【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学检测，尤其涉及矽肺的外泌体蛋白标志物及其应用。
技术介绍
1、矽肺是在建筑工地、矿山、采石作业和碎石作业等职业环境中，因长期吸入大量游离二氧化硅而引起的以肺部炎症和弥漫性纤维化为主要特征的进行性不可逆肺部疾病。矽肺是尘肺中进展最快、危害最严重的一种疾病，对人民健康和社会经济造成巨大损害。目前尚无行之有效的治疗方法可以逆转矽肺的病程进展，使用生物标志物对矽肺进行早期诊断对矽肺的防治具有重要意义。
2、《exploratory study on noninvasive biomarker of silicosis in exhaledbreath by solid-phase microextraction–gas chromatography–mass spectrometryanalysis》公开了一项利用固相微萃取-气相色谱-质谱分析呼出气中矽肺无创生物标志物的探索性研究，其筛选出2,3-丁二酮、乙酸乙酯、氯苯、邻伞花烃、4-乙基己-2-炔醛、3,5-二甲基-3-庚醇、对苯二酚、邻苯二甲酸酐和5-(2-甲基丙基)壬烷9个生物标志物，在对这9个生物标志物构建联合诊断模型后，auc等于0.735，敏感性和特异性分别达到60.3％和89.2％。
3、《serum levels of inflammatory mediators as prognostic biomarker insilica exposed workers》公开了一项采用elisa的方法检测血清细胞因子的矽肺标志物的研究，诊
4、现有的矽肺生物标志物灵敏度和特异度普遍不高。目前亟需探索新的生物标志物以指导矽肺的早期诊断。
5、有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种矽肺的外泌体蛋白标志物及其应用。
2、具体地，本专利技术提供的技术方案如下：
3、第一方面，本专利技术提供了矽肺的外泌体蛋白标志物，所述外泌体蛋白标志物包括pip和/或calml5。
4、本专利技术从矽肺病人和健康对照人群的血浆中提取外泌体，然后将采用dia(dataindependent analysis，dia)的技术手段筛选血浆外泌体中的差异蛋白，接着采用prm(parallel reaction monitoring,prm)分析方法在另一批人群样本中验证筛选出的差异蛋白。将验证出的与dia结果中表达趋势一致的蛋白挑选出来，把dia和prm数据标准化合并后做roc曲线分析，选取roc曲线下面积最大的指标，联合检测后观察检测效能。通过比较，最终确定用pip和calml5两个指标联合检验的方法进行矽肺的早期诊断。本专利技术发现，在矽肺患者体内，pip、calml5的表达量较非矽肺患者下调。相比从血浆中直接检测生物标志物，从分离的外泌体中检测标志物，外泌体的脂质双层结构可以保护其中携带的内容物不被降解。本专利技术从血浆来源的外泌体中检测标志物，其检测结果更稳定。
5、本专利技术提供的其中一种外泌体蛋白标志物pip(prolactin-inducible protein)，其独立检测的roc曲线下面积(auc)为0.854，灵敏度为0.778，特异度为0.800。
6、本专利技术提供的另外一种外泌体蛋白标志物calml5(calmodulin-like protein5)，其独立检测的roc曲线下面积(auc)为0.852，灵敏度为0.889，特异度为0.719。
7、本专利技术提供的两个外泌体蛋白标志物pip和calml5联合检测时，roc曲线下面积(auc)为0.915，灵敏度为0.938，特异度为0.889。
8、第二方面，本专利技术提供了所述矽肺的外泌体蛋白标志物，或其检测试剂在制备用于鉴别诊断矽肺的产品中的应用，所述产品为药物或试剂盒。
9、基于pip、calml5在矽肺患者中的特异性差异化表达，利用pip、calml5的检测试剂，可根据待测样品中pip、calml5的检测结果，判断待测样品来源的个体是否患有矽肺。
10、第三方面，本专利技术提供了所述矽肺的外泌体蛋白标志物在作为矽肺治疗的药物靶点中的应用。
11、pip、calml5在矽肺患者中的具有特异性差异化表达，可能作为矽肺治疗的潜在治疗靶点，在矽肺的靶向治疗中发挥作用。
12、第四方面，本专利技术提供了一种鉴别诊断矽肺的产品，所述产品包括所述矽肺的外泌体蛋白标志物或其检测试剂。
13、优选地，所述产品为药物或试剂盒。
14、第五方面，本专利技术提供了一种鉴别诊断矽肺的装置，所述装置包括：
15、检测模块，用于检测所述矽肺的外泌体蛋白标志物在待测样品中的含量；
16、输入模块，用于获取检测模块的检测结果；
17、判断模块，用于将输入模块获取的检测结果与非矽肺患者进行比较，判断是否为矽肺；
18、输出模块，用于输出诊断结果。
19、优选地，所述判断模块的判断标准包括：若待测样品中的pip和/或calml5的含量较非矽肺患者显著下调，则判断为矽肺。
20、在本专利技术一次具体地检测结果中，和非矽肺患者相比，矽肺患者的pip下调了34.0％，calml5下调了33.3％。因此，在本专利技术提供的更优选地实施方式中，所述判断模块的判断标准包括：若待测样品中的pip和/或calml5的含量较非矽肺患者下调≥30％，则判断为矽肺。
21、优选地，所述待测样品为血浆。
22、有益效果：
23、本专利技术采用dia技术从矽肺病人和健康对照人群的血浆外泌体中提取差异蛋白，并进一步利用prm分析技术对筛选得到的外泌体蛋白检测结果进行验证，最终获得了两种灵敏度和特异性均具有显著优势的外泌体蛋白标志物pip和calml5。本专利技术研究结果表明：pip和calml5可单独或联合用于矽肺的早期诊断，诊断结果准确可靠，特异度和灵敏度均良好。
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1.矽肺的外泌体蛋白标志物，其特征在于，所述外泌体蛋白标志物包括PIP和/或CALML5。
2.根据权利要求1所述矽肺的外泌体蛋白标志物，其特征在于，在矽肺患者体内，PIP、CALML5的表达量较非矽肺患者下调。
3.权利要求1或2所述矽肺的外泌体蛋白标志物，或其检测试剂在制备用于鉴别诊断矽肺的产品中的应用，其特征在于，所述产品为药物或试剂盒。
4.权利要求1或2所述矽肺的外泌体蛋白标志物在作为矽肺治疗的药物靶点中的应用。
5.一种鉴别诊断矽肺的产品，其特征在于，所述产品包括权利要求1或2所述矽肺的外泌体蛋白标志物或其检测试剂。
6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述产品为药物或试剂盒。
7.一种鉴别诊断矽肺的装置，其特征在于，所述装置包括：
8.根据权利要求7所述的鉴别诊断矽肺的装置，其特征在于，所述判断模块的判断标准包括：若待测样品中的PIP和/或CALML5的含量较非矽肺患者显著下调，则判断为矽肺。
9.根据权利要求8所述的鉴别诊断矽肺的装置，其特征在于，所述判断模块的判
10.根据权利要求7-9任意一项所述的鉴别诊断矽肺的装置，其特征在于，所述待测样品为血浆。
...【技术特征摘要】
1.矽肺的外泌体蛋白标志物，其特征在于，所述外泌体蛋白标志物包括pip和/或calml5。
2.根据权利要求1所述矽肺的外泌体蛋白标志物，其特征在于，在矽肺患者体内，pip、calml5的表达量较非矽肺患者下调。
3.权利要求1或2所述矽肺的外泌体蛋白标志物，或其检测试剂在制备用于鉴别诊断矽肺的产品中的应用，其特征在于，所述产品为药物或试剂盒。
4.权利要求1或2所述矽肺的外泌体蛋白标志物在作为矽肺治疗的药物靶点中的应用。
5.一种鉴别诊断矽肺的产品，其特征在于，所述产品包括权利要求1或2所述矽肺的外泌体蛋白标志物或其检测试剂。
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【专利技术属性】
技术研发人员：楼建林，李泳欣，冯玲芳，蒋兆强，徐华东，龚晓雪，姚佳慧，董小雯，黄婧，刘爽，徐彪，秦瑶，
申请(专利权)人：杭州医学院，
类型：发明
国别省市：
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