BSH荧光探针PET-CT九宫格癌细胞试剂硼浓度测定法制造技术

本发明专利技术公开了BSH荧光探针PET

【技术实现步骤摘要】
BSH荧光探针PET
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CT九宫格癌细胞试剂硼浓度测定法


[0001]本专利技术涉及硼浓度测定
，具体为BSH荧光探针PET
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CT九宫格癌细胞试剂硼浓度测定法。

技术介绍

[0002]BSH是一种含巯基的硼笼化合物，其在生物环境下具有良好的水解和代谢稳定性，含硼量高，在相同的浓度剂量水平下与BPA相比，能够载带更多的B10至肿瘤组织，是目前最有效的BNCT药物之一。BSH分子中含有12个B原子，中文全名是巯基十二硼烷，由日本神经外科医生畠中坦从美国带回日本，经验证在脑肿瘤的分布聚集性良好，1968年首次用于BNCT疗法中对脑肿瘤的治疗，在应用BSH进行开颅术中照射下，取得一定疗效。美国与日本已批准BSH用于临床研究，但尚未具备上市条件。BSH早期被应用于临床研究，但由于BSH不能透过血脑屏障，肿瘤摄取和滞留较低，并存在一定的毒性作用，限制了其临床应用普及。BSH从癌症组织的脆弱血管中漏出，进入间质液，并且仅在细胞周围贮留，且本身通过细胞膜的能力趋于偏弱。BSH用于脑肿瘤存在争议。为了解决BSH进入细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.BSH荧光探针PET
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CT九宫格癌细胞试剂硼浓度测定法，其特征在于：使用BSH荧光探针PET
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CT仪，按九宫格学说选择内胚层、中胚层及外胚层三个胚层不同的肿瘤细胞，再分别对其进行ic50、PET
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CT进行检测，包括以下步骤：步骤一、细胞复苏，复苏细胞以注入Cl
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BSH，水浴锅加热至37℃，消毒仪器并把4mL10％胎牛血清和1％的双抗的McCoys5A培养液加入离心管；将U
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251细胞冻存管置于预热好的水浴锅中并不时向同一方向晃动至管中冰晶全部融化为液体，消毒；吹打冻存液，吸出细胞悬液，离心管内1000rpm/min离心5min；弃去上清液，沉淀中加入1mL培养液，吹打后转移至培养瓶中并加适量培养液观察细胞；步骤二、培养与传代，为获得更多细胞以便于进行Cl
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BSH硼浓度进行测定，需先进行培养与传代，瓶中贴壁细胞铺满培养瓶底部80％～90％后，用PBS3mL清洗细胞2次，加0.25％1.5mL胰酶，3～4min后晃动并观察，细胞不抱团时加两倍量培养液终止消化；15mL离心管，1000rpm/min离心5min；弃上清，底部加1mLMcCoys5A培养液，吹打至混悬，取1/3并补充6mL培养液；步骤三、cck
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8法测Cl
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BSHic50，1.5mL0.25％胰酶加入U
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251细胞，1000rpm/min离心5min，观察；96孔板接种100μL3k
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7k/孔的细胞，37℃、5％CO2、90％湿度培养24小时；配不同浓度梯度的样本溶液，每个浓度三个复孔加入10μL到96孔板中，培养6，12，24或48小时；解冻并离心CCK8，并每孔中加10μL的CCK
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8溶液。2.根据权利要求1所述的BSH荧光探针PET
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CT九宫格癌细胞试剂硼浓度测定法，其特征在于：所述检测在进行时必须分别检测上述肿瘤细胞混悬液在肿瘤组织、正常组织、血液中不同的Cl
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浓度，并计算出肿瘤组织、正常组织、血液中不同的B
10
浓度，最后计得肿瘤组织与正常组织B
10
浓度比(T/N),肿瘤组...

【专利技术属性】
技术研发人员：张瑞龙，刘钊，陈绍颖，曹致宏，
申请(专利权)人：中科高能广州医疗科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：