一种用于双重miRNAs检测的分枝状核酸纳米探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于核酸检测技术领域，涉及一种用于双重miRNAs检测的分枝状核酸纳米探针及其制备方法和应用。本发明专利技术提供了一种用于双重miRNAs检测的分枝状核酸纳米探针，所述分枝状核酸纳米探针的组装用原料包括4条DNA链和4个发夹；所述4条DNA链的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～4所示，自组装形成十字形主干；所述4个发夹的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5～8所示，与十字形主干混合自组装形成分枝状核酸纳米探针。本发明专利技术所述分枝状核酸纳米探针对于所检测靶标miRNA

【技术实现步骤摘要】
一种用于双重miRNAs检测的分枝状核酸纳米探针及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于核酸检测
，具体涉及一种用于双重miRNAs检测的分枝状核酸纳米探针及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]癌症是严重威胁我国人民生命健康和生活水平的主要公共卫生问题之一，形势十分严峻。早期发现和手术仍是目前首选的、最有效的治疗方法，但是由于肺癌起病隐匿，缺乏典型的、特异性的临床症状和体征，病人就诊时多数为癌症中晚期，现有的诊断技术对于肿瘤的早期诊断仍具有较大的挑战。因此，“早期发现、早期诊断、早期治疗”，是提高及延长癌症患者生存率的关键所在。
[0003]microRNA(miRNA)是一类18～27个核苷酸序列的非编码小RNA，存在于单细胞和多细胞真核生物的细胞中，并发现它们的表达在多种人类癌症中失调。miRNA在许多实体瘤中表达较高，参与细胞增殖、分化和凋亡，因此与肿瘤生长、侵袭和转移密切相关，可用作癌症诊断和预后的分子生物标志物。研究表明miRNA与肿瘤的发生、发展、诊断、治疗、预后有着密切的关系。因此，miRNA的检测，尤其本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于双重miRNAs检测的分枝状核酸纳米探针，其特征在于，所述分枝状核酸纳米探针的组装用原料包括4条DNA链和4个发夹；所述4条DNA链包括L1、L2、L3和AS1411
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L4，核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～4所示，自组装形成十字形主干；所述4个发夹包括HP1、HP2、HP3和HP4，核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5～8所示，与十字形主干混合自组装形成分枝状核酸纳米探针；所述HP2和HP4上分别修饰有不同颜色的荧光基团和猝灭基团。2.根据权利要求1所述的分枝状核酸纳米探针，其特征在于，所述HP2的第24位点T碱基处修饰猝灭基团，3
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端尾部修饰荧光基团；所述猝灭基团包括Dabcyl，所述荧光基团包括FAM。3.根据权利要求1所述的分枝状核酸纳米探针，其特征在于，所述HP4的第17位点T碱基处修饰猝灭基团，第44位点T碱基上修饰荧光基团；所述猝灭基团包括BHQ
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2，所述荧光基团包括cy3。4.权利要求1～3任一项所述分枝状核酸纳米探针的制备方法，包括以下步骤：将4条DNA链L1、L2、L3和AS1411
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L4混合，变性，得到十字形主干；将所述十字形主干与4个发夹HP1、HP2、HP3和HP4混合，孵...

【专利技术属性】
技术研发人员：申志发，黎婵，薛昌，吴再生，刘继成，
申请(专利权)人：上海志药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：