一种拮抗烟草赤星病病原菌的菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种解淀粉芽孢杆菌，解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)为解淀粉芽孢杆菌XT

【技术实现步骤摘要】
一种拮抗烟草赤星病病原菌的菌株及其应用


[0001]本专利技术涉及拮抗烟草赤星病病原菌菌株的筛选
，更具体的说是涉及一种拮抗烟草赤星病病原菌的菌株及其应用。

技术介绍

[0002]烟草赤星病是由链格孢菌(Alternaria alternata)引起的一种真菌性病害。是烟草上危害最为严重的病害之一，在我国大部分烟区均有发生，其中湖南、河南、云南等烟区颇为严重，每年因烟草赤星病造成的损失高达上亿元，严重影响烟叶种植的经济效益。
[0003]烟草赤星病的防治方法主要有化学、农业和生物防治，其中化学防治应用广泛且实用，但带来的农药残留、病原菌产生抗药性等问题越来越突出。农业防治存在耗时耗力，操作繁琐等问题。因此，低成本、无残留、无毒且高效的生物防治是目前防治烟草赤星病研究的热点之一。目前用于生物防治的相关生防菌属多为木霉菌、芽孢杆菌、链霉菌等。
[0004]其中，芽孢杆菌属细菌在植物根际中极为丰富，其繁殖速度快、生物安全性高，兼具广谱抗病性和促生作用，正逐渐成为生防菌的研究热点，并逐步走向生产应用。芽孢杆菌属生防菌对防治烟草赤星病具有较大应用前景，但是有关解淀粉芽孢杆菌防治烟草赤星病的研究还较少。
[0005]因此，如何提供一种可以拮抗烟草赤星病病原菌的菌株是本领域技术人员亟待解决的技术问题

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术提供了一种拮抗烟草赤星病病原菌的菌株，并将该菌株应用于防治烟草赤星病中，提高了防治效果，避免了生化农药制剂的副作用。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0008]一株解淀粉芽孢杆菌，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)为解淀粉芽孢杆菌XT
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2，于2022年11月01日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M20221706，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，分类学命名为Bacillus amyloliquefaciens XT
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2。
[0009]作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护所述的解淀粉芽孢杆菌XT
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2在制备拮抗烟草赤星病病原菌的微生物制剂中的应用。
[0010]作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护一种拮抗烟草赤星病病原菌的微生物制剂，所述微生物制剂包括解淀粉芽孢杆菌XT
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2。
[0011]经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术公开提供了一种解淀粉芽孢杆菌，用于拮抗烟草赤星病病原菌，防治效率较高，且绿色环保，不会对环境造成污染。
附图说明
[0012]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现
有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0013]图1附图为本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌XT
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2与烟草赤星病的对峙培养结果图；
[0014]图2附图为本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌XT
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2对烟草赤星病菌菌丝的抑菌效果图；
[0015]图3附图为本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌XT
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2的菌落形态图；
[0016]图4附图为本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌XT
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2的16S rDNA PCR产物凝胶电泳图；
[0017]图5附图为本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌XT
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2的系统发育树结果图；
[0018]图6附图为本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌XT
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2对供试病原菌的拮抗作用。
具体实施方式
[0019]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0020]实施例中用到的材料、试剂和仪器：
[0021]烟草根际土壤：从湖南烟区烟草赤星病重病烟田中采集的健康烟株根际土壤。
[0022]烟草品种：云烟87
[0023]供试菌株：烟草赤星病菌(Alternaria alternate)、烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、茄病镰刀菌(Fusarium solani)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)保存于湖南农业大学植物病理学实验室。
[0024]培养基与药剂
[0025]马铃薯葡萄糖琼脂培养基：土豆200g洗净去皮在1L蒸馏水中煮沸，经纱布过滤后加入葡萄糖20g、琼脂粉15～20g，用玻璃棒搅拌至药品溶解，再加入蒸馏水定容至1L。将1L培养基分装在500ml锥形瓶中，每瓶加入200ml,经高压蒸汽灭菌锅在121℃下湿热灭菌30min，冷却备用。
[0026]燕麦培养基：将燕麦30g洗净后加入1L蒸馏水中煮沸，纱布过滤后定容至1L，再加入琼脂粉15～20g，搅拌至药品溶解，灭菌及分装方法同上。
[0027]LB液体培养基：称取NaCl 10g、胰蛋白胨10g和酵母粉5g，加入500ml去离子水。用玻璃棒搅拌至药品全部溶解，再加去离子水定容至1L，灭菌及分装方法同上。
[0028]LB固体培养基：在LB液体培养基基础上加15～20g/L琼脂粉，搅拌至药品溶解，灭菌及分装方法同上。
[0029]药剂：葡萄糖、琼脂粉、胰蛋白胨、NaCl、酵母粉、L
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色氨酸(100mg/L)、吲哚乙酸(IAA)液，购自国药集团化学试剂有限公司；Salkowskis比色液，150mL浓硫酸溶于250mL纯水中，加入7.5mL的0.5mol/L三氯化铁[FeCl3·
6H2O]。
[0030]实验仪器
[0031]2L量筒、玻璃棒、2ml离心管、15ml离心管、移液枪、涂布棒、一次性培养皿、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、摇床等。
[0032]实施例1菌株筛选
[0033]1)取样
[0034]从湖南烟区烟草赤星病重病烟田中连根挖取健康的烟苗，将烟苗装入灭过菌的纸袋子中保存，带回实验室后，将烟草根部的土抖落下来，将粗土过筛留下细土。
[0035]2)土壤细菌的分离与纯化
[0036]取土样10g于盛有90mL无菌水的三角瓶中，30℃、180r/min振荡培养30min，静置5min后，取土壤悬浮液，用无菌水稀释浓度梯度分别为10
‑1、10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5、10
‑6。用移液枪吸取0.1mL各个梯度的土壤稀释液，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株解淀粉芽孢杆菌，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefacien s)为解淀粉芽孢杆菌XT
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2，于2022年11月01日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M20221706，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，分类学命名为Bacillusamyl...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖志鹏，王灿，母婷婷，盛丰，向鹏华，熊有明，李建华，周劲东，陈智杰，唐前君，
申请(专利权)人：湖南省烟草公司衡阳市公司，
类型：发明
国别省市：