、感染性变形性腹痛和消化不良等疾病最为常见。根据报道，腹泻的发病率可高达80％以上，造成犊牛的重大损失。为了有效防治犊牛的腹泻，近几年来，微生物菌剂在奶牛群体中的应用越来越受到重视。
[0003]现有技术中，针对犊牛腹泻，多选用使用中药组合物来治疗，如CN CN114832029A公开一种防治犊牛腹泻的蒙药复方及其制备方法和用途，该蒙药复方以重量份计包含：蒙古马兰30～60份，北苍术15～30份，苦豆子25～50份，北沙参10～20份，银柴胡10～20份，甘草5～10份；制备方法是按配比分别称量各组分，粉碎好后进行混合，加水煎煮，过滤药渣，进行高温灭菌，灌装。
[0004]CN113476583A同样公开了一种治疗犊牛腹泻的组合物及制备方法，成分包括：肉桂、干姜、地锦草、老鹤草、铁苋菜、石榴皮。但中药制剂成分复杂，且制备工程繁琐。
[0005]微生物菌剂是由菌种特定的有益细菌混合调配而成，主要分为多重作用组合菌剂和特效菌剂两类，具有抗感染、调节因子代谢、促进肠道有益菌生长等多种作用。针对不同疾病，微生物菌剂具有一定的保护作用，且运用简单方便，费用低廉，且毒副作用小，在有效减少内部疾病发病风险、增强机体免疫力方面具有明显的前景。而现有的微生物菌剂缺乏有效的抗菌菌群，已实现可靠的预防犊牛腹泻的作用。
[0006]申请人前期研究中对一些益生菌在替抗方面的应用进行了研究，CN115449487A公开了一种替抗增产微生物菌剂，其包含液体菌剂和固体菌剂，液体菌剂和固体菌剂的体积质量比为1
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10:1，其中，所述液体菌剂为酿酒酵母发酵液、凝结芽孢杆菌发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液和植物乳杆菌发酵液的混合物，所述固体菌剂由酿酒酵母发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液经喷干后，按照体积比为1～3:1～3混合后制得。本专利技术的替抗增产微生物菌剂在奶牛养殖中的效果明显，不仅能解决养殖过程的环境问题，还能增加产奶量，氨气去除率可达81.3％，泌乳高峰期日平均产奶量增值高达4.74kg，是一款替抗增产的一体化养殖产品。鉴于其在奶牛养殖上良好的应用，进一步挖掘微生物菌剂在替抗中的应用，特别是开发一种可以预防犊牛腹泻微生物菌剂具有重要的意义。

技术实现思路

[0007]本申请在挖掘现有的有益菌种在畜禽养殖替抗上的应用时，意外的发现，通过将特定的微生物菌群进行复配，可以降低犊牛腹泻率，减少犊牛腹泻的发生，从而提高机体免疫力，可以提高犊牛粪便微生物菌群相对丰度，增加有益菌的含量，稳定肠道健康屏障，维
持肠道健康，有望在“替抗”养殖过程中发挥积极作用。
[0008]具体地，本专利技术提出了一种替抗预防犊牛腹泻微生物菌剂，所述微生物菌剂由植物乳杆菌发酵液、酿酒酵母发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液，按照体积比为50
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80:10
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30:10
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15混合后制得，其中：
[0009]所述植物乳杆菌购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CICC10345，在本专利技术复合微生态系统中，植物乳杆菌CICC10345具有很强的杀菌能力，特别是有效一致病原菌的繁殖；
[0010]所述酿酒酵母保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏日期2021年4月6日，保藏编号为GDMCC No.61598，生物材料名称为Saccharomyces cerevisiae WG，分类学名称为Saccharomyces cerevisiae，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所，酿酒酵母GDMCC No.61598生长迅速，可以快速消耗氧气，从而为乳酸菌的繁殖提供厌氧环境，同时该酿酒酵母富含蛋白、氨基酸、核苷酸和维生素；
[0011]所述枯草芽孢杆菌购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CICC10066，枯草芽孢杆菌CICC10066耐酸、耐胆盐，在其发酵培养过程中分泌可抑制病原菌生长的抗生物质。
[0012]所述植物乳杆菌发酵液的活菌数至少为106CFU/mL，酿酒酵母发酵液活菌数至少为107CFU/mL、枯草芽孢杆菌发酵液活菌数至少为108CFU/mL。
[0013]优选地，所述菌剂由如下微生物发酵液组成：植物乳杆菌发酵液70份、酿酒酵母发酵液20份和枯草芽孢杆菌发酵液10份。即按照体积比为7:2:1混合。
[0014]本专利技术进一步提出了上述犊牛腹泻预防微生物菌剂的制备方法，其中，分别制备植物乳杆菌发酵液、酿酒酵母发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液，并将制备得到的植物乳杆菌发酵液活菌数稀释至不少于106CFU/mL、酿酒酵母发酵液活菌数稀释至不少于107CFU/mL、枯草芽孢杆菌发酵液活菌数稀释至不少于108CFU/mL，按照配方量混合得到。
[0015]在一种具体实施方式中，可以通过如下方法制备得到植物乳杆菌发酵液、酿酒酵母杆菌发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液：
[0016](1)植物乳杆菌CICC10345发酵液的制备
[0017]菌种活化：将植物乳杆菌CICC10345划线接种于MRS固体平板，30～40℃培养24～48小时；
[0018]种子培养：挑取成熟单菌落转接入MRS液体培养基，培养条件为为搅拌转速100～200r/min，培养温度为30～40℃，培养时间为24～48h；
[0019]发酵罐培养：种子培养液以体积比5％～20％的接种量接入发酵罐，装量系数为相对于糖蜜液体培养基60～70％体积比，培养条件为搅拌转速300～500r/min，通气量为2～6L/min，培养温度为30～40℃，培养时间为24～48h，即得植物乳杆菌CICC10345发酵液。
[0020](2)酿酒酵母GDMCC No.61598发酵液的制备：
[0021]菌种活化：将酿酒酵母GDMCC No.61598划线接种于PDA固体平板，30～40℃培养48～72小时；
[0022]种子培养：挑取成熟单菌落转接入PDA培养基，培养条件为搅拌转速100～180r/min，培养温度为30～40℃，培养时间为48～72h；
[0023]发酵罐培养：种子培养液以体积比5％～20％的接种量接入发酵罐，装量系数为相
对于PDA液体培养基60～70％体积比，培养条件为搅拌转速100～200r/min，通气量为1～4L/min，培养温度为30～40℃，培养时间为48～72h，即得酿酒酵母GDMCC No.61598发酵液；
[0024](3)枯草芽孢杆菌CICC10066发酵液的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种替抗预防犊牛腹泻的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂由如下微生物发酵液组成：植物乳杆菌发酵液50
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80份、酿酒酵母发酵液10
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30份和枯草芽孢杆菌发酵液10
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15份，其中：所述植物乳杆菌购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CICC10345，所述植物乳杆菌发酵液活菌数不少于106CFU/mL；所述酿酒酵母保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No.61598，所述酿酒酵母发酵液活菌数不少于107CFU/mL；所述购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CICC10066，所述枯草芽孢杆菌酵液活菌数不少于108CFU/mL。2.根据权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于，所述菌剂由如下微生物发酵液组成：植物乳杆菌发酵液 70 份、酿酒酵母发酵液 20份和枯草芽孢杆菌发酵液10 份。3.权利要求1
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2任一项所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，分别制备植物乳杆菌发酵液、酿酒酵母发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液，并将制备得到的植物乳杆菌发酵液活菌数稀释至不少于106CFU/mL、酿酒酵母发酵液活菌数稀释至不少于107CFU/mL、枯草芽孢杆菌发酵液活菌数稀释至不少于108CFU/mL，按照配方量混合得到。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述植物乳杆菌发酵液通过如下方法制备得到:a菌种活化：将植物乳杆菌CICC10345划线接种于MRS固体平板，30～40℃培养24～48小时；b种子培养：挑取成熟单菌落转接入MRS液体培养基，在100～200r/min、培养温度为30～40℃下培养24～48h，得到种子培养液；c发酵罐培养：将种子培养液以体积比5%～20%的接种量接入发酵罐，装量系数为60～70%体积比，在300～500r...

【专利技术属性】
技术研发人员：应汉杰，施明雨，陈勇，刘庆国，马祥敏，
申请(专利权)人：南京高新工大生物技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：