一种用于治疗炎症性肠病的药物制造技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗炎症性肠病的药物，所述药物为装载靶向药物和Trim21蛋白结构域的胞外囊泡，所述靶向药物为能够将所述胞外囊泡靶向CD4

【技术实现步骤摘要】
一种用于治疗炎症性肠病的药物


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种用于治疗炎症性肠病的药物。

技术介绍

[0002]炎症性肠病(inflammatory bowel disease，IBD)是一种消化道常见的自身免疫性疾病，包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)和克罗恩病(Crohn's disease，CD)。Th17细胞是CD4
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T细胞在IL
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6和TGF
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β1共同作用下诱导分化成的一群以分泌高水平IL
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17A、IL
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17F、IL
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21、IL
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22等细胞因子为主要特征的效应性T细胞，广泛参与感染、肿瘤、自身免疫性疾病等疾病的发生发展。分析IBD患者肠道组织浸润细胞的组成成分以及来自小鼠IBD的研究数据均证实，效应性Th17细胞在肠道粘膜炎症中发挥重要作用(Jun
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Bin Yan，Min
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Min Luo，Zhi
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Yun Chen，Bei
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Hui He.The Functionand Role of the Th 1 7/Treg Cell Balance in Inflammatory Bowel Disease.J Immunol Res2020，2020：8813558.)。IL
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17A一方面招募中性粒细胞至炎症区域，另一方面诱发巨噬细胞释放炎症因子，进一步加重局部炎症(Veldhoen M.Interleukin 17is a chief orchestrator of immunity.Nature immunology 2017，18(6)：612
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621.)。哺乳动物的肠道定居着微生物群，这些菌群和免疫细胞之间的相互作用对维持肠道免疫稳态至关重要。肠道菌群能促进Th17细胞分化和Th17细胞因子表达。
[0003]胞外囊泡(Extracellular vesicles，EVs)是活细胞分泌的具有脂质双分子结构的小囊泡，可分为外泌体、核外颗粒、凋亡小体和癌小体4个亚群。作为一种天然内源性药物载体，它有其独特的优势：直径为纳米级别，可以穿透包括血脑屏障在内的多种屏障；具有复杂的蛋白质和磷脂双层结构，可以更好地保护药物不被身体清除；免疫原性低，作为载体携带药物或药用蛋白进行治疗时不会引起宿主的免疫反应。

技术实现思路

[0004]本申请研究发现，肠道菌群通过Trim21/FBXW7信号轴促进Th17细胞的体外分化，本申请构建了缺失泛素化功能的Trim21结构域(TΔR)，TΔR能有效拮抗Trim21与FBXW7结合，从而抑制Th17细胞分化。
[0005]本专利技术首先提供了装载靶向药物和Trim21蛋白结构域的胞外囊泡在制备治疗炎症性肠病的药物中的应用，
[0006]所述靶向药物为能够将所述胞外囊泡靶向CD4
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T细胞的靶向药物，
[0007]所述Trim21蛋白结构域为缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域。
[0008]优选的，所述靶向药物为CD4
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scFV，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
[0009]缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
[0010]优选的，所述靶向药物和Trim21蛋白结构域均连接有GPI锚定序列，GPI锚定序列的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。
[0011]所述胞外囊泡为外泌体、凋亡小体、癌小体或核外颗粒；
[0012]用于荷载药物的胞外囊泡来源于人或其他哺乳动物的乳汁、血液、唾液、尿液或脑脊液。
[0013]优选的，所述靶向药物和Trim21蛋白结构域饱和装载到胞外囊泡中，也即，在装载时，相对于胞外囊泡来说，靶向药物和Trim21蛋白结构域添加过量，并且装载后分离出去多余未装载的靶向药物和Trim21蛋白结构域。
[0014]本专利技术还提供了一种用于治疗炎症性肠病的药物，所述药物为装载靶向药物和Trim21蛋白结构域的胞外囊泡，
[0015]所述靶向药物为能够将所述胞外囊泡靶向CD4
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T细胞的靶向药物，
[0016]所述Trim21蛋白结构域为缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域。
[0017]优选的，所述靶向药物为CD4
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scFV，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
[0018]缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
[0019]优选的，所述靶向药物和Trim21蛋白结构域均连接有GPI锚定序列，GPI锚定序列的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。
[0020]所述胞外囊泡为外泌体、凋亡小体、癌小体或核外颗粒；
[0021]用于荷载药物的胞外囊泡来源于人或其他哺乳动物的乳汁、血液、唾液、尿液或脑脊液。
[0022]优选的，所述靶向药物和Trim21蛋白结构域饱和装载到胞外囊泡中，也即，在装载时，相对于胞外囊泡来说，靶向药物和Trim21蛋白结构域添加过量，并且装载后分离出去多余未装载的靶向药物和Trim21蛋白结构域。
[0023]外泌体是各种活细胞分泌的直径介于30
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150纳米具有脂质双分子层结构的小囊泡。目前，由于外泌体具有更低的免疫原性、更高的生物兼容性、更高的工程化修饰潜能、极易穿透血脑屏障以及逃逸溶酶体降解的特征，因此外泌体己成为一种非常有前景的药物输送载体，获得了研究者们的广泛关注。
[0024]本申请通过把能够将胞外囊泡靶向CD4
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T细胞的靶向药物和缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域装载到胞外囊泡中，由靶向药物将整个载药的胞外囊泡靶向运输到CD4
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T细胞，再由缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域与细胞内宿主Trim21竞争性结合FBXW7，从而拮抗肠道菌群促进Th17细胞分化的作用，起到治疗炎症性肠病的目的。
附图说明
[0025]图1为FBXW7同窝对照(FBXW7
+/+
)小鼠CD4
+
T细胞向Th17细胞极化能力检测结果图，“***”表示P<0.001(下同)。
[0026]图2为FBXW7条件性敲除(外周成熟CD4
+
T细胞中FBXW7缺失，FBXW7
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/
‑
)小鼠CD4
+
T细胞向Th17细胞极化能力检测结果图，“ns”表示没有统计学意义(下同)。
[0027]图3为FBXW7同窝对照(FBXW7
+/+
)小鼠CD4
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T细胞在anti
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CD3和anti<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.装载靶向药物和Trim21蛋白结构域的胞外囊泡在制备治疗炎症性肠病的药物中的应用，所述靶向药物为能够将所述胞外囊泡靶向CD4
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T细胞的靶向药物，所述Trim21蛋白结构域为缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶向药物为CD4
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scFV，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶向药物和Trim21蛋白结构域均连接有GPI锚定序列，GPI锚定序列的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胞外囊泡为外泌体、凋亡小体、癌小体或核外颗粒；用于荷载药物的胞外囊泡来源于人或其他哺乳动物的乳汁、血液、唾液、尿液或脑脊液。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶向药物和Trim21蛋白结构域饱和装载到胞外囊泡中。6.一种用于治疗炎症性肠病的药物，其特征在于，所述药...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡志坚，沈颖颖，王建莉，马泽宇，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：