人参皂苷Rk1在制备治疗阿尔茨海默病的功能食品、保健品和药品中的应用制造技术

本发明专利技术公开人参皂甙Rk1在制备治疗阿尔茨海默病的功能食品、保健品和药品中的应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术发现人参皂苷Rk1能够减少β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的细胞凋亡，恢复了PC12细胞和原代培养神经元的线粒体膜电位并减少了细胞内活性氧(ROS)，人参皂苷Rk1显著改善了AD模型老鼠APP/PS1认知缺陷和AD型病变，人参皂苷Rk1通过调节AMP活化蛋白激酶(AMPK)和核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)信号通路，以优化线粒体膜电位，降低活性氧水平，并减少AD型病理。本发明专利技术揭示了人参皂苷Rk1对Aβ毒性的神经保护作用，并有助于开发基于人参皂苷Rk1的AD治疗药物。皂苷Rk1的AD治疗药物。皂苷Rk1的AD治疗药物。

【技术实现步骤摘要】
人参皂苷Rk1在制备治疗阿尔茨海默病的功能食品、保健品和药品中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及人参皂苷Rk1在制备治疗阿尔茨海默病的功能食品、保健品和药品中的应用。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默病(AD)是痴呆症最常见的原因，随着人口老龄化，它已成为全球最严重的社会问题之一。AD的特征是细胞内神经纤维缠结和细胞外老年斑。Aβ由淀粉样前体蛋白(APP)经β
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分泌酶和γ
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分泌酶裂解产。研究表明，可溶性Aβ寡聚体可能是AD中最具神经毒性和病理性的形式，损害突触功能、记忆和认知，诱导tau过度磷酸化；并刺激活性氧(ROS)的产生，进而导致氧化应激。AMPK是一种调节抗氧化应激的关键转录因子，在诱导机体抗氧化反应中起着重要作用。AMPK磷酸化Nrf2并促进其核积累，以促进抗氧化反应元件(ARE)驱动的基因转录激活，使细胞恢复其抗氧化能力。
[0003]人参是一种广泛分布于中国、韩国和日本等亚洲国家的天然草本植物。人参不仅用于医药，还用作支持身体功能的功能性食品。人参皂苷Rk1是在高温下加工人参植物获得的独特成分。然而，人参皂苷Rk1在治疗AD中的应用及其潜在作用机制的相关研究还未见报道。

技术实现思路

[0004]鉴于此，本专利技术的目的是提供人参皂甙Rk1在制备治疗阿尔茨海默病的功能食品、保健品和药品中的应用。本专利技术采用Aβ42诱导的细胞损伤模型和转基因淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)AD小鼠，研究人参皂苷Rk1在AD中的防治潜力和潜在作用机制，为AD的预防和治疗提供了新的治疗途径。
[0005]本专利技术目的是通过以下方式实现：
[0006]本专利技术提供人参皂甙Rk1或其药学上可接受的盐在制备治疗阿尔茨海默病的功能食品、保健品和药品中的应用。
[0007]基于上述技术方案，进一步地，所述的功能食品包括粉剂、乳制品和液体饮料。
[0008]基于上述技术方案，进一步地，所述的药品包括有效量的人参皂甙Rk1或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
[0009]基于上述技术方案，进一步地，所述的药学上可接受的载体包括填充剂、稀释剂、粘合剂、崩解剂、乳化剂和无毒副作用的载药载体。
[0010]基于上述技术方案，进一步地，所述的药品的剂型包括片剂、颗粒剂、口服液体制剂、滴剂、注射制剂和胶囊制剂。
[0011]基于上述技术方案，进一步地，所述的药品以单剂量药物形式制备。
[0012]基于上述技术方案，进一步地，所述的单剂量药物包含1
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1000mg人参皂甙Rk1或其药学上可接受的盐。
[0013]基于上述技术方案，进一步地，所述的功能食品、保健品和药品能够减轻Aβ1
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42诱导的PC12细胞神经毒性。
[0014]基于上述技术方案，进一步地，所述的功能食品、保健品和药品能够改善APP/PS1AD小鼠的认知缺陷和AD型病变。
[0015]基于上述技术方案，进一步地，所述的功能食品、保健品和药品通过激活AMPK/Nrf2通路减轻神经细胞损伤和氧化应激。
[0016]本专利技术相对于现有技术具有的有益效果如下：
[0017]本专利技术首次发现人参皂苷Rk1通过减少ROS生成和纠正线粒体膜电位，对Aβ诱导的神经元培养物具有神经保护作用。在APP/PS1
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AD小鼠中，人参皂苷Rk1有效地减轻了AD症状，并对与大脑中Aβ积累相关的各种神经退行性生化事件产生了有益的影响。最显著的治疗效果是抗氧化作用、神经保护和显著减少神经炎症。从机理上讲，我们发现人参皂苷Rk1的作用伴随着PC12细胞和APP/PS1小鼠模型中AMPK信号通路的激活，揭示了人参皂苷Rk1作为AD治疗新候选药物的潜力，为AD治疗提供了一个新的途径。
附图说明
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施例，下面将对实施例涉及的附图进行简单地介绍。
[0019]图1为人参皂苷Rk1可减轻Aβ1
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42诱导的PC12细胞神经毒性图。
[0020]图2为人参皂苷Rk1通过刺激AMPK/Nrf2信号传导，与对Aβ1
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42诱导的PC12细胞氧化应激的神经保护作用相关图。
[0021]图3为AMPK抑制剂逆转人参皂苷Rk1对PC12细胞的保护作用图。
[0022]图4为人参皂苷Rk1改善APP/PS1 AD小鼠的认知障碍图。
[0023]图5为人参皂苷Rk1改善AD型病理学图。
[0024]图6为人参皂苷Rk1通过激活AMPK减轻APP/PS1小鼠的神经元损伤图。
[0025]图7为人参皂苷Rk1通过AMPK通路对Aβ1
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42诱导的原代培养神经元损伤具有神经保护作用图。
具体实施方式
[0026]下面结合实施例对本专利技术进行详细的说明，但本专利技术的实施方式不限于此，显而易见地，下面描述中的实施例仅是本专利技术的部分实施例，对于本领域技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，获得其他的类似的实施例均落入本专利技术的保护范围。
[0027]实施例1
[0028]PC12细胞在添加10％胎牛血清(FBS)和0.1％青霉素/链霉素的培养基(DMEM)中培养(75cm2细胞培养瓶)，并在37℃和5％CO2增湿空气中培养。每2
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3天更换一次培养基，当细胞达到80
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90％的融合率时，用0.25％的胰蛋白酶进行继代培养。消化后，细胞以1000rpm离心3分钟，然后重新悬浮在新鲜培养基中。实验采用贴壁细胞培养。取对数生长期的PC12细胞，待细胞长到80％，用含10％ FBS的DMEM调整到浓度为5*103个/mL，接种于96孔板，每孔100uL；接种于12孔板，每孔1mL。
[0029]MTT法评估细胞活力：细胞以5
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103个细胞/孔的密度接种在96孔板中的完整培养基中。第二天，将种子细胞分别与以下物质孵育24小时：(1)空白溶剂(CTL)；(2)不同浓度的
Aβ1
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42；(3)同时添加Aβ1
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42和的人参皂苷Rk1。处理24h后，细胞进一步加入MTT(0.5mg/ml)孵育3
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4小时，并用100μl DMSO替换培养基，以溶解活细胞形成的蓝色甲臜晶体。使用微孔板阅读器在570nm处测量吸光度。细胞存活率按对照组的百分比计算，结果如图1(B)所示。
[0030]将PC12细胞首先使用1.25μM人参皂苷Rk1预处理24h，然后用或不用10μM Aβ1
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42诱导24h，通过LDH释放试验、DAPI染色、流式细胞仪等方式对细胞的凋亡进行检测，检测结果如图1(C
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J)，图1(C)为通过LDH释放试验测定细胞损伤。图1(D)为DAPI染色检测凋亡细胞。图1(E)为细胞凋亡中凋亡细胞的数量本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.人参皂甙Rk1或其药学上可接受的盐在制备治疗阿尔茨海默病的功能食品、保健品和药品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的功能食品包括粉剂、乳制品和液体饮料。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药品包括有效量的人参皂甙Rk1或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的药学上可接受的载体包括填充剂、稀释剂、粘合剂、崩解剂、乳化剂和无毒副作用的载药载体。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药品的剂型包括片剂、颗粒剂、口服液体制剂、滴剂、注射制剂和胶囊制剂。6.根据权利要求1所述的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁广，赵霞，佘凌宇，钟丽丽，秦元锴，刘玫，尹丽娜，
申请(专利权)人：杭州医学院，
类型：发明
国别省市：